Informatie

8.16: Karyotypen - Biologie


Leerresultaten

Identificeer een karyotype en beschrijf het gebruik ervan in de biologie

De isolatie en microscopische observatie van chromosomen vormt de basis van cytogenetica en is de primaire methode waarmee clinici chromosomale afwijkingen bij mensen detecteren. EEN karyotype is het aantal en het uiterlijk van chromosomen, en omvat hun lengte, bandpatroon en centromeerpositie. Om een ​​beeld te krijgen van iemands karyotype, fotograferen cytologen de chromosomen en knippen en plakken ze elk chromosoom in een grafiek, of karyogram, ook bekend als een ideogram (Figuur 1). Het eenvoudigste gebruik van een karyotype (of zijn karyogrambeeld) is om abnormale chromosomale getallen te identificeren.

In een bepaalde soort kunnen chromosomen worden geïdentificeerd aan de hand van hun aantal, grootte, centromeerpositie en bandpatroon. In een menselijk karyotype, autosomen of "lichaamschromosomen" (alle niet-geslachtschromosomen) zijn over het algemeen gerangschikt in geschatte grootteorde van grootste (chromosoom 1) tot kleinste (chromosoom 22). De X- en Y-chromosomen zijn geen autosomen. chromosoom 21 is echter eigenlijk korter dan chromosoom 22. Dit werd ontdekt nadat het syndroom van Down trisomie 21 werd genoemd, wat weergeeft hoe deze ziekte het gevolg is van het bezit van één extra chromosoom 21 (drie in totaal). Omdat het de naam van deze belangrijke ziekte niet wilde veranderen, behield chromosoom 21 zijn nummering, ondanks het beschrijven van de kortste set chromosomen. De chromosoom "armen" die aan beide uiteinden van het centromeer uitsteken, kunnen worden aangeduid als kort of lang, afhankelijk van hun relatieve lengte. De korte arm wordt afgekort P (voor "petite"), terwijl de lange arm is afgekort Q (omdat het alfabetisch op "p" volgt). Elke arm is verder onderverdeeld en aangeduid met een nummer. Met behulp van dit naamgevingssysteem kunnen locaties op chromosomen consistent worden beschreven in de wetenschappelijke literatuur.

Genetici gebruiken karyogrammen om chromosoomafwijkingen te identificeren

Hoewel Mendel de 'vader van de moderne genetica' wordt genoemd, voerde hij zijn experimenten uit met geen van de hulpmiddelen die de genetici van tegenwoordig routinematig gebruiken. Een zo'n krachtige cytologische techniek is karyotypering, een methode waarbij kenmerken die worden gekenmerkt door chromosomale afwijkingen uit een enkele cel kunnen worden geïdentificeerd. Om het karyotype van een persoon te observeren, worden eerst de cellen van een persoon (zoals witte bloedcellen) verzameld uit een bloedmonster of ander weefsel. In het laboratorium worden de geïsoleerde cellen gestimuleerd om actief te gaan delen. Een chemische stof genaamd colchicine wordt vervolgens op cellen aangebracht om gecondenseerde chromosomen in metafase te stoppen. Cellen worden vervolgens gemaakt om te zwellen met behulp van een hypotone oplossing zodat de chromosomen uit elkaar spreiden. Ten slotte wordt het monster bewaard in een fixeermiddel en op een objectglaasje aangebracht.

De geneticus kleurt vervolgens chromosomen met een van de verschillende kleurstoffen om de verschillende en reproduceerbare bandpatronen van elk chromosoompaar beter te visualiseren. Na kleuring worden de chromosomen bekeken met behulp van helderveldmicroscopie. Een veel voorkomende vlekkeuze is de Giemsa-vlek. Giemsa-kleuring resulteert in ongeveer 400-800 banden (van strak opgerold DNA en gecondenseerde eiwitten) die langs alle 23 chromosoomparen zijn gerangschikt; een ervaren geneticus kan elke band identificeren. Naast de bandpatronen worden chromosomen verder geïdentificeerd op basis van grootte en centromeerlocatie. Om de klassieke weergave van het karyotype te verkrijgen waarin homologe chromosomenparen in numerieke volgorde van langst naar kortst zijn uitgelijnd, verkrijgt de geneticus een digitaal beeld, identificeert elk chromosoom en rangschikt de chromosomen handmatig in dit patroon (Figuur 1).

In zijn meest elementaire vorm kan het karyogram genetische afwijkingen onthullen waarbij een persoon te veel of te weinig chromosomen per cel heeft. Voorbeelden hiervan zijn het syndroom van Down, dat wordt geïdentificeerd door een derde kopie van chromosoom 21, en het syndroom van Turner, dat wordt gekenmerkt door de aanwezigheid van slechts één X-chromosoom bij vrouwen in plaats van de normale twee. Genetici kunnen ook grote deleties of inserties van DNA identificeren. Het Jacobsen-syndroom, dat kenmerkende gelaatstrekken en hart- en bloedingsafwijkingen omvat, wordt bijvoorbeeld geïdentificeerd door een deletie op chromosoom 11. Ten slotte kan het karyotype translocaties lokaliseren, die optreden wanneer een segment van genetisch materiaal van één chromosoom breekt en opnieuw hecht naar een ander chromosoom. Translocaties zijn betrokken bij bepaalde vormen van kanker, waaronder chronische myeloïde leukemie.

Tijdens het leven van Mendel was overerving een abstract concept dat alleen kon worden afgeleid door kruisingen uit te voeren en de eigenschappen te observeren die door nakomelingen worden uitgedrukt. Door een karyogram te observeren, kunnen hedendaagse genetici de chromosomale samenstelling van een individu visualiseren om genetische afwijkingen bij nakomelingen te bevestigen of te voorspellen, zelfs vóór de geboorte.


Ongunstige, complexe en monosomale karyotypen: de meest uitdagende vormen van acute myeloïde leukemie

Bij acute myeloïde leukemie is het karyotype van de leukemische cel de krachtigste voorspeller van het behandelresultaat. Ongeveer 30% van de gevallen van AML heeft een ongunstig karyotype, en indien behandeld met conventionele chemotherapie, wordt een volledige respons van ongeveer 50% en een 5-jaars overleving van 10% tot 20% verwacht. Van degenen in de ongunstige groep zal bijna de helft een complex karyotype hebben, wat geassocieerd is met een slechtere uitkomst, en 40% van hen zal een monosomaal karyotype hebben, wat een nog slechtere prognose heeft. De beste kans op genezing voor patiënten met een ongunstig karyotype wordt gezien bij degenen die een volledige respons bereiken en overgaan tot allogene transplantatie. Voor patiënten die niet in aanmerking komen voor agressieve therapie, suggereren voorlopige gegevens dat met azacitidine of decitabine resultaten kunnen worden verkregen die ten minste gelijkwaardig zijn aan die van standaardchemotherapie.

Invoering

Het karyotype van de leukemische cel is de sterkste prognostische factor voor respons op inductietherapie en overleving bij acute myeloïde leukemie (AML). Er zijn drie cytogenetische risicogroepen op basis van behandelresultaten: gunstig, middelmatig en ongunstig. Deze groepen vertegenwoordigen respectievelijk 20%, 50% en 30% van de gevallen van AML. Overlappende subgroepen binnen de ongunstige risicocategorie omvatten AML met complexe cytogenetica en monosomaal karyotype AML. Het probleem van AML met cytogenetica met ongunstige risico's verdient speciale aandacht: deze categorie ziekten vormt een moeilijke klinische uitdaging en de meest geschikte therapeutische optie kan sterk variëren - van de meest agressieve die we voor sommige patiënten te bieden hebben, tot palliatieve zorg voor anderen .

Ziektecategorisatie

Acute myeloïde leukemie Cytogenetische risicoclassificatie

Gunstige, intermediaire en ongunstige cytogenetica

De Southwest Oncology Group (SWOG), de Medical Research Council (MRC) en Cancer and Leukeemia Group B (CALGB) hebben elk meer dan 2 decennia geleden cytogenetische risicoclassificaties ontwikkeld en aangenomen op basis van de resultaten van grote prospectieve klinische onderzoeken. 3] Omdat de onderzoeken verschillende patiëntenpopulaties en verschillende behandelingen omvatten, is het niet verwonderlijk dat de resulterende classificaties, hoewel vergelijkbaar, niet identiek zijn. Bijvoorbeeld, zoals weergegeven in tabel 1, in de SWOG-categorisatie, worden patiënten met klonale afwijkingen die niet worden herkend als binnen een van de drie hoofdgroepen, toegewezen aan een vierde categorie met een voorspeld behandelresultaat ergens tussen de intermediaire en ongunstige risicogroepen. De risicoclassificatie van CALGB verschilt enigszins, afhankelijk van of men geïnteresseerd is in het percentage volledige respons (CR), het terugvalrisico of de algehele overleving (OS) (details niet getoond). Er zijn ook kleine verschillen tussen classificatieschema's in het onderscheid tussen cytogenetica met middelmatig en ongunstig risico. Meer recentelijk, in 2010, heeft de MRC hun classificatiesysteem herzien, met als belangrijkste verandering de verplaatsing van patiënten met verschillende translocaties waarbij chromosoom 11 betrokken is [met uitzondering van t(911) en t(1119)] van de groep met gemiddeld risico naar de ongunstige groep.[4]

Hoewel deze classificatieschema's enigszins verschillen, kunnen ze elk drie grote groepen patiënten onderscheiden. Onder patiënten jonger dan 65 jaar die met standaardchemotherapie worden behandeld, hebben patiënten met een gunstig karyotype CR-percentages in het bereik van 85% tot 90% en een 5-jaars OS van 50% tot 60%. Degenen met cytogenetica met een gemiddeld risico hebben CR-percentages van 65% tot 75% en een 5-jaars OS van 35% tot 45%. Voor patiënten met cytogenetica met een ongunstig risico kan een CR-percentage van 45% tot 55% en een 5-jaars OS van slechts 10% tot 20% worden verwacht.[1-4]

Complexe karyotypen

In sommige gevallen van AML zullen meerdere niet-gerelateerde cytogenetische afwijkingen worden gezien in een enkel karyotype. Als het aantal afwijkingen voldoende is, worden dergelijke gevallen gedefinieerd als "complexe" cytogenetica. In het geval van SWOG en CALGB zijn voor deze definitie drie of meer afwijkingen vereist, terwijl de MRC vier of meer afwijkingen vereist om de cytogenetica als complex te beschouwen. Als deze meerdere afwijkingen gepaard gaan met een van de translocaties met gunstig risico, inv(16) of t(821), dan zijn CR-percentages en OS iets slechter dan die gezien bij patiënten met alleen de gunstige-risicotranslocaties, maar ze zijn nog steeds beter dan wat zou worden verwacht met een gemiddeld of ongunstig risico.[5] Gevallen met inv(16) of t(821) en complexe cytogenetica blijven dus binnen de groep met een gunstig risico en worden in de meeste discussies niet als "complex" beschouwd. Alle andere gevallen met complexe cytogenetica worden als ongunstig gedefinieerd en vormen tussen een derde en de helft van alle gevallen van ziekte met een ongunstig risico, of in totaal 10%. In de analyse die leidde tot de recente herziening van hun classificatiesysteem door de MRC, ontdekten de onderzoekers dat met elke extra afwijking die in een karyotype werd waargenomen, het risico op het niet bereiken van een CR toenam (hazard ratio [HR] = 1,42), evenals het risico van sterfte (HR = 1,19). Zo deden patiënten met vier afwijkingen het slechter dan die met drie, en die met vijf of meer deden het slechter dan die met vier. In de SWOG-analyse werd gevonden dat patiënten met complexe cytogenetica maar zonder betrokkenheid van chromosomen 5 of 7 een CR-percentage hadden van 50% en een OS van 20%, terwijl patiënten met complexe cytogenetica en betrokkenheid van chromosomen 5 of 7 een een CR-percentage van 37% en slechts 3% OS.

Monosomaal karyotype

De bevinding van een enkele monosomie komt relatief vaak voor bij AML, waarbij monosomie 7 de meest voorkomende is. De aanwezigheid van een enkele monosomie (exclusief verlies van een geslachtschromosoom) is geassocieerd met een negatief resultaat, met een 12% OS na 4 jaar in de Nederlandse ervaring.[6] Patiënten met twee of meer verschillende monosomieën, of een enkele monosomie maar met een bijkomende structurele afwijking, hebben een nog slechtere prognose, met een voorspelde 4-jaarsoverleving van minder dan 4%.[6,7] Dus deze categorie patiënten ( twee monosomieën of één monosomie plus een aanvullende structurele afwijking) is gedefinieerd als een "monosomaal karyotype". Deze groep patiënten heeft een zeer sombere prognose bij behandeling met conventionele chemotherapie.

Verschillende cytogenetische subsets van acute myeloïde leukemie

Er is duidelijke overlap tussen patiënten met ongunstige, complexe en monosomale karyotypes. Alle patiënten met complexe karyotypen, behalve die met inv(16) en t(821) vallen in de ongunstige risicogroep en maken tussen een derde en de helft van het totaal uit. Ook vallen vrijwel alle (98%) patiënten met monosomale karyotypes in de ongunstige risicogroep en hebben de meeste (95%) complexe afwijkingen. Monosomaal karyotype AML is verantwoordelijk voor ongeveer 40% van de AML met ongunstig risico en tweederde van de gevallen met complexe cytogenetica (zie figuur 1). Een recente SWOG-analyse wees uit dat de 4-jarige OS van patiënten met complexe cytogenetica maar zonder een monosomaal karyotype 13% was, maar met een monosomaal karyotype slechts 3%.[7]

Biologie van ongunstige risicocytogenetica

Specifieke mutaties geassocieerd met AML met ongunstig risico

AML met ongunstig risico vertegenwoordigt waarschijnlijk veel verschillende biologische syndromen.

