Informatie

7.6: Stikstoffixatie - Biologie


Het proces van stikstofbinding is belangrijk voor het leven op aarde, omdat stikstof uit de lucht uiteindelijk de bron is van amines in eiwitten en DNA. Het enzym dat een belangrijke rol speelt in dit proces, wordt stikstofase genoemd en wordt aangetroffen in bepaalde soorten anaërobe bacteriën genaamd diazotrofen. Symbiotische relaties tussen sommige planten (bijvoorbeeld peulvruchten) en de stikstofbindende bacteriën geven de planten toegang tot gereduceerde stikstof. De algehele reductiereactie gekatalyseerd door stikstofase is:

[ ext{N}_2 + 6 ext{H}^+ + 6 ext{e}^- ightarrow 2 ext{NH}_3]

Bij deze reacties is de hydrolyse van 16 ATP vereist. De ammoniak kan worden geassimileerd in glutamaat en andere moleculen. Enzymen die stikstofkatalyse uitvoeren zijn zeer gevoelig voor zuurstof en moeten hiervan vrij worden gehouden. Om deze reden zijn de meeste stikstofbindende bacteriën anaëroob. Beweging van amines door biologische systemen vindt grotendeels plaats door het proces van transminatie, dat hieronder wordt besproken in het aminozuurmetabolisme.


Microbiële ecologie

In dertien beknopte en actuele hoofdstukken, Microbiële ecologie geeft een breed overzicht van dit snelgroeiende vakgebied en legt de basisprincipes op een makkelijk te volgen manier uit. Met behulp van een integratieve benadering bestrijkt het uitgebreid traditionele kwesties in ecologie, evenals geavanceerde inhoud op het snijvlak van ecologie, microbiologie, milieuwetenschappen en engineering, en moleculaire biologie.

Door de microbiële kenmerken te onderzoeken die microben in staat stellen om in verschillende omgevingen te groeien, biedt het boek inzicht in relevante methodologieën voor de karakterisering van micro-organismen in de omgeving. De auteurs putten uit hun uitgebreide ervaring in het onderwijzen van microbiologie om de nieuwste hot-buttononderwerpen in het veld aan te pakken, zoals:

  • Ecologie van micro-organismen in natuurlijke en kunstmatige omgevingen
  • Vooruitgang in moleculair-gebaseerd begrip van microbiële fylogenie en interacties
  • Microbieel aangedreven biogeochemische processen en interacties tussen microbiële populaties en gemeenschappen
  • Microbiële activiteiten in extreme of ongebruikelijke omgevingen
  • Ecologische studies met betrekking tot de microbiologie van dieren, planten en insecten
  • Microbiële processen en interacties die verband houden met milieuvervuiling

Ontworpen voor gebruik in het onderwijs, Microbiële ecologie biedt tal van speciale functies om zowel studenten als instructeurs te helpen, waaronder:

  • Informatieboxen die belangrijke microbiële ecologieproblemen belichten
  • "Microbial Spotlights" die zich richten op hoe prominente microbiële ecologen geïnteresseerd raakten in microbiële ecologie
  • Voorbeelden die de rol van bacteriële interactie met mensen illustreren
  • Oefeningen om kritisch denken te bevorderen
  • Geselecteerde leeslijsten
  • Hoofdstuksamenvattingen en evaluatievragen voor klassikale discussie

Verschillende microbiële interacties en gemeenschapsstructuren worden gepresenteerd aan de hand van voorbeelden en illustraties. Ook inbegrepen zijn mini-casestudy's die de activiteiten van micro-organismen in specifieke omgevingen behandelen, evenals een woordenlijst en sleutelwoorden. Al deze functies maken dit een ideaal leerboek voor afgestudeerde of hogere studenten in biologie, microbiologie, ecologie of milieuwetenschappen. Het dient ook als een zeer nuttige referentie voor wetenschappers en milieuprofessionals.

PowerPoint-dia's van figuren uit het boek kunnen worden gedownload op: ftp://ftp.wiley.com/public/sci_tech_med/microbial_ecology


Abstract

Veel nuttige bacteriën die plantenwortels koloniseren en plantengroei vergemakkelijken om de stress van verschillende biotische en abiotische factoren te verlichten door middel van directe en indirecte mechanismen, staan ​​bekend als plantengroeibevorderende rhizobacteriën (PGPR). Deze PGPR's worden erkend als efficiënte biofertilizers, biocontrolemiddelen en microbiële inoculanten. Als we kijken naar de potentiële voordelen van PGPR's in de huidige studie, zijn er inspanningen geleverd om rhizobacteriën te isoleren, te screenen en te karakteriseren uit de grondmonsters die zijn verzameld uit de wortelzone van verschillende pulsen. Van de zeven stammen waren zes stammen methylrood-positief en Voges-Proskauer's test positief, wat wijst op hun fermentatievermogen. Alle zeven stammen behalve AV-1 produceerden katalase-enzym, wat hun potentieel als veelbelovende biologische bestrijdingsmiddelen aangeeft. AV-4- en AV-7-stammen bleken fosfaatoplossers te zijn en stammen AV-1, AV-2 en AV-7 waren siderofoorproducenten. Twee stammen AV-3 en AV-5 waren tolerant voor zware metalen voor arseen (29,48 mg/l), barium (12,56 mg/l) en nikkel (5,926 mg/l). Als we kijken naar de verschillende eigenschappen van alle rhizobacteriële isolaten, kan AV-7 worden beschouwd als een potentiële biofertilizer ter ondersteuning van de groei en productie van de peulvruchten in de bodem die niet is verontreinigd met As, Ba en Ni. Dit zal helpen bij het ondersteunen van duurzame pulsproductie.


