Informatie

4.2: Gistgroeimedia - Biologie


Voor routinematige kweek gebruiken wetenschappers meestal rijke media die alle voedingsstoffen leveren die cellen nodig hebben om te groeien. De afzonderlijke componenten van rich media zijn vaak ongedefinieerd. Gist wordt bijvoorbeeld gewoonlijk gekweekt in een medium dat bekend staat als: YPD, die eenvoudig en goedkoop te bereiden is. De "Y” in YPD verwijst naar een gistextract, dat de in water oplosbare verbindingen bevat die worden gegenereerd wanneer gist gedwongen wordt zichzelf te verteren. (Degenen onder jullie die Australië hebben bezocht, zijn misschien gistextract tegengekomen in de populaire spread, Marmite.) De “P” verwijst naar pepton, een mengsel van peptiden en aminozuren bereid door dierlijke eiwitten te verteren met proteasen. De "NS” verwijst naar dextrose of glucose, de favoriete koolstofbron van gist (Sherman, 2002).

Omdat YPD grotendeels uit ruwe extracten bestaat, kan de samenstelling ervan aanzienlijke variaties tussen partijen vertonen. Deze variatie is zelden een probleem, omdat YPD meer dan genoeg essentiële voedingsstoffen bevat om aan de metabolische behoeften van cellen te voldoen. Veel experimenten vereisen echter media met een bepaald samenstelling. Om aan deze behoefte te voldoen, heeft de gistgemeenschap een verscheidenheid aan synthetische media ontwikkeld. Individuele componenten van de synthetische media kunnen worden gemanipuleerd om aan de behoeften van een experiment te voldoen. (Later in het semester zullen we gedefinieerde media gebruiken om op bepaalde genotypen te selecteren.)

Gist kan worden gekweekt in vloeibare culturen of op het oppervlak van platen met vaste media. Agar wordt meestal gebruikt om vloeibare groeimedia te laten stollen bij het bereiden van platen. Stammen worden doorgaans op agarplaten gehouden voor routinematig gebruik. Cellen groeien in kolonies op platen. De cellen in een kolonie lijken genetisch erg op elkaar, zo niet identiek, omdat ze zijn afgeleid van dezelfde voorlopercel. De meeste giststammen kunnen enkele maanden op borden in de koelkast worden bewaard met minimaal verlies aan levensvatbaarheid.