Onder deze ziektecategorie vallen een aantal specifieke genetische afwijkingen. t(69) is bijvoorbeeld een ongebruikelijke translocatie die wordt gezien bij ongeveer 1% van de AML's die resulteert in een chimeer fusiegen tussen DEK (6p23) en KAN (9q34).[8] Inv(3) of t(33) wordt gezien bij ongeveer 1% van de AML's en omvat: RPN1 (3q21) en EVI1 (3q26.2).[9] Hoe t(69) en inv(3) precies tot AML leiden, is tot nu toe onduidelijk. Zeldzame gevallen van de novo AML zijn geassocieerd met dezelfde t(922)-translocatie die wordt gezien bij chronische myeloïde leukemie (CML). Deze gevallen lijken geen CML te zijn bij een blastaire crisis, aangezien er geen prodromaal syndroom en geen splenomegalie is. Deleties of mutaties bij 17p worden gezien bij 5% tot 9% van de volwassen AML's en zijn geassocieerd met het verlies of de disfunctie van het tumorsuppressorgen TP53[10] Dergelijke verliezen of mutaties komen vooral veel voor bij patiënten met complexe of monosomale karyotypes in een recent onderzoek, 70% van dergelijke gevallen had TP53 afwijkingen. TP53 afwijkingen worden ook geassocieerd met verlies van een deel of alle chromosomen 5 of 7, de meest voorkomende cytogenetische veranderingen bij AML met ongunstig risico. Deze verliezen of deleties hebben velen ertoe gebracht te speculeren dat er tumorsuppressorgenen op chromosomen 5 en/of 7 zouden kunnen zijn waarvan het verlies tot AML leidt. Ondanks veel werk is er geen specifiek tumorsuppressorgen geïdentificeerd en is er geen eenvoudige verklaring beschikbaar voor de neiging tot verlies van een deel of al deze twee chromosomen.

Geïntegreerde genetische profilering

Er is een toenemend aantal niet-willekeurige mutaties gevonden in AML van alle risicocategorieën. Een recente analyse getest op mutaties in TET2, ASXL1, DNMT3A, CEBPA, PHF6, WT1, TP53, EZH2, RUNX1, en PTEN in een reeks van 502 patiënten.[11] Deze genetische profilering leek geen aanvullende diagnostische informatie te bieden voor patiënten met cytogenetica met een ongunstig risico. Er waren echter verschillende categorieën patiënten die normaal gesproken worden geacht een ziekte met een gemiddeld risico te hebben en die op basis van deze analyse opnieuw als hoogrisico konden worden geclassificeerd, waaronder patiënten zonder FLT3 mutaties die zijn gemuteerd TET2, gemuteerd ASXL1, gemuteerd PHF6, of MLL gedeeltelijke tandemduplicaties (PTD), en degenen die FLT3 mutaties met mutant TET2, DNMT3A, of MLL PTD.

Klonale architectuur van AML met ongunstig risico

Verschillende klinische en recente laboratoriuminzichten geven een wat beter beeld van de ontwikkeling van in ieder geval enkele gevallen van AML met ongunstig risico. We weten dat de incidentie van AML met cytogenetica met ongunstige risico's toeneemt naarmate patiënten ouder worden, van ongeveer 30% bij patiënten jonger dan 55 jaar tot meer dan 55% bij patiënten ouder dan 75 jaar.[12] Bovendien, in een vergelijking van behandelingsgerelateerde AML's versus de novo AML's, zijn de chromosomale afwijkingen die oververtegenwoordigd zijn in behandelingsgerelateerde AML's abn (17p), afwijkingen in chromosomen 5 en 7, complexe karyotypen en monosomale karyotypen. ] Deze lijst met afwijkingen komt bijna exact overeen met de afwijkingen die het meest toenemen met het ouder worden. Laboratoriumstudies die gebruik maken van genoombrede kopie-aantalanalyse hebben frequente somatische kopie-aantalveranderingen gevonden die niet detecteerbaar zijn bij routinematige cytogenetische analyse, en het is misschien niet verrassend dat deze aanvullende afwijkingen vaker werden gevonden bij patiënten met abnormale karyotypen.[14] Zeer recentelijk voerde de groep uit St. Louis een volledige genoomsequencing uit van gepaarde monsters van huid en beenmerg van patiënten met AML die voortkwamen uit een eerder myelodysplastisch syndroom (MDS).[15] Ze konden aantonen dat bijna alle beenmergcellen bij patiënten met MDS klonaal zijn afgeleid en dat de evolutie van AML uit MDS het resultaat is van meerdere cycli van mutatie-acquisitie en klonale selectie. Het beeld dat we dus overhouden, is dat er enkele gevallen kunnen zijn van AML met ongunstig risico, zoals die geassocieerd met t(69), waarbij een beperkt aantal mutaties voldoende kan zijn om tot de ziekte te leiden. Voor dergelijke gevallen kan men hopen dat remmers van kleine moleculen worden gevonden. De meeste gevallen van AML met een ongunstig risico zijn echter waarschijnlijk het resultaat van de accumulatie van grote aantallen mutaties naarmate patiënten ouder worden, met de ontwikkeling van geleidelijk meer wanordelijke hematopoëse en de uiteindelijke opkomst van leukemie met meerdere subklonen. De ontwikkeling van effectieve kleinmoleculige remmers voor dergelijke AML-patiënten zal een uitdaging zijn.

Therapie

Patiëntselectie

Veel behandelrichtlijnen voor AML bieden afzonderlijke suggesties voor patiënten die jonger of ouder zijn dan een willekeurige leeftijdsgrens, meestal rond de 60 jaar, gebaseerd op de impliciete veronderstelling dat jongere patiënten een intensievere therapie kunnen verdragen dan hun oudere tegenhangers. We hebben onlangs deze veronderstelling in twijfel getrokken door de uitkomst van de therapie bij 3.365 patiënten met AML te onderzoeken. Een multicomponentmodel dat nauwkeurig voorspelde behandelingsgerelateerde mortaliteit werd gecreëerd en bevatte informatie zoals leeftijd, prestatiestatus, aantal bloedplaatjes en of patiënten primaire of secundaire ziekte hadden, onder andere.[16] Hoewel leeftijd een onderdeel van het model was, had het elimineren van leeftijd uit het model slechts een minimale invloed op de nauwkeurigheid van het model. Daarom moeten aanbevelingen voor initiële inductietherapie gebaseerd zijn op de vraag of patiënten al dan niet in aanmerking komen voor intensieve therapie, en niet op leeftijd als zodanig. We hebben vergelijkbare onderzoeken uitgevoerd bij patiënten die een allogene hematopoëtische celtransplantatie (HCT) voor AML ondergingen, en nogmaals, een co-morbiditeitsindex bleek een belangrijkere voorspeller van het behandelresultaat te zijn dan leeftijd.[17]

Inductie

Standaard inductiechemotherapie voor volwassenen met nieuw gediagnosticeerde AML bestaat uit een anthracycline plus cytarabine. Recente onderzoeken hebben de meest geschikte dosis antracycline en cytarabine onderzocht, evenals of andere geneesmiddelen die aan de standaardcombinatie worden toegevoegd, de uitkomst kunnen verbeteren. Onderzoekers van de Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) vroegen of een hogere dosis daunorubicine (bij een dosering van 90 mg/m 2 /d gedurende 3 dagen) beter was dan een lagere dosis (45 mg/m 2 /d gedurende 3 dagen). ), beide gegeven in combinatie met standaard cytarabine bij patiënten jonger dan 60 jaar.[18] De hogere dosis was geassocieerd met een hoger CR-percentage en verbeterde OS. De impact van de hogere dosis antracycline was het grootst bij patiënten met een gunstig risico en een ziekte met een gemiddeld risico.Wanneer de analyse werd beperkt tot patiënten met cytogenetica met een ongunstig risico, was de verbetering met een hogere dosis daunorubicine veel minder, maar neigde nog steeds in dezelfde richting. De groep van de Stichting Haemato-Oncologie voor Volwassenen in Nederland (HOVON) voerde een soortgelijk onderzoek uit bij patiënten van 60 tot 83 jaar.[19] Bij patiënten van 60 tot 65 jaar was de hogere dosis daunorubicine geassocieerd met een voordeel in zowel CR-percentages (respectievelijk 73% vs 51%) als OS (respectievelijk 38% vs 23%). Net als bij de ECOG-studie bij jongere patiënten, werd het voordeel van een hogere dosis daunorubicine vooral gezien bij patiënten met cytogenetica met een gunstig of gemiddeld risico. De controlearm in beide onderzoeken gebruikte een relatief lage dosis daunorubicine. De Japanse AML-studiegroep vroeg onlangs of bij patiënten jonger dan 65 jaar daunorubicine bij 50 mg/m2 gedurende 5 dagen superieur was aan een standaarddosis idarubicine (bij 12 mg/m2 gedurende 3 dagen), beide gegeven met standaard cytarabine. [20] De twee leken even effectief, met uitkomsten in hetzelfde bereik als die gezien met 90 mg/m2 daunorubicine. Deze onderzoeken suggereren dat voor patiënten met AML met een hoog risico die fit genoeg zijn om intensieve chemotherapie te ondergaan, er geen voordeel is voor de ene of de andere antracycline zolang ze in de juiste doses worden gebruikt.

Onderzoeken hebben ook de meest geschikte dosis cytarabine voor inductie onderzocht. De HOVON-groep heeft onlangs de resultaten gepubliceerd van een prospectieve gerandomiseerde studie van idarubicine plus cytarabine in ofwel een standaarddosis (200 mg/m 2 door continue infusie op dag 1 tot 7) ofwel in een hogere dosis (1000 mg/m 2 BID op dagen 1 tot 5).[21] Over het algemeen was er geen duidelijk voordeel voor de verhoogde dosis cytarabine. In een analyse waarbij werd gezocht naar mogelijke effecten van de hogere dosering bij subgroepen van patiënten, bleek er echter een voordeel te zijn voor het hogere doseringsregime bij patiënten met een monosomaal karyotype bij deze patiënten, de 5-jaars event-free overleving ( EFS) en 5-jaars OS waren groter bij de regimes met hogere doseringen (13% vs 0% voor EFS en 16% vs 0% voor OS).

Meerdere onderzoeken hebben de mogelijkheid onderzocht om een ​​derde geneesmiddel toe te voegen aan de standaard daunorubicine/cytarabine-combinatie. Studies met toevoeging van etoposide, thioguanine, cladribine of lomustine hebben twijfelachtige resultaten opgeleverd. Meer recentelijk hebben verschillende onderzoeken gesuggereerd dat het anti-CD33-geneesmiddelconjugaat, gemtuzumab ozogamicine, de resultaten verbetert wanneer het wordt toegevoegd aan conventionele chemotherapie.[22] Het voordeel van gemtuzumab lijkt echter beperkt tot patiënten met cytogenetica met een gemiddeld of gunstig risico. Deze bevinding weerspiegelt mogelijk verschillen in de aard van de leukemische stamcel volgens het ziekterisico, waarbij de hypothese is dat ziekte met een goed risico en een ziekte met gemiddeld risico geassocieerd is met een meer volwassen leukemiestamcel die het differentiatie-antigeen CD33 tot expressie brengt, terwijl ongunstige risico's AML wordt geassocieerd met zeer onrijpe stamcellen die geen CD33-expressie hebben.[23]

Post-inductietherapie

Hematopoëtische celtransplantatie. Er zijn meerdere prospectieve onderzoeken uitgevoerd waarbij jongere AML-patiënten, meestal onder de 55 jaar, die een volledige remissie hebben bereikt, worden toegewezen aan behandeling met allogene HCT als ze een overeenkomende broer of zus hebben of aan agressieve chemotherapie als ze geen donor hebben. Verschillende meta-analyses die op dergelijke onderzoeken zijn uitgevoerd, tonen aan dat de overleving wordt verbeterd met allogene transplantatie in eerste remissie. patiënten met een ongunstige risicoziekte.

Slechts ongeveer een derde van alle patiënten zal een gematchte broer of zus hebben om als donor te dienen. Met de ontwikkeling van niet-gerelateerde donorregistraties is het nu mogelijk om voor veel patiënten een gematchte niet-gerelateerde donor (URD) ​​te vinden. Gegevens van afzonderlijke centra, en meer recentelijk van transplantatieregisters, laten zien dat de uitkomsten van transplantaties van gematchte broers en zussen en gematchte URD's erg op elkaar lijken. [26,27] Bijvoorbeeld in een onderzoek van het Center for International Blood and Marrow Transplant Research ( CIBMTR), werd transplantatie voor AML met een hoog risico bij 226 ontvangers van gematchte gerelateerde HCT vergeleken met die bij 358 ontvangers van gematchte URD HCT. Na 3 jaar was de OS 45% voor gematchte verwante donoren versus 37% voor gematchte URD's. In een multivariate analyse waren deze uitkomsten niet te onderscheiden (relatief risico [RR] = 1,06). Hoewel voor veel patiënten gematchte URD's kunnen worden gevonden, zijn voor anderen dergelijke donoren niet beschikbaar. Dit is met name een probleem voor zwarten, Iberiërs en patiënten met een gemengde raciale achtergrond. In de studie van de CIBMTR waren de uitkomsten significant slechter met het gebruik van gedeeltelijk gematchte URD's. Onlangs werden de resultaten van transplantatie van gematchte verwante donoren, gematchte URD's en gedeeltelijk gematchte dubbele navelstrengbloedtransplantaties vergeleken in een onderzoek uit Seattle en Minnesota.[28] Hoewel transplantatiegerelateerde mortaliteit hoger was bij dubbele navelstrengbloedtransplantaties, waren de terugvalpercentages lager, wat leidde tot gelijkwaardige OS bij gebruik van gematchte broers en zussen, gematchte URD's of dubbele navelstrengbloedtransplantaties.