Algenstikstoffixatie op gematigde akkers

Een methode voor het testen van N2-ase-activiteit van algenkorsten in het veld werd gebruikt om het effect te evalueren van inoculatie met vloeibare of gedroogde zandculturen van drie soorten algen op veldpercelen die waren ingezaaid met wintertarwe, met en zonder toegevoegde N en irrigatie.

De fixatie werd verhoogd door alle inoculanten, maar het meest effectief was een vloeibare toepassing vanNostoc ellipsosporum. Anabaena cilindrica enNostoc puntvormig waren het meest effectief bij toepassing als droge zandculturen. Inoculatie had geen effect op de gewasopbrengst.

De voorjaarstoepassing van 80 kg N ha −1 als nitro-krijt verminderde de N-fixatie op percelen die waren geïnoculeerd metNostoc ellipsosporum vroeg in het seizoen, maar stimuleerde later de fixatie toen veel van de toegediende N door het gewas was gebruikt en door regen was uitgeloogd. Deze toename was voornamelijk het gevolg van het dichtere bladerdek van de gewassen, waardoor de verdroging van het bodemoppervlak werd verminderd.

Luchtdrogende korstjes vanN. ellipsosporum gekweekt op aarde in het laboratorium veroorzaakte uitgebreide lysis van de vegetatieve cellen wanneer korsten opnieuw werden bevochtigd, na enkele dagen gevolgd door een aanzienlijke toename van NH4 + concentratie. Alle N2-ase-activiteit is verloren gegaan. Levensvatbare akineten bleven na uitdroging over, maar het bodemoppervlak werd opnieuw gekoloniseerd door Lyngbya, wat gunstig leek te zijn door de hoge oplosbare N-concentratie. Zeer vergelijkbare effecten werden waargenomen wanneer korsten werden afgekoeld tot -3°C. Afkoeling tot 0°, 0,5 en -2,0°C veroorzaakte enige cellulaire lekkage en een afname van N2-ase-activiteit, maar deze herstelde zich na 2-4 dagen tot een snelheid die hoger was dan die van de controle.

Met water extraheerbare N in niet-gestresste algenkorsten vertegenwoordigde minder dan 2% van het totaal, terwijl 9-35% van de totale N verloren ging uit de cellen in vloeibare kweek.


Resultaten

Bacterieachtig celaantal en samenstelling in de Isopora palifera skelet

In alle kolonies was de groene laag aanwezig in het koraalskelet onder koraalweefsel (Fig. 1a) en er was een significant verschil in bacterieachtige celaantallen tussen de groene en witte lagen (Fig. 1b). De groene laag had gemiddeld 2,55 x 108 cellen/g terwijl de witte laag gemiddeld 1,7 x 108 cellen/g had. Er waren significant meer cellen in de groene laag dan in de witte laag, met a P waarde van 0,0068 met behulp van t test (Extra bestand 1: Figuur S1).

Skelet van Isopora palifera en celaantallen in het skelet. een De groene laag was een groene kleur die constant aanwezig was in de CaCO3 skelet onder weefsel in alle kolonies van ik. palifera de witte laag was gebruikelijk CaCO3 skelet zonder groene kleur. De schaalbalk geeft 1 cm aan. B Gemiddeld aantal cellen van drie kolonies in de groene en witte lagen. Verschillende merken (een, B) geven significante verschillen in celaantal aan door de t-test van de student tussen de lagen (P = 0,0068, foutbalk = standaarddeviatie)

Voor bacteriële samenstelling in de groene laag toonden 16S-ampliconresultaten aan dat: chloorbi, Firmicutes, Chloroflexi, Proteobacteriën, en Actinobacteriën waren dominant en hun gemiddelde relatieve abundanties in alle monsterkolonies waren respectievelijk 35,24% (SE 12,40), 15,54% (SE 8,56), 16,58% (SE 7,05), 12,10% (SE 4,05) en 8,29% (SE 2,61) (Fig. 2a). Daarnaast is een OTU (OTU1) behorend tot chloorbi (geslacht Prothecochloris) werd in alle monsters gevonden met relatieve abundanties tussen 1, 16% (kolonie I) en 87, 50% (kolonie G) (figuur 2b en aanvullend bestand 1: tabel S3). Bovendien was er geen variatie in bacteriesamenstelling binnen de groene laag langs de diepten van waaruit kolonies werden verzameld (ANOSIM: R = − 0.21, P = 0.857).

Bacteriële taxonomische verspreiding in de groene laag van Isopora palifera. een Relatieve abundanties van bacteriesamenstelling op basis van 16S rDNA. Kleuren geven verschillende bacteriële phyla aan. B Heatmap van bacteriële OTU-abundanties in de negen koraalkolonies. Kleuren die verschillende bacteriële stammen aangeven, zijn hetzelfde als de bacteriële stam in een en de gedetailleerde taxonomische affiliatie van OTU's staan ​​in het aanvullende bestand 1: Tabel S3. De meest dominante OTU1 behoort tot het geslacht Prothecochloris (zwarte pijl) en was in elke kolonie aanwezig. De kleursleutel geeft de relatieve abundantie van elke OTU in elke kolonie aan

Vermeende metabole routes van microben in de ik. palifera skelet

Volgens metagenomica-analyse van de groene laag droegen bacteriën de meeste genen bij in elke kolonie (Aanvullend bestand 1: Tabel S4) deze genen waren voornamelijk afkomstig van chloorbi in kolonies B, C, G, H en I (aanvullend bestand 1: figuur S2), wat vergelijkbaar is met de resultaten van de samenstellingsanalyse met 454 pyrosequencing voor 16S rDNA in kolonies B, C, G en H (Fig. 2a). We identificeerden variatie in relatieve bijdrage van chloorbi in twee sequentiebenaderingen, met een lage abundantie in 16S rDNA-kolonies A, F en I en in metagenoomkolonies A, E, F, kan deze variatie worden toegeschreven aan verschillende gebruikte sequentietechnologieën en hun resolutie.

Metagenoomresultaten toonden aan dat genen van stikstofmetabolisme in de groene laag betrokken waren bij stikstofassimilatie en reductieroutes van stikstoffixatie, dissimilerende / assimilerende nitraatreductie en denitrificatie (Fig. 3, Aanvullend bestand 1: Figuur S3). Voor oxidatieroutes kon echter alleen een route worden geïdentificeerd die betrokken is bij nitrificatie. Van de genen die betrokken zijn bij het stikstofmetabolisme, kwamen genen die betrokken zijn bij stikstoffixatie, glutamine/glutamaatsynthasen en reductie van hydroxylamine het meest voor en werden op hun beurt voornamelijk bijgedragen door GSB. Andere bacteriën die bijdragen aan stikstoffixatie en de reductie van hydroxylamine-genen behoorden tot Firmicutes, terwijl andere bacteriën die bijdragen aan glutamine/glutamaatsynthasen-genen behoorden tot Actinobacteriën, Bacteroidetes, Chloroflexi, Proteobacteriën, en Firmicutes.

Vermeende routes en een voorgesteld syntrofisch model van dominante bacteriën in de groene laag. een Vermeend stikstof-, zwavel- en koolstoffixatiemetabolisme in de groene laag. Vaste pijlen geven paden aan met genen die aanwezig zijn in het metagenoom. Gestippelde pijlen geven paden aan met genen die niet aanwezig zijn in het metagenoom. Sterretjes geven routes aan met genen die zijn aangesloten bij GSB. Kleuren van pijlen geven verschillende metabole routes aan. B Een syntrofisch model van dominante GSB en sulfaatreducer in de groene laag. GSB is in staat om licht te verkrijgen dat in het koraalskelet schijnt. Tijdens fotosynthese verkrijgt GSB CO2 vrijgegeven door sulfaatreducerende bacteriën (SRB) en andere heterotrofen. Voor koolstof gefixeerd door de rTCA-cyclus, verkrijgt GSB sulfide als een elektronendonor, die afkomstig is van SRB, terwijl de SRB geoxideerde zwavelverbindingen verkrijgt die vrijkomen uit GSB. Daarom stellen GSB en SRB elkaar zwavelbronnen ter beschikking. Functionele redundantie van stikstoffixatie kan aanwezig zijn in het koraalskelet omdat zowel GSB als SRB stikstoffixatie kunnen verwerken

Metagenoomanalyses waren gericht op het zwavelmetabolisme (Fig. 3, Aanvullend bestand 1: Figuur S4) en toonden aan dat GSB, Firmicutes, Chloroflexi, en Deltaproteobacteriën droegen bij aan volledige trajecten voor assimilerende en dissimilerende zwavelreductie. Vooral GSB droeg bij aan alle routes van dissimilerende zwavelreductie, inclusief genen voor dissimilerende sulfietreductase, APS-reductase en ATP-sulfylase, die betrokken zijn bij de oxidatie van sulfide en sulfiet.

De volledige omgekeerde TCA (rTCA) -cyclus en reductieve acetyl-CoA-route, die alleen aanwezig zijn in anaëroben of micro-aerofielen, werden geïdentificeerd in metanomen (Fig. 3, Aanvullend bestand 1: Figuur S5). Voor de twee routes droeg GSB alle genen bij die betrokken zijn bij de rTCA-cyclus, en Chloroflexi, Actinobacteriën, Nitrospiraeen GSB dragen genen bij in gedeeltelijke reacties van de reductieve acetyl-CoA-route. Hoewel GSB en andere endolithische bacteriën ook deelnemen aan de reductieve acetyl-CoA-route, droeg geen van hen een complete set genen bij voor deze route. Daarom moet de GSB de belangrijkste bijdrage leveren aan koolstoffixatie via de rTCA-cyclus.