De CIBMTR- en Seattle/Minnesota-onderzoeken suggereren dat als er geen gematchte verwante donor beschikbaar is voor een jongere patiënt met AML met ongunstig risico, moet worden overwogen over te gaan tot een gematchte niet-verwante of navelstrengbloedtransplantatie. Er moet echter worden benadrukt dat dit retrospectieve onderzoeken waren en dat een aanzienlijke voorkeur voor de selectie van patiënten de resultaten had kunnen beïnvloeden. Onlangs zijn de resultaten van AMLHD98A van de Duits-Oostenrijkse groep gepubliceerd.[29] In deze studie werden 844 patiënten geïncludeerd en van 267 werd vastgesteld dat ze een hoog risico hadden, hetzij omdat ze cytogenetica met een hoog risico hadden en een CR bereikten (n = 51), of geen CR bereikten met initiële inductietherapie (n = 216). Er werden pogingen ondernomen om alle patiënten met een hoog risico te transplanteren en in feite werd 61% daadwerkelijk getransplanteerd. Onder hoogrisicopatiënten waren de 5-jaars OS-percentages 6,5% bij degenen die niet getransplanteerd waren versus 25,1% bij degenen die een transplantatie kregen. Er was geen verschil in uitkomst met behulp van gematchte gerelateerde en gematchte niet-verwante donoren. In dit onderzoek werd navelstrengbloed voor slechts één enkele patiënt gebruikt. De US Leukemia Intergroup staat op het punt een onderzoek te starten waarin wordt gevraagd of het met het gebruik van gematchte verwante, gematchte niet-verwante en navelstrengbloeddonoren mogelijk is om transplantaties uit te voeren bij meer dan 60% van de patiënten met AML met een hoog risico die een eerste KR.

De rol van transplantatie voor fitte maar oudere patiënten is minder duidelijk. Er zijn in wezen nog geen voldoende grote prospectieve onderzoeken gerapporteerd waarin patiënten zijn gevolgd vanaf de diagnose en de uitkomsten van transplantatie versus chemotherapie zijn vergeleken. De grootste retrospectieve studie is er een van het Japanse National Cancer Center, waarin onderzoekers de uitkomst onderzochten van 1036 AML-patiënten van 50 tot 70 jaar die een eerste CR bereikten en werden behandeld met ofwel allogene HCT (n = 152) of chemotherapie (n = 884).[30] Zowel de OS als de terugvalvrije overleving waren significant verbeterd in de HCT-groep. Bij patiënten met een ziekte met een ongunstig risico was de 3-jarige OS met transplantatie 47%, wat niet statistisch significant beter was dan de 35% die werd gezien bij chemotherapie (P = .20).

Patiënten met een monosomaal karyotype hebben een extreem slechte prognose als ze worden behandeld met conventionele chemotherapie. In verschillende retrospectieve onderzoeken is onderzocht of allogene HCT hierin verbetering kan brengen. We onderzochten onze resultaten in Seattle en ontdekten dat de 4-jarige OS na allogene HCT 52% was voor patiënten met cytogenetica met een laag risico zonder een monosomaal karyotype, en 28% voor degenen met een monosomaal karyotype.[31] Hoewel de aanwezigheid van een monosomaal karyotype een slechtere uitkomst voorspelt na allogene HCT, is de uitkomst bij transplantatie nog steeds aanzienlijk beter dan bij standaard chemotherapie zou worden verwacht. In de Seattle-studie was er geen verschil in uitkomst met behulp van gematchte gerelateerde of gematchte URD's. De Duits-Oostenrijkse Groep heeft sindsdien ook de uitkomsten van allogene HCT onderzocht voor patiënten met een monosomaal karyotype. In hun ervaring vonden ze een 4-jaarsoverleving van 50% voor ontvangers van gematchte gerelateerde transplantaties uitgevoerd in CR1, maar slechts 15% met gematchte URD's.[32] De redenen voor de hoge mislukkingspercentages bij ontvangers van URD's in de Duitse ervaring werden niet gedetailleerd.

Chemotherapie. Als jongere patiënten met ongunstige cytogenetica niet in eerste remissie worden getransplanteerd, is een vorm van consolidatietherapie nodig, maar de beste vorm is minder zeker. De Japanese Adult Leukemie Study Group publiceerde onlangs een vergelijking van 3 kuren met een hoge dosis cytarabine (2 g/m2 BID gedurende 5 dagen) versus 4 cycli van conventionele therapie met meerdere middelen als consolidatietherapie voor patiënten.[33] Terwijl de hooggedoseerde cytarabine-arm leidde tot superieure ziektevrije overleving en OS bij patiënten met ziekte met een gunstig risico, had het geen voordeel voor patiënten met cytogenetica met middelmatig of ongunstig risico. Evenzo vergeleek een recent Duits onderzoek een tussendosis versus een hoge dosis cytarabine, beide gecombineerd met mitoxantron, als consolidatie voor patiënten met AML met middelmatig of ongunstig risico.[34] Ze vonden geen voordeel aan het regime met een hogere dosis.

Behandeling van patiënten die niet in aanmerking komen voor intensieve therapie

De definitie van wie "geen kandidaat is voor intensieve therapie" wordt door veel factoren beïnvloed. Uiteraard speelt het eigen perspectief van de patiënt een centrale rol, waarbij de ene patiënt meer waarde hecht aan de kwaliteit van leven op korte termijn dan de andere. Het objectieve risico op onmiddellijke sterfte, zoals bijvoorbeeld gemeten in het meercomponentenmodel dat we onlangs hebben gepubliceerd, speelt een grote rol in de definitie.[16] Bovendien komt de verwachte uitkomst van therapie ter discussie - als de kans op volledige respons en overleving op lange termijn met intensieve therapie hoog is, dan zou men de definitie van wie in aanmerking komt, kunnen verbreden, maar als de voordelen van intensieve therapie marginaal zijn , dan is het misschien niet in hun belang om minder gezonde patiënten aan die therapie bloot te stellen.

Als de keuze wordt gemaakt om geen agressieve behandeling te volgen, dan zijn de bewezen therapeutische opties voor patiënten met AML met ongunstig risico beperkt. Alleen palliatieve zorg kan een geschikte keuze zijn voor patiënten met substantiële comorbiditeiten. In een gerandomiseerde studie die niet beperkt was tot patiënten met cytogenetica met een ongunstig risico, bleek een lage dosis cytarabine superieur te zijn aan hydroxyurea. [35] Single-agent clofarabine (Clolar), onderzocht in een cohort van 112 patiënten ouder dan 60 jaar, resulteerde in een bemoedigend CR-percentage van 42% bij patiënten met ongunstige risicocytogenetica.[36] Azacitidine (Vidaza) en decitabine (Dacogen) bleken beide werkzaam te zijn bij deze patiëntenpopulatie. [37,38] In een interessant recent gepubliceerd onderzoek vroegen Fenaux et al artsen om een ​​van de drie benaderingen te kiezen als hun "standaardtherapie". "-ondersteunende zorg alleen, lage dosis cytarabine of standaard daunorubicine plus cytarabine- en vervolgens gerandomiseerd 113 patiënten naar ofwel de geselecteerde standaardzorg of azacitidine. [39] De mediane OS voor de azacitidinegroep was 24,5 maanden vergeleken met 16 maanden in de conventionele behandelingsgroep. In de kleine subgroep van patiënten met cytogenetica met ongunstig risico (27 in totaal), hadden degenen die werden behandeld met azacitidine een mediane overleving van 12 maanden vergeleken met 5 maanden bij degenen die werden behandeld met conventionele zorg. De langere overleving was niet afhankelijk van het bereiken van een CR. Huidige onderzoeken gaan na of de toevoeging van middelen zoals vorinostat (Zolinza) of lenolidomide (Revlimid) aan azacitidine de antitumoractiviteit zal verhogen. [40]

Samenvatting

Hoewel de algehele prognose voor patiënten met AML geassocieerd met ongunstige, complexe of monosomale karyotypen slecht is, kunnen sommige patiënten worden genezen. De beste kans op genezing wordt gezien bij patiënten die een CR bereiken met inductietherapie en overgaan tot allogene transplantatie. Er is enig suggestief maar niet sterk bewijs dat opname van een hoge dosis cytarabine tijdens inductie enig voordeel zou kunnen hebben voor deze moeilijke subgroep. Verbeterde resultaten met gematchte niet-gerelateerde en dubbele navelstrengbloedtransplantatie betekenen dat donoren nu kunnen worden gevonden voor de meeste patiënten in nood. Voor patiënten die niet in aanmerking komen voor agressieve therapie, suggereren voorlopige gegevens dat resultaten die ten minste gelijkwaardig, zo niet superieur zijn aan die bereikt met agressieve behandeling, kunnen worden verkregen met azacitidine of decitabine in plaats van standaard inductietherapie. De over het algemeen slechte resultaten met alle in de handel verkrijgbare vormen van therapie voor AML met ongunstig risico pleiten er sterk voor om te overwegen om deze patiënten in klinische onderzoeken te laten opnemen.

Financiële openbaarmaking:De auteurs hebben geen significant financieel belang of andere relatie met de fabrikanten van producten of leveranciers van een dienst die in dit artikel wordt genoemd.

Referenties:

Referenties M

1. Slowaaks ML, Kopecky KJ, Cassileth PA, et al. Karyotypische analyse voorspelt de uitkomst van preremissie- en postremissietherapie bij acute myeloïde leukemie bij volwassenen: een onderzoek van de Southwest Oncology Group/Eastern Cooperative Oncology Group. Bloed. 200096:4075-83.

2. Byrd JC, Mrozek K, Dodge RK, et al. Cytogenetische afwijkingen voorafgaand aan de behandeling voorspellen het succes van de inductie, de cumulatieve incidentie van terugval en de algehele overleving bij volwassen patiënten met de novo acute myeloïde leukemie: resultaten van kanker- en leukemiegroep B (CALGB 8461). Bloed. 2002100:4325-36.

3. Grimwade D, Walker H, Harrison G, et al. De voorspellende waarde van hiërarchische cytogenetische classificatie bij oudere volwassenen met analyse van acute myeloïde leukemie (AML) van 10 patiënten nam deel aan de AML11-studie van de Medical Research Council in het Verenigd Koninkrijk. Bloed. 200198:1312-20.

4. Grimwade D, Hills RK, Moorman AV, et al. Verfijning van de cytogenetische classificatie bij acute myeloïde leukemie: bepaling van de prognostische significantie van zeldzame terugkerende chromosomale afwijkingen bij 5876 jongere volwassen patiënten die werden behandeld in de onderzoeken van de Medical Research Council in het Verenigd Koninkrijk. Bloed. 2010116:354-65.

5. Appelbaum FR, Kopecky KJ, Tallman MS, et al. Het klinische spectrum van acute myeloïde leukemie bij volwassenen geassocieerd met translocaties van kernbindende factoren. Brit J Haematol. 2006135:165-73.

6. Breems DA, van Putten WL, De Greef GE, et al. Monosomaal karyotype bij acute myeloïde leukemie: een betere indicator voor een slechte prognose dan een complex karyotype. J Clin Oncol. 200826:4791-7.

7. Medeiros BC, Othus M, Fang M, et al. Prognostische impact van monosomaal karyotype bij jonge volwassen en oudere acute myeloïde leukemie: de ervaring van de Southwest Oncology Group (SWOG). Bloed. 2010 116:2224-8.

8. Slowaaks ML, Gundacker H, Bloomfield CD, et al. Een retrospectieve studie van 69 patiënten met t(69)(p23q34) AML benadrukt de noodzaak van een prospectief, multicenter initiatief voor zeldzame myeloïde maligniteiten met een "slechte prognose". Leukemie. 200620:1295-7.

9. Lugthart S, Groschel S, Beverloo HB, et al. Klinische, moleculaire en prognostische betekenis van WHO-type inv(3)(q21q26.2)/t(33)(q21q26.2) en verschillende andere 3q-afwijkingen bij acute myeloïde leukemie. J Clin Oncol. 201028:3890-8.

10. Rucker FG, Schlenk RF, Bullinger L, et al. TP53-veranderingen in acute myeloïde leukemie met complex karyotype correleren met specifieke kopie-aantalveranderingen, monosomaal karyotype en sombere uitkomst. Bloed. 2012119:2114-21.

11. Patel JP, Gonen M, Figueroa ME, et al. Prognostische relevantie van geïntegreerde genetische profilering bij acute myeloïde leukemie. N Engl J Med. 2012366:1079-89.