Kandidaat Prosthecochloris sp. A305-genoom hersteld door genoombinning

Co-assemblage van negen metanomen met behulp van Ray-META leidde tot een succesvol herstel van de Ca. Ptc. sp. A305 ontwerp-genoom na het weggooien van de geassembleerde contigs. Het concept-genoom van Ca. Ptc. sp. A305 had 75 contigs en was in totaal 2.094.032 bp lang. De langste contig- en N50-waarde waren respectievelijk 201.178 en 55.482 bp. Een kwaliteitscontrole bracht een lage contaminatie (< 1%) in het teruggevonden genoom aan het licht en een matige tot hoge volledigheid (

78%) geschat door CheckM. Het concept-genoom van Ca. Ptc. sp. A305 had 2046 genen, waaronder 2001-eiwitcoderende genen, 24 tRNA-genen en het GC-gehalte van 47,83%.

Binning-resultaten identificeerden ook een andere bin met hoge volledigheid, Bin 3. Deze bin heeft echter een heterogeniteit van 2. Herbinning kon deze bin niet scheiden in zijn sub-bins, wat een knelpunt is van de binning-algoritmen voor het delen van nauw verwante organismen een bak. Twee 16S-rRNA-kopieën (1 compleet en 1 gedeeltelijk) waren aanwezig in Bin 3 die werden gebruikt in op 16S rRNA gebaseerde fylogenetische analyse, en er werd geen verdere analyse uitgevoerd op deze bak.

Anaërobe cultuur, morfologie en pigmentidentificatie van endolithische GSB

De culturen N2 (bruin-groene kleur) (Fig. 4a) en N1 (groene kleur) (Fig. 4d) werden verkregen uit de groene laag. Beide culturen groeiden alleen in de schemerige lichtconditie (aanvullend bestand 1: figuur S6). Verder werden TEM en FISH gebruikt om de morfologie en ultrastructuur van de cellen in de kweek te identificeren. De meeste cellen in N2 en N1 waren staafvormig en bezaten chlorosoomachtige structuren nabij hun celmembraan (Fig. 4b, e), wat de typische morfologie is van groene zwavelbacteriën. Daarnaast zijn de meeste cellen uit het skelet van de groene laag en Ptc. vibrioformis DSM 260 had ook chlorosoomachtige structuren (Aanvullend bestand 1: Figuur S7), wat de hypothese bevestigde dat cellen in de groene laag en culturen dezelfde morfologie en ultrastructuur hebben. Bovendien onthulden FISH-afbeeldingen van N2 en N1 ook dat de meeste cellen in de twee culturen GSB waren (Fig. 4c, f, Aanvullend bestand 1: Figuur S8). De cellen in N2 waren langwerpig, terwijl cellen van N1 staafvormig waren. Later, bij analyse van het absorptiespectrum van N1, Ptc. vibrioformis en Chl. luteolum die we hebben waargenomen, hadden grote pieken in 420-430 nm en 650-660 nm, wat de aanwezigheid van Bchl c bevestigt (aanvullend bestand 1: figuur S9a) en het resultaat van de metagenoomanalyse ondersteunt (aanvullend bestand 1: figuur S9b). Niettemin had N2 ook een maximale piek bij 650-660 nm, maar de belangrijkste piek in de korte golf was bij 460-470 nm, wat wijst op de aanwezigheid van Bchl e.

De twee endolitische GSB-culturen en morfologie van de GSB-cellen. N2 (een) en N1 (NS) culturen groeiden in de schemerige lichtconditie en hadden respectievelijk een bruine en groene kleur. B, e Foto's van ultradunne secties van cellen van respectievelijk N2- en N1-culturen, gezien door een transmissie-elektronenmicroscoop. De meeste cellen in de twee culturen hebben chlorosoomachtige structuren (pijlen). Schaalbalken geven 200 nm aan. C, F Fluorescentie in situ hybridisatie beelden van cellen uit respectievelijk N2- en N1-culturen. GSB-cellen (pijlpunten) zijn geel en andere bacteriën (pijlen) zijn rood. Schaalbalken geven 10 μm . aan

Fylogenetische analyse van GSB uit het koraalskelet

Met betrekking tot de identificatie door V6-V8 van 16S rDNA-sequenties op basis van de NCBI-database, kwamen beide sequenties van N2 en N1 het dichtst bij een sequentie van Prothecochloris sp. (MF423475.1), met een overeenkomst van respectievelijk meer dan 98% en 96%. Hoewel er geen 16S rDNA-gen werd gevonden in het genoom van Ca. Ptc. sp. A305, het 16S-rDNA afgeleid van Bin 3 had 99% overeenkomst met OTU1 en de 16S-rDNA-sequentie van N2 (Fig. 5). Hoewel N1 niet hetzelfde was als N2, Bin 3 of OTU1 waren ze allemaal dicht bij een cluster van koraal-geassocieerde Prothecochloris (CAP), inclusief Ca. Ptc. korallensis [22] (Fig. 5).

Fylogenetische boom van 16S rDNA uit endolitische culturen (N2 en N1), OTU1 en genoombakken. De boom is gegenereerd met behulp van de maximum-waarschijnlijkheidsmethode met 1000 bootstraps. Schaalbalk geeft 0,01 veranderingen per nucleotideplaatsen aan. Beide sequenties van culturen (elke cultuur heeft twee biologische herhalingen), OTU1 en een volledige 16S-sequentie van Bin 3 geclusterd met sequenties van andere koraal-geassocieerde Prothecochloris (CAP), die de CAP-clade vormt

Bovendien, het vergelijken van de hele Ca. Ptc. sp. A305-genoom naar andere complete en conceptgenomen van reeds gesequenced soorten van phylum chloorbi, scheidde de fylogenie de genomen in drie grote clades (chloorbi, Prothecochloris, en chloorbaculum) zoals verwacht (Extra bestand 1: Afbeelding S10). Ca. Ptc. sp. A305 en Bin 3 waren in clade Prothecochloris met de naaste buur—Ca. Ptc. korallensis - ook geïsoleerd uit koraal en vormt een CAP-clade die congruent is met 16S fylogenetische analyse.

N fixatie van endolithische GSB en H2S-productie door zwavelreducerende bacteriën (SRB)

Aangezien de V6-V8 van de 16S-rDNA-sequentie van N2 consistent was met de metagenoombak en de meest dominante OTU in alle negen kolonies, en binnen de N2-culturen, was de OTU van Prothecochloris was de meest dominante (met een relatieve overvloed van 64,1%, in aanvullend bestand 1: figuur S11), de N2-cultuur was een representatieve cultuur en we gebruikten deze om het vermogen van GSB om stikstof te fixeren door ARA en FISH-NanoSIMS te valideren. Verder toonde het resultaat van ARA (Fig. 6a) significant hogere concentraties C2H4 dan de controle en negatieve controle gedurende 24, 48 en 96 uur in N2, wat bevestigt dat de endolithische GSB-culturen stikstofase-activiteit hadden. Om de resultaten verder te consolideren, hebben we FISH-NanoSIMS-beeldvorming van N2-culturen gebruikt die zijn gekweekt in omstandigheden met 15 N2 omdat de enige stikstofbron meer 15 N in cellen vertoonde, wat bepaalt dat endolithische bacteriën stikstof fixeren. FISH identificeerde GSB als de dominante bacterie in N2 die stikstof kan fixeren (Fig. 6b, Aanvullend bestand 1: Figuur S12).

Stikstoffixatie-activiteit van de endolithische cultuur uit de groene laag van het koraalskelet. een Acetyleenreductietest als proxy voor stikstoffixatieactiviteit in endolithische cultuur N2. Basaal medium werd gebruikt als controle en gesteriliseerd N2 als negatieve controle. een, B Geef significant verschil in de concentratie van C . aan2H4 (P < 0,002) productie voor elk tijdstip door t-test tussen N2 en controles. B Parallelle FISH-NanoSIMS-beelden van endolithische verrijkingscultuur (N2) vóór (B, C, NS) en daarna (e, F, G) 15 Nee2 incubatie. De FISH-resultaten voor (B) en daarna (e) 15 Nee2 incubatie tonen de endolithische GSB (groen) en andere microben (rood). Natuurlijke overvloed aan stikstofisotopensamenstelling (12 C 15 N/12 C 14 N) is 0,00367 en is zwart in de kleurenbalk in beide afbeeldingen C en F. De 32 S-afbeeldingen tonen de verspreiding van alle micro-organismen ervoor NS en daarna G 15 Nee2 incubatie. Schaalbalken geven 5 μm . aan

De potentiële GAR in de gemeenschap van N2 waren: Halodesulfovibrio, desulfuromusa, niet geclassificeerd Desulfuromonadaceae, en niet geclassificeerd Desulfobacteraceae, samen goed voor

13% van de relatieve overvloed (aanvullend bestand 1: figuur S11). tevens de dsrA gen werd gedetecteerd in de N2-cultuur en twee monsters van de groene laag van I. palifera (Aanvullend bestand 1: Tabel S5). De verhouding van dsrA gen naar 16S-gen in N2 en twee monsters waren respectievelijk 0,0461, 0,0006 en 0,0013. Bovendien was de functionele test van sulfaatreductie ook afhankelijk van de N2-cultuur. Na 10 dagen kweken produceren de N2-culturen 1,339 ppm H2S terwijl de OD gemiddeld 0,649 was (aanvullend bestand 1: tabel S6), wat bevestigt dat het de SRB was die sulfaat in de culturen verminderde.