12. Appelbaum FR, Gundacker H, hoofd DR, et al. Leeftijd en acute myeloïde leukemie. Bloed. 2006107:3481-5.

13. Kayser S, Dohner K, Krauter J, et al. De impact van therapiegerelateerde acute myeloïde leukemie (AML) op de uitkomst bij 2853 volwassen patiënten met nieuw gediagnosticeerde AML. Bloed. 2011117:2137-45.

14. Walter MJ, Payton JE, Ries RE, et al. Verworven kopienummerveranderingen in volwassen acute myeloïde leukemie-genomen. Proc Natl Acad Sci U S A. 2009106:12950-5.

15. Walter MJ, Shen D, Ding L, et al. Klonale architectuur van secundaire acute myeloïde leukemie. N Engl J Med. 2012366:1090-8.

16. Walter RB, Othus M, Borthakur G, et al. Voorspelling van vroege dood na inductietherapie voor nieuw gediagnosticeerde acute myeloïde leukemie met risicoscores vóór de behandeling: een nieuw paradigma voor behandelingstoewijzing. J Clin Oncol. 201129:4417-23.

17. Sorror ML, Sandmaier BM, Storer BE, et al. Op comorbiditeit en ziektestatus gebaseerde risicostratificatie van uitkomsten bij patiënten met acute myeloïde leukemie of myelodysplasie die een allogene hematopoëtische celtransplantatie krijgen. J Clin Oncol. 200725:4246-54.

18. Fernandez HF, Sun Z, Yao X, et al. Dosisintensivering van anthracycline bij acute myeloïde leukemie. N Engl J Med. 2009361:1249-59.

19. Lowenberg B, Ossenkoppele GJ, van Putten W, et al. Hoge dosis daunorubicine bij oudere patiënten met acute myeloïde leukemie. N Engl J Med. 2009361:
1235-48.

20. Ohtake S, Miyawaki S, Fujita H, et al. Gerandomiseerde studie van inductietherapie waarbij standaarddosis idarubicine wordt vergeleken met hoge dosis daunorubicine bij volwassen patiënten met niet eerder behandelde acute myeloïde leukemie: de JALSG AML201-studie. Bloed. 2011
117:2358-65.

21. Lowenberg B, Pabst T, Vellenga E, et al. Cytarabine-dosis voor acute myeloïde leukemie. N Engl J Med. 2011364:1027-36.

22. Burnett AK, Hills RK, Milligan D, et al. Identificatie van patiënten met acute myeloblastische leukemie die baat hebben bij de toevoeging van gemtuzumab ozogamicine: resultaten van de MRC AML15-studie. J Clin Oncol. 201129:369-77.

23. Walter RB, Appelbaum FR, Estey EH, et al. Acute myeloïde leukemie stamcellen en CD33-gerichte immunotherapie (perspectief). Bloed. 2012119:6198-208.

24. Yanada M, Matsuo K, Emi N et al. De werkzaamheid van allogene hematopoëtische stamceltransplantatie hangt af van het cytogenetische risico op acute myeloïde leukemie bij de eerste remissie van de ziekte: een meta-analyse. Kanker. 2005103:1652-8.

25. Koreth J, Schlenk R, Kopecky KJ, et al. Allogene stamceltransplantatie voor acute myeloïde leukemie bij eerste volledige remissie: een systematische review en meta-analyse van prospectieve klinische onderzoeken. JAMA. 2009301:2349-60.

26. Walter RB, Pagel JM, Gooley TA, et al. Vergelijking van gematchte niet-gerelateerde en gematchte gerelateerde donor myeloablatieve hematopoëtische celtransplantatie voor volwassenen met acute myeloïde leukemie in eerste remissie. Leukemie. 201024:1276-82.

27. Gupta V, Tallman MS, He W, et al. Vergelijkbare overleving na HLA-goed-gematchte niet-gerelateerde of gematchte donortransplantatie voor acute myeloïde leukemie in eerste remissie met ongunstige cytogenetica bij diagnose. Bloed. 2010116:1839-48.

28. Brunstein CG, Gutman JA, Weisdorf DJ, et al. Allogene hematopoëtische celtransplantatie voor hematologische maligniteit: relatieve risico's en voordelen van dubbel navelstrengbloed. Bloed. 2010116:4693-9.

29. Schlenk RF, Dohner K, Mack S, et al. Prospectieve evaluatie van allogene hematopoëtische stamceltransplantatie van gematchte gerelateerde en gematchte niet-verwante donoren bij jongere volwassenen met hoog-risico acute myeloïde leukemie: Duits-Oostenrijkse studie AMLHD98A. J Clin Oncol. 201028:4642-8.

30. Kurosawa S, Yamaguchi T, Uchida N, et al. Vergelijking van allogene hematopoëtische celtransplantatie en chemotherapie bij oudere patiënten met niet-M3 acute myeloïde leukemie in eerste volledige remissie. Biol Bloedmergtransplantatie. 201117:401-1.

31. Fang M, Storer B, Estey E, et al. Uitkomst van patiënten met acute myeloïde leukemie met monosomaal karyotype die een hematopoëtische celtransplantatie ondergaan. Bloed. 2011118:1490-4.

32. Kayser S, Zucknick M, Dohner K, et al. Monosomaal karyotype bij volwassen acute myeloïde leukemie: prognostische impact en uitkomst na verschillende behandelstrategieën. Bloed. 2012119:551-8.

33. Miyawaki S, Ohtake S, Fujisawa S, et al. Een gerandomiseerde vergelijking van 4 kuren met standaarddosis multiagent chemotherapie versus 3 kuren met hoge dosis cytarabine alleen bij postremissietherapie voor acute myeloïde leukemie bij volwassenen: de JALSG AML201-studie. Bloed. 2011117:2366-72.

34. Schaich M, Rollig C, Soucek S, et al. Cytarabine-dosis van 36 g/m2 vergeleken met 12 g/m2 binnen de eerste consolidatie bij acute myeloïde leukemie: resultaten van patiënten die deelnamen aan de prospectieve gerandomiseerde AML96-studie. J Clin Oncol. 201129:2696-702.

35. Burnett AK, Milligan D, Prentice AG, et al. Een vergelijking van laaggedoseerde cytarabine en hydroxyurea met of zonder all-trans-retinoïnezuur voor acute myeloïde leukemie en hoogrisico myelodysplastisch syndroom bij patiënten die niet geschikt worden geacht voor intensieve behandeling. Kanker. 2007109: 1114-24.

36. Burnett AK, Russell NH, Kell J, et al. Europese ontwikkeling van clofarabine als behandeling voor oudere patiënten met acute myeloïde leukemie die ongeschikt wordt geacht voor intensieve chemotherapie. J Clin Oncol. 201028:2389-95.

37. Al-Ali HK, Jaekel N, Junghanss C, et al. Azacitidine bij patiënten met acute myeloïde leukemie die medisch ongeschikt zijn voor of resistent zijn tegen chemotherapie: een multicenter fase I/II-onderzoek. Leuk lymfoom. 201153:110-17.

38. Cashen AF, Schiller GJ, Oɽonnell MR, et al. Multicenter, fase II-onderzoek van decitabine voor de eerstelijnsbehandeling van oudere patiënten met acute myeloïde leukemie. J Clin Oncol. 201028:556-61.

39. Fenaux P, Mufti GJ, Santini V, et al. Behandeling met azacitidine (AZA) verlengt de algehele overleving (OS) bij MDS-patiënten met een hoger risico in vergelijking met conventionele zorgregimes (CCR): resultaten van de AZA-001 fase III-studie (abstract 817). Bloed. 2007110:250a.

40. Pollyea DA, Kohrt HE, Gallegos L, et al. Veiligheid, werkzaamheid en biologische voorspellers van respons op sequentiële azacitidine en lenolidomide voor oudere patiënten met acute myeloïde leukemie. Leukemie. 201226:893-901.


Bij pediatrische acute myeloïde leukemie (AML) zijn cytogenetische afwijkingen sterke indicatoren voor de prognose. Sommige terugkerende cytogenetische afwijkingen, zoals t(816)(p11p13), zijn zo zeldzaam dat collaboratieve studies nodig zijn om hun prognostische impact te bepalen. We verzamelden de klinische kenmerken, morfologie en immunofenotypes van 62 pediatrische AML-patiënten met t(816)(p11p13) uit 18 landen die deelnamen aan de internationale AML-studiegroep in Berlijn-Frankfurt-Münster (I-BFM). We gebruikten het AML-BFM-cohort gediagnosticeerd in 1995-2005 (n = 543) als referentiecohort. De mediane leeftijd van de pediatrische t(816)(p11p13) AML-patiënten was significant lager (1,2 jaar). De meerderheid (97%) had M4-M5 Frans-Amerikaans-Brits type, significant verschillend van het referentiecohort. Erythrofagocytose (70%), leukemie cutis (58%) en gedissemineerde intravasculaire stolling (39%) kwamen vaak voor. Opvallend was dat spontane remissies optraden bij 7 pasgeborenen met t(816)(p11p13), van wie er 3 in continue remissie blijven. De totale 5-jaarsoverleving van patiënten gediagnosticeerd na 1993 was 59%, vergelijkbaar met het referentiecohort (P = 0,14). Genexpressieprofielen van t(816)(p11p13) pediatrische AML-gevallen geclusterd dicht bij, maar verschillend van, MLL- herschikte AML. Sterk tot expressie gebrachte genen inbegrepen HOXA11, HOXA10, RET, PERP, en GGA2. Concluderend, pediatrische t(816)(p11p13) AML is een zeldzame entiteit die wordt gedefinieerd door een unieke genexpressiesignatuur en verschillende klinische kenmerken waarbij spontane remissies optreden in een subset van neonatale gevallen.

Bij pediatrische acute myeloïde leukemie (AML) is cytogenetische classificatie belangrijk voor de stratificatie van risicogroepen voor de behandeling. Omdat de incidentie van sommige moleculaire of cytogenetische afwijkingen erg laag is, is internationale samenwerking nodig om inzicht te krijgen in hun klinische en biologische kenmerken en de bijbehorende uitkomst. 1,2 Pediatrische AML met t(816)(p11p13) is een voorbeeld van zo'n zeldzame subgroep. Een recent onderzoek onder volwassen AML-patiënten door Haferlach et al definieerde t(816)(p11p13) ook als een zeldzame (n = 13/6124 0,2%), aparte subgroep met een slechte uitkomst (mediane totale overleving [OS] van 4,7 maanden) en uniek immunofenotype. 3 Ze toonden aan dat deze volwassen t(816)(p11p13)-patiënten klinische en biologische kenmerken deelden met MLL- herschikte AML-gevallen, zoals een hoge frequentie van Frans-Amerikaans-Britse (FAB) M4/5-subtypes, een hogere frequentie in therapiegerelateerde AML en overeenkomsten in hun genexpressieprofielen, zoals HOXA overexpressie. 3 Naast HOXA, ook RET Overexpressie van oncogen werd door Camós et al gerapporteerd als specifiek voor t(816)(p11p13). 4

De translocatie, t(816)(p11p13), resulteert in fusie van MYST3 (ook gekend als MOZ of KAT6A, gelokaliseerd op chromosoom 8p11), en CREB-bindend eiwit (CREBBP) (gelegen op chromosoom 16p13). Beide eiwitten hebben histonacetyltransferase-activiteit en daarnaast zijn ze betrokken bij transcriptionele regulatie en celcycluscontrole. 4,5 Er zijn verschillende fusietranscripten beschreven om exon 15 of 16 van te fuseren MYST3 naar exon 3-8 van CREBBP.

Tot dusver zijn alleen geïsoleerde casusrapporten en kleine patiëntseries beschreven voor pediatrische AML-gevallen met t(816)(p11p13). Sommige casusrapporten suggereerden dat spontane remissies optreden, terwijl andere aantoonden dat de uitkomst slecht was. 5-28 Om deze waarnemingen te verifiëren, hebben we een groot internationaal retrospectief onderzoek uitgevoerd, dat werd uitgevoerd in het kader van de internationale AML-studiegroep in Berlijn-Frankfurt-Münster (I-BFM), om de klinische kenmerken en uitkomst van pediatrische AML-gevallen te onderzoeken gekenmerkt door t(816)(pllp13). We wilden verder biologische en moleculaire kenmerken identificeren met behulp van morfologie, immunofenotypering en genexpressieprofilering (GEP).


Resultaten

Klinische kenmerken

In totaal werden 62 patiënten met t(816)(p11p13) geïdentificeerd en de klinische kenmerken werden vergeleken met het BFM-AML-referentiecohort (tabel 1). De mediane leeftijd bij diagnose was 1,2 jaar (spreiding 0,0-17), en afgezien van de hoge frequentie kort na de geboorte (17 gevallen van t(816)(p11p13) werden gediagnosticeerd in de eerste levensmaand), was het voorkomen stabiel gedurende de kindertijd . Vergeleken met het pediatrische AML-referentiecohort was de frequentie van aangeboren gevallen significant hoger (Figuur 1, P ≤ .01). Twee gevallen met behandelingsgerelateerde AML (één na dysgerminoom en één na acute lymfatische leukemie) werden geïncludeerd. 5,18

Leeftijd bij diagnose van pediatrische gevallen met t(816)(p11p13) in vergelijking met een pediatrisch AML-referentiecohort. Getoond worden twee histogrammen die de leeftijd bij diagnose weergeven voor twee cohorten: t(816)(p11p13) in donkergrijs, en een referentiecohort van niet-geselecteerde pediatrische AML-patiënten behandeld door de AML-BFM-studiegroep tussen 1995-2005 in lichtgrijs. (A) Leeftijd bij diagnose wordt weergegeven in categorieën van maanden voor de eerste 2 jaar na de geboorte. (B) Leeftijd bij diagnose wordt weergegeven in categorieën van 2 jaar tot 18 jaar. In t(816)(p11p13) AML, na een aanvankelijke piek in het optreden kort na de geboorte, is het optreden stabiel gedurende de kindertijd. In het referentiecohort is de frequentie van aangeboren gevallen significant lager.