Antimicrobiële activiteit van koralen

Van koraalsoorten zoals Gorgonian-soorten is aangetoond dat ze antimicrobiële activiteit bezitten wanneer extracten zijn getest [3]. Papieren schijfjes die koraalextracten van gorgonenkoraal bevatten, vertoonden een duidelijke remmingszone wanneer ze werden getest tegen verschillende mariene bacteriën en verschillende menselijke pathogene bacteriën [3]. Van mariene bacteriën is aangetoond dat ze minder gevoelig zijn voor extracten van gorgonenkoraal dan niet-mariene bacteriesoorten [4]. Bacteriën die de oppervlakken van met slijm bedekt koraal koloniseren, kunnen niet alleen als ziekteverwekkers werken, ze kunnen ook macrofouling veroorzaken en dus zouden mechanismen om de microbiële activiteit onder controle te houden significant zijn [4]. Wanneer koraalkolonies worden gestrest door bacteriën, neemt hun productie van slijm toe - wat alleen de koraalkolonies niet doodt - bacteriën kunnen de dood van koraal veroorzaken, zoals aangetoond in experimentele proeven zonder antibiotica [4].

Toekomstig onderzoek zou gedaan kunnen worden met betrekking tot antimicrobiële activiteit in verschillende aspecten [3]. Een onderwerp dat nader onderzoek behoeft, is niet-toxische antimicrobiële activiteit, waarbij verbindingen die door het koraal worden geproduceerd niet noodzakelijkerwijs de groei van het specifieke organisme doden of remmen, maar selectief werken tegen fenotypes of kenmerken die worden uitgedrukt door pathogene micro-organismen [3]. Met andere woorden, de koralen kunnen zichzelf verdedigen tegen microben door zich te richten op mechanismen die nodig zijn voor pathogenese, maar niet voor overleving in de celcultuur [3]. Een ander onderwerp dat nader moet worden overwogen, is de rol van symbiotische mariene bacteriën waarvan is aangetoond dat ze secundaire metabolieten produceren waarvan vroeger werd aangenomen dat ze door het gastheerorganisme werden geproduceerd [3].


Zuñiga, C. et al. Het voorspellen van dynamische metabolische eisen in de fotosynthetische eukaryoot Chlorella vulgaris. Planten Fysiol. 176, 450–462 (2017).

Chubukov, V., Gerosa, L., Kochanowski, K. & Sauer, U. Coördinatie van microbieel metabolisme. nat. Rev. Microbiol. 12, 327–340 (2014).

Zuñiga, C. et al. Metabolisch model op genoomschaal voor de groene alg Chlorella vulgaris UTEX 395 voorspelt nauwkeurig fenotypes onder autotrofe, heterotrofe en mixotrofe groeiomstandigheden. Planten Fysiol. 172, 589–602 (2016).

Levitan, O. et al. Hermodellering van intermediair metabolisme in diatomeeën Phaeodactylum tricornutum onder stikstofstress. Proc. Natl Acad. Wetenschap. VS 112, 412–417 (2015).

Selvarasu, S. et al. Gecombineerd in silico-modellering en metabolomics-analyse om CHO-celcultuur in fed-batch te karakteriseren. Biotechnologie. Bioeng. 109, 1415–1429 (2012).

Bu, X., Sun, L., Shang, F. & Yan, G. Vergelijkende metabolomics-profilering van gemanipuleerde Saccharomyces cerevisiae leiden tot een strategie die de productie van β-caroteen verbetert door suppletie met acetaat. PLoS ONE 12, 1–21 (2017).

Rakicka, M., Lazar, Z., Dulermo, T., Fickers, P. & Nicaud, J. M. Lipidenproductie door de olieachtige gist Yarrowia lipolytica gebruik van industriële bijproducten onder verschillende kweekomstandigheden. Biotechnologie. Biobrandstoffen 8, 1–10 (2015).

Duits-Báez, L. et al. Chemische samenstelling en fysisch-chemische eigenschappen van Phaeodactylum tricornutum restbiomassa van microalgen. Eten Wetenschap. technologie. Int. 23, 681–689 (2017).

Parsons, T.R., Stephens, K. & Strickland, J.D.H. Over de chemische samenstelling van elf soorten mariene fytoplankters. Kan. J. Vis. Aquat. Wetenschap. 18, 1001–1016 (1961).

Siron, R., Giusti, G. & Berland, B. Veranderingen in de vetzuursamenstelling van Phaeodactylum tricornutum en Dunaliella tertiolecta tijdens de groei en bij fosfortekort. maart Ecol. prog. ser. 55, 95–100 (1989).

Yang, Y. et al. Vetzuur- en lipidenklasse samenstelling van de microalg. Phaeodactylum tricornutum 368, 363–368 (2017).

Willis, A., Chiovitti, A., Dugdale, T. M. & Wetherbee, R. Karakterisering van de extracellulaire matrix van Phaeodactylum tricornutum (Bacillariophyceae): Structuur, samenstelling en kleefeigenschappen. J. Phycol. 49, 937–949 (2013).

U, C. et al. Coördinatie van bacterieel proteoom met metabolisme door cyclische AMP-signalering. Natuur 500, 301–306 (2013).

Zuñiga, C. et al. Omgevingsstimuli zorgen voor een overgang van samenwerking naar competitie in synthetische fototrofe gemeenschappen. nat. microbiologisch. 4, 2184–2191 (2019).

Tibocha-Bonilla, J.D., Zuñiga, C., Godoy-Silva, R.D. & Zengler, K. Vooruitgang in metabolische modellering van olieachtige microalgen. Biotechnologie. Biobrandstoffen 11, 241 (2018).