Extramedullaire ziekte (aantasting van het centrale zenuwstelsel of leukemie cutis of andere extramedullaire ziekte, zoals granulocytair sarcoom waarbij het bot is betrokken) was aanwezig bij 25/38 patiënten (66%) met voldoende gegevens beschikbaar vergeleken met 122/543 (22%) in het referentiecohort (P < .01). Betrokkenheid van het CZS werd gemeld bij 6/40 patiënten (15%) vergeleken met 61/511 (12%) in het referentiecohort (P = .61). Leukemie cutis werd klinisch vastgesteld bij 21/36 patiënten (58%) en werd significant vaker gemeld bij patiënten jonger dan 1 jaar (18/22 patiënten, 82%) dan bij patiënten ouder dan 1 jaar (3/14 patiënten, 21% ) (P ≤ .01). Het referentiecohort rapporteerde leukemie cutis in 8% van de gevallen (P < .01). DIC werd gemeld bij 15/38 patiënten (39%) bij diagnose (Tabel 1) en geen enkele werd geregistreerd in het referentiecohort.

Morfologie

Bijna alle (97%) patiënten presenteerden zich met een myelomonocytisch (M4) of monocytisch (M5) FAB-type AML (tabel 1), vergeleken met 41% in het referentiecohort (P < .01). Erythrofagocytose was aanwezig bij 23/33 (70%) patiënten voor wie voldoende morfologische gegevens beschikbaar waren (Tabel 1). Gegevens over erythrofagocytose waren niet beschikbaar in het referentiecohort.

Immunofenotype

De meest relevante immunofenotypische markers zijn samengevat in Tabel 1. Bijna alle t(816)(p11p13)-gevallen waren positief voor de myeloïde markers MPO (n = 24/27), CD13 (n = 20/31) en/of CD33 (n = 29/31) (Tabel 1). De stamcelmarkers CD117 en CD34 waren positief in respectievelijk 2/14 en 4/24 gevallen met beschikbare gegevens (Tabel 1). Vrijwel alle patiënten waren positief voor CD15 (n = 23/23) en HLA-DR (n = 21/22), en 21/33 patiënten vertoonden expressie van het monocytische antigeen CD14, indicatief voor monocytdifferentiatie (Tabel 1).

Cytogenetica

Karyotypen worden gegeven in Tabel 2 . Bij de eerste diagnose vertoonden 35 van de 57 (61%) gevallen met volledige karyotypen t(816) (p11p13) als de enige afwijking (Tabel 2). Eén zuigeling had een normaal karyotype bij de eerste diagnose, maar ontwikkelde t(816)(p11p13) bij terugval, na spontane volledige remissie. In totaal vertoonden 22/57 patiënten aanvullende cytogenetische afwijkingen, maar geen daarvan was recidiverend (Tabel 2). Alle patiënten van wie een karyotype beschikbaar was bij de initiële diagnose, evenals bij terugval, vertoonden tekenen van klonale evolutie op het moment van terugval (Tabel 2).

Tafel 2

Karyotypische gegevens van pediatrische gevallen met t(816)(p11p13)

Patiënt nr.Karyotype initiële diagnoseKaryotype terugvalRef
146,XY,t(816)(p11p13)[16]/46,XY[4]
246,XX,t(816)(p11p13)[14]/46,XX[1]
346,XY,t(816)(p11p13),inc[20]/ 46,XY[9]45,XY,del(7)(q22q36),t(816)(p11p12),-10[3]/45,idem,del(11)(p11.2),add(19)(q13.3)[ 3]/ 46,XY[3]
446,XY,t(36)(q25q23),t(816)(p11p13)[14]/46,XY[5]
546,XX,t(816)(p11p13)[9]/46,XX[11]
646,XY,t(816)(p11p13)[20]
746,XX,t(816)(p11p13),der(16)t(816)(p11p13)[20]
846,XX,t(816)(p11p13),add(19)(p13)[14]/46,idem,add(15)(p11.2),+19,-add(19)(p13)[6 ]
946,XY,t(816)(p11p13)[14]/46,XY[6]
1046,XY,+1,del(1)(p22),t(816)(p11p13),-10,der(14)t(1014)(q11.2p11.2)[8]/ 47,XY,del (1)(q11),+der(1)t(18)(p11q11.2)x2,+i(5)(p10),-8,-10,der(14)t(1014)(q11.2p11 .2),der(16)t(816)(p11p13)[12]
1146,XY,t(816)(p11p13)[11]/46,idem,del(9)(q13q22.3)[11]
1246,XX,t(816)(p11p13)[2]/46,XX[15]
1346,XX,t(816)(p11p13)[9]/46,XX[1]
1446,XY,der(X)t(X1)(p?22?p33),der(16)t(816)(p?11p?13)/46,XY[1] *
1545,XY,-7,t(816)(p11p13)[21]/46,XX[1]
1646,XX,t(816)(p11p13)[3]/46,XX[39]
1746,XX,t(816)(p11p13)[14]
1845,XX,t(816)(p11p13),-18,der(21)t(121)(q12p13)[4]/46,XX[16]
1946,XX,del(6)(q?),der(8)t(816)(p11p13)add(8)(q24),der(16)t(816)(p11.2p13.1)[18] /46,XX[2]
2046,XY,del(7)(p14p15),t(816)(p11p13)[17]
2146,XX,t(816)(p11p13)
2246,XX,t(816)(p11p13),der(16)t(1617)(p13q21)[17]/46,XX[1]
2346,XX,t(816)(p11p13)[15]
2447,XX,der(113)(p10q10),der(7)t(722)(p22q11),t(816)(p11p13),der(17)t(817)(q10p13),+20[27]
2546,XX,t(816)(p11p13)[3]/46,idem,der(10)t(110)(q11p11)[5]/ 46,idem,add(7)(p21),der(10) t(110)(q11p11)[2]/46,idem,add(7)(p21)[2]/46,XX[2]
2646,XX,t(816)(p11p13),inc46,XX,del(5)(q13),del(7)(p15),t(816)(p11p13),-10,add(19)(p13),+mar1[5]/ 50,XX,der (1)(1?6)(p3?6q1?3),+6,t(816)(p11p13),del(9)(q22),add(12)(p13),-13, der(14) t(1314)(q11q32),t(1517)(q21q21),+21,+22,+22,+mar2[7]
2746,XY,del(7)(q22),t(816)(p11p13)[8]/46,idem,del(9)(q22)[1]/46,XY[3]
2846,XY,t(816)(p11p13)[14]/46,XY[6]
2946,XY,t(816)(p11p13)
3046,XX,t(816)(p11p13)[18]/46,XX[2]
3146,XX,t(816)(p11p13)[20]27
3246,XY,t(816)(p11p13),der(14)t(114)(q31p11)[20] * 18, 2
3346,XY,t(816)(p11p13)[7]/46,XY[21]17
3446,XX,t(816)(p11p13)[18]/46,XX[2]48,XX,+4,+8,t(816)(p11p13)[19]/46,XX[1]23
3546,XX,t(1168)(p13p13p11)[16]/46,XX[4]47,XX,t(1213)(p10p10),+22,[4]/46,XX[16] † 28
3646,XY,t(81816)(p11q21p13)26
3746,XY,t(816)(p11p13)16
3846,XY,t(816)(p11p13.2),t(1719)(?q13.3),inc21
3946,XX,t(816)(p11p13)22
4046,XX,t(816)(p11p13)24
4146,XX,t(816)(p11p13)7
4246,XX,t(816)(p11p13)5, 23
4346,XY,t(816)(p11p13)[75]/46,XY[25] ‡
4446,XX,inv(2)(q13q31),t(816)(p11p13),t(910)(p11q11),inv(14)(q24q32)/48,idem,+8,+del(5)(q32 )
4546,X,der(X)t(X1)(q26q23),t(816)(p11p13),der(11)t(1111)(p11q13)
4646,XY,t(816)(p11p13)
4746,XY,t(816)(p11p13),inc[23]
4846,XY,t(816)(p11p13)[6]/46,XY[14]
4947,XX,t(816)(p11p13),+mar[8]10
5046,XX,t(816)(p11p13),t(1011)(q11p15)6, 2
5146,XY,t(816)(p11p13)6, 1
5246,XY,t(816)(p11p13)9
5346,XX,t(816)(p11p13)11, 1
5446,XX,t(816)(p11p13)11, 2
5546,XY,t(816)(p11p13)11, 3
5646,XX,t(816)(p11p13)12, 1
5746,XX,t(816)(p11p13)14, 105
5846,XY,t(816)(p11p13)15, 88
5946,XY,t(816)(p11p13)19, 1
6046,XY,t(816)(p11p13),t(1620)(q13p13)25
6146,XX,t(816)(p11p13)13, 21
6246,XX[20]45,XX,-7,t(816)(p11.2p13.3),del(9)(q12q32)8, 2

Als de referentie over meerdere casussen rapporteert, wordt het casusnummer in de originele publicatie na de komma in de Ref-kolom vermeld.

nr., nummer Ref, referentienummer.

Behandeling en resultaat

Intentie tot curatieve behandeling werd toegediend aan 49/57 (86%) patiënten (mediane leeftijd 1,6 jaar, spreiding 0,0-17,0 jaar). De overleving werd alleen geanalyseerd voor de 34 patiënten die gediagnosticeerd waren na 1 januari 1993, aan wie intensieve chemotherapie bij de initiële diagnose werd toegediend met curatieve intentie (mediane leeftijd 5,0 jaar, bereik 0,0-17,0 jaar). In totaal kregen 6 patiënten allogene HSCT in eerste complete remissie en bij 3 patiënten omvatte de behandeling autologe HSCT. OS-schatting van het cohort was 59% (ଙ%) na 5 jaar, gebeurtenisvrije overleving 57% (ଙ%), en cumulatieve incidentie van terugval 28% (ଘ%), wat geen verschil toont met de referentiecohort (Figuur 2). De meeste voorvallen traden kort na de diagnose op, met 7/8 recidieven binnen het eerste jaar na de diagnose.

Overleving van t(816)(p11p13)-patiënten in vergelijking met een pediatrisch AML-referentiecohort. Overlevingscurves van t(816)(p11p13)-patiënten gediagnosticeerd na 1 januari 1993 en vooraf behandeld met chemotherapie vergeleken met 543 niet-geselecteerde pediatrische AML-patiënten die tussen 1995 en 2005 door de AML-BFM-studiegroep werden behandeld.

De 8 patiënten die niet werden behandeld, omvatten 7 zeer jonge zuigelingen (geval nrs. 28, 34, 35, 37, 40-41, 62) die nauwlettend werden gevolgd zonder therapie toe te dienen. Alle 8 patiënten bereikten spontane volledige remissie. Het klinische beloop van de 7 aangeboren gevallen (gediagnosticeerd binnen de eerste levensmaand) is samengevat in Tabel 3 . Drie blijven in volledige continue remissie, terwijl 4 patiënten een recidief van de ziekte hadden (mediane tijd tot recidief 17 maanden, bereik 8-48 maanden), waarvoor de behandeling succesvol was bij 2 patiënten (Tabel 3). Voor geval 35 bleek de tweede AML niet gerelateerd te zijn en werd vermoed dat deze patiënt een aandoening had die haar predisponeerde voor de ontwikkeling van AML (persoonlijke communicatie met Kiminori Terui). Bij een 2-jarige patiënt (geval nr. 39) werd gesuggereerd dat AML werd veroorzaakt door valproïnezuur. 22 Dit kind bleef in remissie bij follow-up na stopzetting van valproïnezuur gedurende een periode van 1 jaar (Tabel 1).

Tafel 3

Klinisch verloop van congenitale AML-gevallen waarbij t(816)(p11p13) spontane remissie bereikt

Zaak nr.Leeftijd bij Dx (d)Initiële DxTijd tot CR (ma)Evenement (tijd van Dx in ma)Verdere cursusbesturingssysteem (y)
411Verspreid myelosarcoom12CCR5.0 *
353AML2Niet-gerelateerde AML (48)Ct, overleden aan sepsis4.1
377AML3CCR2.0 *
289AML2Terugval (8)Ct1.8
Tweede terugvalSCT
derde terugvalGing dood
4010AML4CCR0.9 *
3419AML2Terugval (9)Ct7.0 *
6230AML2Terugval (24)Ct3.8 *
Tweede terugvalCt

AML, acute myeloïde leukemie CCR, continue complete remissie CR, complete remissie Ct, chemotherapie Ds, diagnose nr., nummer SCT, stamceltransplantatie y, jaren.

Ongecontroleerde clustering van 297 pediatrische AML-patiëntmonsters toonde een strakke clustering van t(816)(p11p13)-gevallen (n = 8) (Figuur 3). Bovendien clusterden t(816)(p11p13)-gevallen sterk samen met, maar gescheiden van, MLL-geherrangschikte AML in de niet-gesuperviseerde analyse (Figuur 3). Overexpressie van HOXA genen gevonden, en samen met MLL-geherrangschikte patiënten vormden de t(816)(p11p13)-patiënten de enige andere groep pediatrische AML-patiënten die selectief activeerden HOXA genen zonder HOXB gen activatie. In feite konden t(816)(p11p13)-monsters niet worden onderscheiden van MLL-gevallen herschikt op basis van clustering op HOXA en HOXB alleen sondes, zoals beschreven door Hollink et al 34 (aanvullende figuur 1).

Ongecontroleerde clustering van de genexpressieprofielen van 297 pediatrische AML-patiënten. Paarsgewijze correlaties tussen 297 monsters van pediatrische patiënten met acute myeloïde leukemie. De cellen in de visualisatie worden gekleurd door Pearson's correlatiecoëfficiëntwaarden met diepere kleuren die hogere positieve (rood) of negatieve (blauwe) correlaties aangeven.Cytogenetische gegevens worden weergegeven in de kolommen langs de originele diagonaal van de heatmap. Cytogenetische groepsclassificatie wordt weergegeven in de eerste kolom (MLL-herschikt-groen, inv(16)-rood, t(821)-geel, t(1517)-paars, t(712)-bruin, cytogenetisch normaal-blauw, overige -oranje, onbekend-aqua). Aanwezigheid van t(816)(p11p13) wordt weergegeven in de tweede kolom (t(816)-blauw, geen t(816)-geel).

De t(816)(p11p13)-patiënten werden onder supervisie vergeleken met andere AML-patiënten, met behulp van een empirisch Bayes lineair regressiemodel. Deze vergelijking resulteerde in een sterke handtekening met 5594 probes met een FDR aangepast P waarde <.05, waaronder 2984 een P waarde <.01 en 1615 hadden een P waarde <.001. De top 50 meest differentieel tot expressie gebrachte probesets worden weergegeven in aanvullende tabel 2.

Vervolgens hebben we deze genenlijst vergeleken met FDR aangepast P waarde <.001 (n = 1615), met de onderscheidende probesets gerapporteerd door Haferlach et al 3 (n = 55), en vond een overeenstemming van 48/55 probes.

Uit de toplijst (aanvullende tabel 2) hebben we 2 genen geselecteerd voor validatie met RT-qPCR op basis van P waarde, fold-change en de identificatie door meer dan 1 probe-set in de toplijst GGA2 (golgi-geassocieerd, γ adaptin ear-bevattend, ARF-bindend eiwit)(vertegenwoordigd door 5 probe-sets in de top-50) en PERP (TP53 apoptose effector gerelateerd aan PMP22) (vertegenwoordigd door 2 probe-sets in de top-50) (Figuur 4). De mediane relatieve expressie van GGA2 door RT-qPCR bij patiënten met t(816)(p11p13) was 10,7 keer hoger dan bij andere pediatrische AML-patiënten (84% vs 7,9%, P < .001), die correleerde met mRNA-expressie zoals bepaald door GEP (208913_at, Spearman R = .88 [P < .001]) ( Afbeelding 4 ). De mediane relatieve expressie van PERP door RT-qPCR bij patiënten met t(816)(p11p13) was 70,7 keer hoger dan bij andere pediatrische AML-patiënten (1,4% vs. 0,02%, P < .001 Figuur 4) en gecorreleerd met mRNA-expressie zoals bepaald door GEP (217744_s_at, Spearman R = .79 [P < .001]) ( Afbeelding 4 ).

GGA2 en PERP mRNA-expressie. RET geeft relatieve expressie aan gemeten door RT-qPCR. Getoond wordt de GGA2- en PERP-mRNA-expressieniveaus van pediatrische AML-patiëntmonsters en AML-cellijnen. (A,B) Niveaus van GEP voor respectievelijk GGA2 en PERP. (C,D) niveaus zoals bepaald door RT-qPCR. (E,F) tonen de correlatie tussen zowel RT-qPCR als GEP.

ShRNA gemedieerde knockdown

shRNA-gemedieerde knockdown van PERP was effectief in de AML-cellijnen THP1 en OCI-AML3 met 80% tot 95% mRNA-knockdown gedurende 9 tot 14 dagen (aanvullende figuur 2). Celtellingen, annexine / PI-apoptose en cytotoxiciteitstests voor geneesmiddelen werden uitgevoerd, maar er werden geen significante veranderingen gedetecteerd in proliferatie, apoptose en geneesmiddelgevoeligheid met PERP-knockdown in vergelijking met niet-silencing controle-shRNA (aanvullende figuur 2). Voor GGA2, werden knockdown-percentages van slechts 40% tot 60% bereikt (gegevens niet getoond). Met dit niveau van knockdown werden geen significante veranderingen in celproliferatie of apoptose waargenomen (gegevens niet getoond).


8.16: Karyotypen - Biologie

Studiegids voor onderwerp 4: Chromosoomstructuur en gedrag

Toegewezen literatuur: Hoofdstuk 7 paragraaf 7.1, en paragrafen 7.5 tot en met 7.7. Hoofdstuk 8 sectie 8.1 tot en met Actieve genen op het inactieve X-chromosoom op p260, en secties 8.2 tot en met 8.6.

Studiegids voor het gedeelte Matching van toets 8: de toegewezen lezing, mijn lijst met sleuteltermen, alle onderstaande vragen.

Studiegids voor het korte antwoord/probleemoplossingsgedeelte van toets 4: (G = Guide to Solving Problems)

Genoomomvang en evolutionaire complexiteit: de C-waardeparadox:

Polytene-chromosomen: 7,9 7,10 7,11

Repetitieve nucleotidesequenties Eukaryotische chromosomen: Ch7, G2 en G3 7,12 7,13 7,22, 7,23, 7,24, 7,25 7,26 7,30 CP3

Unieke en repetitieve sequenties in eukaryote chromosomen: 7,27 CP2

Het menselijke karyotype: 8,1 8,2 8,3 8,4 8,5 8,11

Chromosoomafwijkingen bij menselijke zwangerschappen: Ch8, G3 8,6 8,8 8,12 8,13 (OPMERKING 8.7 niet vereist)

Chromosomale deleties en duplicaties: Ch8, G1 8.10 8.14 8.15 8.16 8.17

Genetica van chromosomale inversies: Ch8, G2 8.10 8.17 8.29 CP1

Chromosomale translocaties: 8,10 8,17 8,19 8,24 8,25 8,26 8,27 8,28 CP2

Genomische positie-effecten op genexpressie:

Principes en kernbegrippen:

1. Eukaryotische genomen bevatten unieke DNA-sequenties met een enkele kopie (genen en regulerende sequenties) en repetitieve DNA-sequenties met meerdere kopieën (satelliet-DNA, transposons en genen met meerdere kopieën).

2. Het DNA-sequentiegehalte van eukaryote genomen is geanalyseerd door de kinetiek van DNA-renaturatie te bestuderen.

3. DNA-renaturatieonderzoeken detecteren sequenties van verschillende complexiteit: korte repetitieve sequenties zijn het minst complex, langere repetitieve sequenties zijn van gemiddelde complexiteit en lange, unieke (single-copy) sequenties zijn het meest complex.

4. Kinderbed1/2, ook wel de 'Cot-waarde' genoemd, is een maat voor de complexiteit van de DNA-sequentie. Hoe kleiner de Cot-waarde, hoe minder complex de reeks.

5. Genomen zijn samengesteld uit een of meer chromosomen. Analyse van de chromosoomstructuur was een vroege vorm van genetische (GENOMISCHE!) analyse.

5. De studie van de chromosoomstructuur op een detailniveau dat door licht- en fluorescentiemicroscopie kan worden gedetecteerd, wordt cytogenetica genoemd.

6. Mitotische chromosomen in dieren en planten, en polyteenchromosomen in fruitvliegen worden vaak gebruikt in cytogenetische analyses.

7. Het beeld van alle mitotische chromosomen in een cel wordt de karyotpye van de cel genoemd.

8. Sommige erfelijke ziekten zijn te wijten aan genetische afwijkingen die detecteerbaar zijn als abnormale karyotypen.

9. Abnormale karyotypen zijn onder meer afwijkingen in het chromosoomgehalte (anueploïdie) en afwijkingen in de chromosoomstructuur (inserties, deleties, inversies en translocaties).

10. Abnormale karyotypen worden veroorzaakt door non-disjunctie, DNA-schade of onjuiste recombinatie (bijvoorbeeld ectopische recombinatie en ongelijke kruising).

11. Personen die aneuploïde zijn of chromosomen met translocaties dragen, hebben een grotere kans om aneuploïde gameten te produceren.

12. Veranderingen in het aantal chromosomen of de structuur beïnvloeden het fenotype vanwege veranderingen in patronen van genexpressie.

13. Aneuploïdie, duplicaties en deleties veranderen het aantal kopieën van genen (gendosering), wat typisch het expressieniveau van die genen verandert, wat het fenotype beïnvloedt.

14. Inversies en translocaties plaatsen genen soms in de buurt van heterochromatische regio's, waardoor het niveau van expressie van die genen afneemt, wat resulteert in variatie in positie-effect.


Dit artikel werd mij eerder doorgestuurd van een student. Ik dacht ik deel het met iedereen...

Anna Anderson beweerde beroemd te zijn de Groothertogin Anastasia, de enige overlevende van de Russische koninklijke familie. De verklaring van haar veronderstelde overleving en ontsnapping is er een die tot de verbeelding van de wereld sprak en velen overtuigde. Maar ondersteunt het bewijs dit?

Hoe 'Anastasia' overleefde

Op 17 juli 1918 ontving Vladimir Lenin een telegram dat hem op de hoogte bracht van de dood van de hele Romanov-familie. Er werd gezegd dat ze midden in de nacht waren gewekt en verteld dat ze zouden worden gefotografeerd. Toen ze allemaal bij elkaar waren, werd de familie herhaaldelijk neergeschoten en met bajonetten vastgemaakt, totdat ze dood leken te zijn.

Sommigen beweren dat het verhaal daar niet eindigt. De gebruikte bajonetten waren stomp en een van de lichamen bewoog. Een soldaat genaamd Tschaikovsky merkte de beweging op. Uit loyaliteit redde de jonge soldaat de prinses en nam haar mee naar het huis van zijn familie om te herstellen.

De twee trouwden en vestigden zich in Roemenië. De nieuwe bruid ontdekte dat ze zwanger was. Het lijkt erop dat de groothertogin een kans op een nieuw leven had, maar het noodlot sloeg toe toen haar man werd gedood in een straatgevecht. Omdat ze niet in staat was voor haar kind te zorgen, werd het jongetje in een weeshuis geplaatst.

Nadat ze haar man en zoon had verloren, ging Anastasia naar Berlijn om hulp te zoeken bij haar tante, prinses Irene van Berlijn. Bij aankomst vreesde Anastasia echter dat ze niet herkend zou worden. Wanhopig wierp ze zichzelf in een gracht.

Nadat ze was gered, werd de jonge vrouw opgenomen in het Dalldorf Asylum, waar ze 18 maanden lang weigerde haar identiteit te onthullen, nadat een andere patiënt haar aanzag voor haar zus, Tatiana.

Feiten die Anderson in diskrediet brengenN

  • DNA-testen hebben aangetoond dat Anna Anderson in feite een Poolse fabriek was, genaamd Franziska Schanzkowska.
  • Toen de lichamen van de familie in 1991 werden ontdekt, theoretiseerden wetenschappers dat de lichamen van de koninklijke kinderen Alexi en Mailitsa ontbraken, in plaats van Anastasia.
  • Na ontdekkingen die in juli 2007 zijn gedaan, is de hele Romanov-familie geïdentificeerd.
  • Van Anna Anderson was niet bekend dat ze Russisch sprak.
  • De leraar van de koninklijke kinderen, Pierre Gilliard, beweerde dat Anderson "een eersteklas actrice" was.
  • Er is geen spoor gevonden van de soldaat die volgens haar haar heeft gered.
  • De littekens die Anderson beweerde te zijn veroorzaakt door de stompe bajonetten, zouden kunnen zijn veroorzaakt door een ongeval met een handgranaat (waarvan bekend was dat Franziska Schanzkowski betrokken was).
  • Het is een raadsel dat ‘Anastasia’ de nicht van haar ouders, koningin Marie, niet opzocht in Roemenië, in plaats van naar Berlijn te reizen.

Feiten die Anderson ondersteunen

  • Een artikel dat in 2004 in de Annals of Human Biology werd gepubliceerd, doet twijfel rijzen over de DNA-resultaten van de in 1991 gevonden lichamen.
  • Gevreesd wordt dat het monster van Anna Anderson (een stuk darm van een operatie in 1979) tijdens het transport besmet zou kunnen zijn.
  • Prinses Irene van Berlijn gaf wel toe dat Anderson "vergelijkbaar" was met Anastasia.
  • Prins Sigismund (de zoon van Irene) stuurde Anderson een lijst met vragen die alleen een familielid zou weten en was tevreden met haar antwoorden.
  • Anderson leek een geldige reden te geven om geen Russisch te spreken, het was de taal van degenen die haar familie hadden vermoord.
  • Anderson kon meerdere talen spreken, dit zou ongebruikelijk zijn geweest voor een fabrieksarbeider.
  • Maria Rasputin (dochter van Rasputin) steunde Andersons beweringen en verklaarde na een ontmoeting in 1968 dat Anderson haar had herinnerd aan dingen uit haar kindertijd die ze was vergeten.
  • Anna Anderson had een misvormde voet, net als Anastasia.
  • Antropoloog Dr. Otto Reche beweerde dat Anderson en Anastasia "ofwel dezelfde persoon of een identieke tweeling" waren.