King, Z.A. et al. BiGG Models: een platform voor het integreren, standaardiseren en delen van genoomschaalmodellen. Nucleïnezuren Res. 44, D515–D522 (2016).

Orth, J.D., Thiele, I. & Palsson, B.Ø. Wat is fluxbalansanalyse? nat. Biotechnologie. 28, 245–248 (2010).

Noreña-Caro, D. & Benton, M. G. Cyanobacteria als foto-autotrofe biofabrieken van hoogwaardige chemicaliën. J. CO2 Util. 28, 335–366 (2018).

Hefzi, H. et al. Een reconstructie op consensus-genoomschaal van het metabolisme van ovariumcellen van de Chinese hamster. Cel systeem. 3, 434-443.e8 (2016).

Kerkhoven, E.J., Pomraning, K.R., Baker, S.E. & Nielsen, J. Regulering van het aminozuurmetabolisme regelt de flux naar lipideaccumulatie in Yarrowia lipolytica. npj Syst. Biol. Toepasselijk 2, 16005 (2016).

Levering, J., Dupont, C.L., Allen, A.E., Palsson, B.O. & Zengler, K. Geïntegreerde regulerende en metabole netwerken van de mariene diatomeeën Phaeodactylum tricornutum voorspel de reactie op stijgende CO2 niveaus. mSystemen 2, e00142-16 (2017).

Mo, M.L., Palsson, B.Ø. & Herrgård, M. J. Extracellulaire metabolomische metingen verbinden met intracellulaire fluxtoestanden in gist. BMC Syst. Biol. 17, 1–17 (2009).

Schellenberger, J. et al. Kwantitatieve voorspelling van cellulair metabolisme met op beperkingen gebaseerde modellen: de COBRA Toolbox v2.0. nat. Protoc. 6, 1290–1307 (2011).

Levering, J. et al. Genoomschaalmodel onthult metabolische basis van biomassa-partitionering in een modeldiatomee. PLoS ONE 11, 1–22 (2016).

Thiele, I. & Palsson, B. Ø. Een protocol voor het genereren van een hoogwaardige metabole reconstructie op genoomschaal. nat. Protoc. 5, 93–121 (2010).

Diogo, C.V., Yambire, K.F., Fernández Mosquera, L., Branco, F.T. & Raimundo, N. Mitochondriale avonturen bij de organellenmaatschappij. Biochem. Biofysica. Onderzoek gemeenschappelijk 500, 87–93 (2018).

Remmers, I.M. et al. Orkestratie van transcriptoom, proteoom en metaboloom in de diatomeeën Phaeodactylum tricornutum tijdens stikstofbeperking. Algen Res. 35, 33–49 (2018).

Smith, S.R. et al. Evolutie en regulatie van stikstofstroom door gecompartimenteerde metabole netwerken in een mariene diatomee. Nat Communautair 10, (2019).

Raiford, D.W. et al. Beperken de biosynthetische kosten van aminozuren de eiwitevolutie in? Saccharomyces cerevisiae? J. Mol. Evol. 67, 621–630 (2008).

Seligmann, H. Kostenminimalisatie van aminozuurgebruik. J. Mol. Evol. 56, 151–161 (2003).

Mee, M.T., Collins, J.J., Church, G.M. & Wang, H.H. Syntrofische uitwisseling in synthetische microbiële gemeenschappen. Proc. Natl Acad. Wetenschap. VS 111, E2149-E2156 (2014).

Krick, T. et al. Aminozuurmetabolisme is in strijd met eiwitdiversiteit. Mol. Biol. Evol. 31, 2905–2912 (2014).

Du, B., Zielinski, D.C., Monk, J.M. & Palsson, B.O. Thermodynamische gunstigheid en padopbrengst als evolutionaire afwegingen bij de keuze van de biosynthetische route. Proc. Natl Acad. Wetenschap. VS 115, 11339–11344 (2018).

Joback, K. G. & Reid, R. C. Schatting van eigenschappen van pure componenten uit groepsbijdragen. Chem. Ing. gemeenschappelijk 57, 233–243 (1987).

Márquez-Jurado, S. et al. Mitochondriale niveaus bepalen de variabiliteit in celdood door apoptotische genexpressie te moduleren. nat. gemeenschappelijk. 9, (2018).

Dolgin, E. Hoe geheime gesprekken in cellen de biologie transformeren. Natuur 567, 162–164 (2019).

Stepansky, A. & Leustek, T. Histidine biosynthese in planten. Aminozuren 30, 127–142 (2006).

Ingle, R. A. Histidine-biosynthese. Arabier. B 9, e0141 (2012).

Ohta, D. et al. Moleculaire klonering en karakterisering van ATP-fosforibosyltransferase van Arabidopsis, een sleutelenzym in de biosyntheseroute van histidine. Planten Fysiol. 122, 907–914 (2002).

Chubukov, V. et al. Engineering glucosemetabolisme van Escherichia coli onder stikstofgebrek. npj Syst. Biol. Appl 3, 1–7 (2017).

Ninfa, A. J. & Jiang, P. PII signaaltransductie-eiwitten: sensoren van α-ketoglutaraat die het stikstofmetabolisme reguleren. Curr. Opin. microbiologisch. 8, 168–173 (2005).