Anastasia: The Unmasking of Anna Anderson, door John Godl, The European Royal Hostory Journal, uitgave VI: augustus 1998


Discussie

Aaneengesloten gensyndromen zijn een belangrijk onderwerp in de klinische genetica. Scherpe klinische observatie heeft bijgedragen aan de afbakening van syndromen zoals het Kallman-syndroom, het DiGeorge-syndroom en het Miller-Dieker-syndroom.

Er zijn verschillende aaneengesloten gensyndromen beschreven waarbij het chromosoom 16p13.3-gebied is betrokken. De combinatie van α-thalassemie, dysmorfe kenmerken en mentale retardatie, ATR-16, wordt veroorzaakt door een terminale deletie van chromosoom 16p13.3 met het breekpunt distaal van de aangrenzende TSC2 enPKD1 genen.5 Er is een TSC-patiënt beschreven met een gedeeltelijke monosomie van deze regio, bij wie deletie de TSC2 gen, waarbij het breekpunt de verstoort PKD1 gen (fig 3G), als gevolg van de ongebalanceerde vorm van een familiale translocatie t(1622)(p13.3q11).3 Verwanten die de gebalanceerde vorm van de translocatie droegen, waren getroffen door polycysteuze nierziekte bij volwassenen en de analyse van deze familie heeft bijgedragen aan de identificatie van de PKD1 gen. Onlangs werd aangetoond dat verschillende patiënten met TSC en vroeg optredende polycystische nierziekte deleties hebben waarbij zowel deTSC2 en PKD1genen.4 De proband van de familie die hier wordt beschreven, had een klinisch beeld dat duidde op een grote deletie in het gebied van chromosoom 16p13.3, omdat hij TSC had en de eigenschap α-thalassemie had. De dood van zijn halfbroer, die ook TSC had, op 18-jarige leeftijd als gevolg van niercomplicaties wees op de mogelijkheid van betrokkenheid van de PKD1 gen. FISH-onderzoeken leverden bewijs voor een familiale cryptische translocatie t(816)(q24.3p13.3) met een ongebalanceerde vorm in de proband en een gebalanceerde vorm bij de vader en de vaderlijke tante. De ongebalanceerde translocatie zorgde ervoor dat de indexpatiënt monosomisch was voor het chromosoom 16p13.3-gebied met een breekpunt gedetecteerd door PAC 1.8F, wat het meest proximale breekpunt vertegenwoordigt dat tot nu toe is beschreven voor terminale 16p-deleties. Bovendien toonden FISH-analyses trisomie voor het distale 8q-gebied als gevolg van een aangrenzende 1-segregatie.

Voor zover wij weten, zijn constitutionele translocaties waarbij 8q24.3 betrokken is, zeer zeldzaam, waarschijnlijk omdat ze ontsnappen aan detectie door routinematige cytogenetische technieken. Een specifiek fenotype geassocieerd met een partiële trisomie 8q24-qter is niet gedefinieerd.18 19 Daarentegen zijn gebalanceerde en ongebalanceerde herschikkingen, waaronder 8q24, waargenomen in een verscheidenheid aan hematologische en solide tumoren.20

De schildklierdisfunctie, die werd gediagnosticeerd bij zowel ongebalanceerde als gebalanceerde translocatiedragers, is mogelijk interessant, omdat het chromosoom 8q24.3-gebied het thyroglobuline herbergt (TG) gen. Echter, aangezien bij alle drie de patiënten zowel het 3′ als het 5′ uiteinde van deTG gen bleken op chromosoom 8 te blijven door FISH-analyse, lijkt verstoring van het coderende gebied van het gen onwaarschijnlijk.

Het complexe klinische beeld van de proband kan tot op zekere hoogte worden verklaard door deletie van bekende of nog onbekende genen in het chromosoom 16p13.3-gebied, aangezien hij duidelijk symptomen vertoont van zowel TSC als ATR-16. sinds de PKD1 gen ook is verwijderd, is het opmerkelijk dat zich tot nu toe geen ernstige nierziekte heeft ontwikkeld. Omdat bij de indexpatiënt ook HI is vastgesteld, heeft deze studie bijgedragen aan het oplossen van de genetische achtergrond van HI bij deze patiënt. De patiënt met de ongebalanceerde t(1622)-translocatie, beschreven in de paper die de identificatie van dePKD1 gen,3 vertoonde geen tekenen van HI (Dr I Cordeiro, Lissabon, Portugal, persoonlijke communicatie). Vandaar dat het gebied tussen het breekpunt t(816) en dePKD1 gen kan een gen herbergen dat betrokken is bij HI. Op dit moment kunnen we echter niet uitsluiten dat een niet-gerelateerd genetisch defect ten grondslag ligt aan HI in de proband. Hoewel kloon 1.8F een transcript detecteert,9 is het niet erg waarschijnlijk dat verstoring van een gen door het breekpunt HI veroorzaakt, aangezien dit niet werd opgemerkt bij de vader van de patiënt of zijn tante. Als alternatief kan de bij de indexpatiënt waargenomen HI verband houden met zijn partiële trisomie van 8q.

Deze studie is een ander voorbeeld van genetische analyse die is geïnitieerd door zorgvuldige klinische observaties. Bovendien illustreert het dat chromosomale translocaties moeten worden beschouwd als een oorzaak van een autosomaal dominante ziekte. Zeker als het gaat om genen met een hoge mutatiesnelheid, zoals bij de TSC genen, zijn niet-aangetaste ouders met meerdere aangetaste nakomelingen niet ongewoon. Dit kan meestal worden toegeschreven aan gonadaal of gonosomaal mozaïekisme,22 wat een relatief laag recidiefrisico impliceert en het dragerrisico van de broers en zussen van de ouders reduceert tot populatieniveau. De betrokkenheid van een familiale translocatie geeft echter een herhalingsrisico van 50% voor de drager-ouder, evenals een verhoogd dragerrisico voor familieleden.


Patiënten, materialen en methoden

Patiënten

Een totaal van 50 nieuw gediagnosticeerde ATLL-patiënten tussen 1989 en 1996 werden bestudeerd. Deze patiënten waren inboorlingen van de prefectuur Nagasaki, een van de clusteringgebieden van ATLL-incidentie in Japan. Diagnose en subclassificatie van ATLL werden gedaan volgens eerder beschreven criteria.18 We classificeerden 3 gevallen die in de smeulende of chronische fase waren vóór progressie naar de acute fase als het acute subtype omdat cytogenetische analyse werd uitgevoerd op het moment van progressie, en cytogenetische bevindingen vertoonde afwijkingen mogelijk van de acute fase. De histologische diagnose van het lymfoomsubtype was gebaseerd op de bevindingen van biopsie van lymfeklieren volgens de bijgewerkte Kiel-classificatie.19 Immunofenotypische analyse van tumorcellen werd uitgevoerd door directe en indirecte immunofluorescentie-assays, zoals eerder beschreven.20 Op basis van het immunofenotype van ATLL-cellen, gevallen werden ingedeeld in 2 categorieën: het gebruikelijke fenotype dat het fenotype CD4 + CD8 vertoont, en het ongebruikelijke fenotype dat het fenotype CD4 + CD8 +, CD4 − CD8 + of CD4 − CD8 vertoont, omdat deze fenotypische diversiteit correleert met de klinische uitkomst.20 Patiënten met acute en lymfoomsubtypes werden behandeld met een intensief combinatiechemotherapieregime (VEPA, LSG4 of LSG11).21 Patiënten met het chronische subtype werden zonder chemotherapie gevolgd totdat ze progressie maakten naar het acute of lymfoomsubtype, met uitzondering van één patiënt die autologe beenmergtransplantatie ontving tevergeefs.

Cytogenetische analyse

Monsters voor de cytogenetische onderzoeken werden verkregen uit het perifere bloed van patiënten met acute en chronische subtypes, of uit de biopsie van lymfeklieren van patiënten met het lymfoomsubtype op het moment van diagnose vóór therapie.

Chromosoomanalyse werd uitgevoerd met behulp van G- en / of Q-bandingtechnieken na kweken zonder mitogenen. Karyotypen werden beschreven volgens het International System for Human Cytogenetics Nomenclature (1995).

Om de specifieke afwijkingen te identificeren en de secundaire veranderingen te vermijden, werd het stamlijnkaryotype (dwz de eenvoudigste abnormale kloon) gebruikt als het representatieve karyotype voor bijna alle analyses. Bij patiënten die samengestelde karyotypen vertoonden (8 gevallen) of wanneer stamlijnkaryotypen niet konden worden gespecificeerd (3 gevallen), creëerden we een "stamlijnkaryotype", dat algemene afwijkingen bevatte in alle geanalyseerde karyotypen.

Het aantal chromosomale breuken door structurele afwijkingen werd berekend als de som van alle breuken waarvan de afleiding per band kon worden geïdentificeerd in het stamlijnkaryotype. Markerchromosomen werden niet opgenomen voor analyse van het aantal chromosomale breuken. Breekpunten van isochromosomen 1q, 6p, 7q, 8q, 18q en 21q werden opgenomen in breuken op respectievelijk chromosomen 1p10, 6q10, 7p10, 8p10, 18p10 en 21p10. Meerdere herschikkingen van dezelfde breukplaats die bij dezelfde patiënt werden waargenomen, werden afzonderlijk geregistreerd.

We beoordeelden ook terugkerende winsten of verliezen van specifieke chromosomale segmenten, een "chromosomaal segmentaal representatieprofiel (CSRP)" genoemd, in stamlijnkaryotypes van elke patiënt volgens methoden beschreven door Thompson et al.23 Eén patiënt wiens stamlijnkaryotype bijna-triploïdie vertoonde, was niet opgenomen in CSRP-analyse.

Statistische analyse

Alle chromosomale afwijkingen die in meer dan 5 gevallen voorkwamen, waren gecorreleerd met de klinische factoren beschreven in Tabel 1. Associaties tussen klinische variabelen en chromosomale afwijkingen werden getest met behulp van de Fisher exact-test zoals bepaald door verwachte frequenties van variabelen in 2 × 2-tabellen. P < .05 werd gebruikt als het criterium voor statistische significantie.

Klinische kenmerken en hun correlatie met klinische subtypes en overleving in 50 gevallen van volwassen T-celleukemie/lymfoom

Kenmerkend. acuut
(n = 37) .
lymfoom
(n = 6) .
chronisch
(n = 7) .
Totaal
(n = 50) .
Acuut versus
lymfoom.
Acuut en
lymfoom
versus chronisch.
Overleving .
≥ 6 (n = 34)/
< 6 (n = 16) mnd.
Algemeen .
Seks
Mannelijk 24 (64.9%) 5 (83.3%) 3 (42.9%) 32 (64.0%) NS NS NS NS
Man/vrouw verhouding 1.8 5 0.8 1.8
Leeftijd, ja
Mediaan 59 59 55 59
Bereik 33-81 52-71 32-75 32-81
≥ 50 30 (81.1%) 6 (100%) 4 (57.1%) 40 (80%) NS NS NS NS
Huidlaesie 16 (43.2%) 1 (16.7%) 1 (14.3%) 18 (36.0%) NS NS NS NS
Perifere lymfadenopathie 26 (70.3%) 5 (83.3%) 2 (28.6%) 33 (66.0%) NS P < .05 * , NS NS
Hepatosplenomegalie 21 (56.6%) 3 (50.0%) 2 (28.6%) 26 (52.0%) NS NS NS P <..05 ‡
CZS-betrokkenheid 5 (13.5%) 1 (16.7%) 0 6 (12.0%) NS NS NS P <..05 ‡
Pleurale effusie en/of ascites 7 (18.9%) 0 0 7 (14.0%) NS NS NS NS
Serum LDH, IE/μL
Mediaan 1257 1479 324 1166.5
Bereik 497-9517 820-2660 236-554 236-9517
≥ 1100 23 (62.2%) 4 (66.7%) 0 27 (54.0%) NS P < .01 * , P < .05 , 1-153 P <.01 ‡
Hypercalciëmie 24 (48%) 3 (50%) 0 27 (54.0%) NS P < .01 * , P < .05 , 1-153 P <.01 ‡
WBC, ×10 6 /L
Mediaan 24.0 5.6 11.4 21.3
Bereik 2.8-215.4 2.8-40.0 5.5-108.4 2.8-215.4
≥ 30.0 18 (48.6%) 1 (16.7%) 1 (14.3%) 20 (40.0%) NS NS NS NS
Absoluut abnormale lymfocyt
aantal, ×10 6 /L
Mediaan 11.2 0 2.1 7.2
Bereik 1.3-114.2 0 0-9.2 0-114.2
≥ 15.0 15 (40.5%) 0 1 (14.3%) 16 (32.0%) NS NS NS NS
Ongebruikelijk immunofenotype 7 (18.9%) 1 (16.7%) 0 8 (16.0%) NS NS NS P <.01 ‡
Overleven, mei
Mediaan 8.0 14.0 59.0 10.05
Bereik 0.2-71.0 0.6-20.0 12.0-148.0 0.2-148.0
< 6 14 (37.8%) 2 (33.3%) 0 16 (32.0%) NS NS
Algemeen NS P <.01 ‡
Kenmerkend. acuut
(n = 37) .
lymfoom
(n = 6) .
chronisch
(n = 7) .
Totaal
(n = 50) .
Acuut versus
lymfoom.
Acuut en
lymfoom
versus chronisch.
Overleving .
≥ 6 (n = 34)/
< 6 (n = 16) mnd.
Algemeen .
Seks
Mannelijk 24 (64.9%) 5 (83.3%) 3 (42.9%) 32 (64.0%) NS NS NS NS
Man/vrouw verhouding 1.8 5 0.8 1.8
Leeftijd, ja
Mediaan 59 59 55 59
Bereik 33-81 52-71 32-75 32-81
≥ 50 30 (81.1%) 6 (100%) 4 (57.1%) 40 (80%) NS NS NS NS
Huidlaesie 16 (43.2%) 1 (16.7%) 1 (14.3%) 18 (36.0%) NS NS NS NS
Perifere lymfadenopathie 26 (70.3%) 5 (83.3%) 2 (28.6%) 33 (66.0%) NS P < .05 * , NS NS
Hepatosplenomegalie 21 (56.6%) 3 (50.0%) 2 (28.6%) 26 (52.0%) NS NS NS P <..05 ‡
CZS-betrokkenheid 5 (13.5%) 1 (16.7%) 0 6 (12.0%) NS NS NS P <..05 ‡
Pleurale effusie en/of ascites 7 (18.9%) 0 0 7 (14.0%) NS NS NS NS
Serum LDH, IE/μL
Mediaan 1257 1479 324 1166.5
Bereik 497-9517 820-2660 236-554 236-9517
≥ 1100 23 (62.2%) 4 (66.7%) 0 27 (54.0%) NS P < .01 * , P < .05 , 1-153 P <.01 ‡
Hypercalciëmie 24 (48%) 3 (50%) 0 27 (54.0%) NS P < .01 * , P < .05 , 1-153 P <.01 ‡
WBC, ×10 6 /L
Mediaan 24.0 5.6 11.4 21.3
Bereik 2.8-215.4 2.8-40.0 5.5-108.4 2.8-215.4
≥ 30.0 18 (48.6%) 1 (16.7%) 1 (14.3%) 20 (40.0%) NS NS NS NS
Absoluut abnormale lymfocyt
aantal, ×10 6 /L
Mediaan 11.2 0 2.1 7.2
Bereik 1.3-114.2 0 0-9.2 0-114.2
≥ 15.0 15 (40.5%) 0 1 (14.3%) 16 (32.0%) NS NS NS NS
Ongebruikelijk immunofenotype 7 (18.9%) 1 (16.7%) 0 8 (16.0%) NS NS NS P <.01 ‡
Overleven, mei
Mediaan 8.0 14.0 59.0 10.05
Bereik 0.2-71.0 0.6-20.0 12.0-148.0 0.2-148.0
< 6 14 (37.8%) 2 (33.3%) 0 16 (32.0%) NS NS
Algemeen NS P <.01 ‡

CNS geeft LDH van het centrale zenuwstelsel aan, lactaatdehydrogenase WBC, aantal witte bloedcellen NS, niet significant.

Statistisch significant bij subtypes van acute en lymfoom.

Statistisch significant in de groep met kortere overleving (minder dan 6 maanden).

Over het algemeen werd de overleving berekend vanaf de datum van diagnose. Bij 3 patiënten die zich in de smeulende of chronische fase bevonden vóór progressie naar de acute fase, werd de overleving berekend vanaf de datum van acute transformatie. De totale overleving werd berekend met de methode van Kaplan en Meier.24 Verschillen tussen overlevingscurven werden beoordeeld met behulp van de log-rank-test.25 Associatie tussen de kortere overlevingsgroep (minder dan 6 maanden) en chromosomale afwijkingen werd ook getest met de Fisher exact-test om specifieke afwijkingen te vinden voor een kortere overlevingsgroep.


Conclusie

Op basis van de waarnemingen die we hier rapporteren, lijkt chromosomale soortvorming niet gebruikelijk te zijn geweest langs de lijnen van mens en chimpansee, hoewel chromosoom 4 duidelijk opvalt als de beste kandidaat om een ​​rol te hebben gespeeld in een bepaald soortvormingsproces. In de toekomst zal de gedetailleerde studie van de interactie van chromosomale herschikkingen met enkele van de factoren die we in de huidige studie hebben verwijderd, met name met SD's, zeker licht werpen op de kwestie van de genomische verdeling van de snelheid van genetische evolutie.


8.16: Karyotypen - Biologie

Onrijpe teratomen hebben vaak chromosomale afwijkingen (63%), waarvan toename van chromosomen 3, 8, 12 en 14, verlies van chromosomen 4 en 13 en verschillende structurele herschikkingen, waaronder i(12p) gebruikelijk zijn. Er is voorgesteld dat cytogenetisch abnormale onrijpe teratomen meer kans hebben om terug te komen dan hun cytogenetisch normale tegenhangers.

Meer dan 300 volwassen teratomen hebben cytogenetische analyse ondergaan en slechts 4% heeft afwijkende karyotypen gehad, die alleen numerieke veranderingen vertonen, waarvan geen enkele terugkerend is. De weinige gevallen waarin afwijkingen zijn vastgesteld waren als volgt: trisomie van chromosoom 8 (2 gevallen), 13 (1 geval), 15 (1 geval), 20 (1 geval) en dubbele trisomie van chromosomen 7 en 12 verlies van chromosomen 3, 6, 7, 11, 16, 17, 21 en 22 structurele herschikkingen met +mar (2 gevallen), add(1)(q11) (1 geval), der(6)(t16)(q11q22) (1 geval ), i(12)(p10) (1 geval) en +del(20)(q11) (1 geval).

Volwassen teratomen die een kwaadaardige transformatie hebben ondergaan, vertonen meerdere numerieke en structurele chromosomale anomalieën, voornamelijk met betrekking tot de chromosomen X, 1, 3, 4, 5, 9, 10 en 11. Er werden verschillende overeenkomsten gevonden bij het vergelijken van de goedaardige cystische en kwaadaardige component van een ovariumteratoom. Het is opmerkelijk dat de goedaardige component meerdere anomalieën had (13 niet-willekeurige structurele en numerieke veranderingen), wat de mogelijkheid verhoogt dat meerdere anomalieën in de goedaardige component de tumor vatbaar maken voor kwaadaardige transformatie.

Complexe numerieke en structurele chromosoomveranderingen waren duidelijk in gemengde mesodermale tumoren, maar er zijn onvoldoende gegevens om te bepalen of dit tumorsubtype een andere samenstelling van chromosomale afwijkingen heeft dan de andere subtypes. Afwijkingen van chromosoom 12 werden gevonden in twee van de zes gevallen van ovariële choriocarcinomen. Monosomie 22 werd geïdentificeerd als de enige anomalie in een gemengde kiemcel-geslachtskoord-stromatumor in de eierstok, door zowel karyotypering als CGH, wat een gemeenschappelijk pathogeen mechanisme voor beide tumortypes kan suggereren.

Uit de tot nu toe beschikbare cytogenetische gegevens blijkt dat er overeenkomsten bestaan ​​tussen OGCT en TGCT. Isochromosoom 12p, i(12p), winst van chromosomen 1, 8, 21 en verlies van chromosomen 6 en 13 zijn in beide gerapporteerd.

Cytogenetica Moleculair Er is slechts een beperkt aantal onderzoeken geweest waarin vergelijkende genomische hybridisatie (CGH) is gebruikt om OGCT te onderzoeken, en er zijn geen allelotypeonderzoeken uitgevoerd.

27 ovariële GCT's werden geanalyseerd met CGH, waarvan 12 dysgerminomen, 6 EST's, 3 gemengde GCT's en de rest waren onrijpe teratomen. De gegevens waren gegroepeerd voor de dysgerminomen, EST's en gemengde GCT en de meest voorkomende bevinding was een winst van 12p, (14/19), waarvan 8 alleen een winst van 12p vertoonden (wat kan resulteren uit i(12p)), 4 toonde winsten van het geheel van chromosoom 12 en 2 vertoonden amplificatie op hoog niveau van 12p11-p12. 12p-versterking is een veel voorkomende bevinding in TGCT en in enkele van dergelijke gevallen is ook amplificatie van 12p11-p12 gevonden. In deze groep werden andere terugkerende afwijkingen gevonden die ook eerder als terugkerende bevindingen in TGCT zijn gemeld. Deze omvatten winst van het volledige chromosoom 21 (42% van kwaadaardige OGCT vs. 45% TGCT), winst van chromosoom 8 (42% OGCT vs. 45% TGCT), winst van 1q (32% OGCT vs. 36 TGCT) en verlies van chromosoom 13 (26% OGCT versus 38% TGCT). Er leek geen correlatie te bestaan ​​tussen het patroon van chromosomale onevenwichtigheden en het histologische subtype, behalve voor distale 1p-deletie, die exclusief werd gevonden in twee EST's. Ondertussen onthulde slechts 1 van de 6 onrijpe teratomen een afwijking, winst van chromosoom 14.

Een studie vatte deze bevindingen samen volgens histologische entiteit. Elk geanalyseerd dysgerminoom (n=12) vertoonde chromosomale onevenwichtigheden, met een gemiddeld aantal van 10 veranderingen per geval. Winsten kwamen vaker voor dan verliezen. De meest voorkomende afwijkingen waren winsten van 12p (8/12), 12q (9/12), 21q (8/12), 22q (7/12), 20q (6/12), 15q (5/12), 1p (4/12) en 6p (4/12) en het geheel van chromosomen 19 (6/12), 7 (5/12), 8 (5/12) en 17 (5/12). Verliezen van chromosoom 13 werden gezien in 7/12 van de gevallen. Alle 4 geanalyseerde EST's vertoonden wijzigingen in het aantal kopieën, met een gemiddelde van 6 per geval. Deze omvatten winst van 12p (3/4), 1q (3/4), 3p (2/4), 11q (2/4), Xp (2/4), en verlies van 18q (2/4). Er werden minder veranderingen waargenomen in de onrijpe teratomen, met een gemiddelde van 1,4 per geval. 4 van de 9 onrijpe teratomen hadden geen verandering in het kopienummer. In 2 gevallen met anomalieën werd winst van alle of delen van 1p, 16p, 19 en 22 vastgesteld.

Beide onderzoeken vonden dus vaak 12p-winsten in verschillende subtypes van OGCT, behalve onrijpe teratomen, en suggereren dat onrijpe teratomen een ander pad volgen dan dat van andere kwaadaardige OGCT (en TGCT).

Er zijn verschillende interfase-cytogenetische onderzoeken uitgevoerd op paraffinecoupes met behulp van centromere sondes om het aantal kopieën van chromosomen te bepalen, en sondes die specifiek zijn ontworpen om de i(12p) te identificeren. Een studie toonde oververtegenwoordiging van chromosomen 7 en 12 en ondervertegenwoordiging van chromosoom 18, die allemaal karakteristieke kenmerken zijn in het mannelijke tegenhanger testiculaire seminoom.

Betrokken genen en eiwitten

Opmerking Er zijn zeer weinig gegevens beschikbaar over de moleculaire mechanismen die betrokken zijn bij de initiatie en progressie van OGCT. TGCT heeft echter uitgebreidere analyses ondergaan. TGCT en OGCT hebben zeer vergelijkbare pathologische, biologische en cytogenetische kenmerken, dus het is zeer waarschijnlijk dat de betrokken genen vergelijkbaar zijn. Tot op heden is geen enkel gen ondubbelzinnig geïdentificeerd dat betrokken is bij de initiatie of progressie van TGCT. Verschillende genen, waaronder KRAS2, JAW1 en SOX5, zijn voorgesteld als de kandidaatgenen op 12p in TGCT. De kandidaat-genen werden doorzocht in het 12p11.2p12.1-amplicon en suggereerden dat DAD-R de meest waarschijnlijke kandidaat is. Overexpressie van BCAT1, CMAS, EKI1, KRAS2 en SURB7 werd aangetoond in een reeks TGCT. LOH van regio's die vaak betrokken zijn bij TGCT wordt bekeken in een panel van 35 OGCT. De resultaten toonden LOH van 3q27-q28 (50%), 5q31 (33%), 5q34-q35 (46%), 9p22-p21 (32%) en 12q22 (53%) en werden gevonden in alle subtypes van OGCT. Deze gegevens suggereren dat deze loci mogelijk tumorsuppressorgenen herbergen die betrokken zijn bij de initiatie en progressie van OGCT en TGCT.

Ovariële teratomen ontwikkelen zich in transgene muizen zonder een functioneel c-mos-proto-oncogen. Analyse van twintig teratomen op mutaties van c-MOS identificeerde er echter geen, wat suggereert dat mutaties van c-MOS geen significante rol spelen bij de ontwikkeling van menselijke ovariumteratomen.

Amplificatie van MYCN werd gevonden in 3/3 onrijpe teratomen, maar in 0/5 dermoid cysten en 0/5 rijpe teratomen. Minder dan 3% van de GCT heeft mutaties van p53. Een somatische nieuwe missense-mutatie (G naar C op nucleotide 2467) van c-KIT is geïdentificeerd in één ovarieel gemengd dysgerminoom/EST, wat resulteerde in constitutieve activering van KIT-kinase-activiteit.


Bekijk de video: Paara Dige Episode 66. පර දග. 19th August 2021 (December 2021).