Tan, J., Zuñiga, C. & Zengler, K. Ontrafelen van interacties in microbiële gemeenschappen - van co-culturen tot microbiomen. J. Microbiol. 53, 295–305 (2015).

Chia, P.Z.C., Ramdzan, Y.M., Houghton, F.J., Hatters, D.M. & Gleeson, P.A. Kwantificering met hoge doorvoer van intracellulair verkeer en verstoring van organellen door flowcytometrie. Verkeer 15, 572–582 (2014).

Tan, H.W.S., Sim, A.Y.L. & Long, Y.C. Glutaminemetabolisme reguleert autofagie-afhankelijke mTORC1-reactivering tijdens aminozuuruithongering. nat. gemeenschappelijk 8, 338 (2017).

Stevens, S.E., Balkwill, D.L. & Paone, D.A.M. De effecten van stikstofbeperking op de ultrastructuur van de cyanobacterie Agmenellum quadruplicatum. Boog. microbiologisch. 130, 204–212 (1981).

Sauer, J., Schreiber, U., Schmid, R., Völker, U. & Forchhammer, K. Door stikstof veroorzaakte chlorose in Synechococcus PCC 7942. Fotosynthese op laag niveau als een mechanisme voor overleving op lange termijn. Planten Fysiol. 126, 233–243 (2001).

Santos, C. et al. Oorsprong van fractionele controle bij gereguleerde celdood. BioRxiv 1–26 (2017).

Cabodevilla, A.G. et al. De overleving van cellen tijdens volledige ontbering van nutriënten hangt af van door lipidedruppels gevoede β-oxidatie van vetzuren. J. Biol. Chem. 288, 27777–27788 (2013).

Heirendt, L. et al. Creatie en analyse van op biochemische beperkingen gebaseerde modellen met behulp van de COBRA Toolbox v.3.0. nat. Protoc. 14, 639–702 (2019).

King, Z.A. et al. Escher: Een webapplicatie voor het bouwen, delen en inbedden van datarijke visualisaties van biologische paden. PLoS-computer. Biol. 11, 1–13 (2015).

Regel, A. et al. Tien eenvoudige regels voor het schrijven en delen van computationele analyses in Jupyter Notebooks. PLOS-computer. Biol. 15, e1007007 (2019).

Lachance, J.-C. et al. BOFdat: genereren van stoichiometrische coëfficiënten voor biomassa-objectieve functies uit experimentele gegevens. bioRxiv https://doi.org/10.1101/243881 (2018).

Armingol, E., Tobar, E. & Cabrera, R. Inzicht in de impact van de cofactor-swapping van isocitraatdehydrogenase op het groeifenotype van Escherichia coli op acetaat met behulp van op beperkingen gebaseerde modellering. PLoS ONE 1–21 (2018).

Karp, P.D. et al. De BioCyc-verzameling van microbiële genomen en metabole routes. Kort. Bio-informatie. https://doi.org/10.1093/bib/bbx085 (2017).


CONTROLE VAN BIOLOGISCHE STIKSTOFFIXATIE

De eigenschappen van stammen van Klebsiella pnuemoniae-stam M5a1 die stikstofase-activiteit produceren, zelfs in de aanwezigheid van 15 mM NH4 + worden gepresenteerd. Deze stammen die ofwel glutamaat ofwel glutamine nodig hebben, blijken grote hoeveelheden vast N . te exporteren2 als NH4 + . Deze informatie wordt gebruikt om de fysiologische eigenschappen van Rhizobium sp. Rhizobium sp. ‘Cowpea’ stam 32H1 en R. japonicum stam CB 1809 bleken 80% en 94% van de N2 gefixeerd in het medium, met behulp van 15 N-analyse. Diverse Rhizobium sp. bleken niet in staat NH . te gebruiken4 + als een belangrijke bron van stikstof in de aanwezigheid van glutamaat in het meidum. Op basis van deze resultaten is een model voor symbiotische N2 fixatie wordt aangeboden. Het model stelt voor dat glutamaat geleverd door de plantencel de assimilatie van gefixeerde N . voorkomt2 (als NH4 + ) in bacterieel celmateriaal en vervolgens geëxporteerd naar de plantenfractie waar het wordt geassimileerd tot het niveau van aminozuren en uit de knobbel wordt getransporteerd. Het mogelijke gebruik van NH4 + -exporterende stammen van Azolla-Anabaena, in de rijstteelt komen ook aan bod.


Invoering

Stikstoffixatie, de omzetting van distikstofgas in biologisch beschikbare stikstof, wordt uitgevoerd door diverse prokaryoten die diazotrofen worden genoemd. Het speelt een fundamentele rol bij het handhaven van de productiviteit van aquatische en terrestrische omgevingen, zowel lokaal als wereldwijd. De ontwikkeling van kwantitatieve, mechanistische modellen waarmee de biogeografie en snelheid van stikstoffixatie en hun relatie tot omgevingsfactoren kunnen worden geïnterpreteerd en voorspellen, is een belangrijke uitdaging voor koolstofcyclus- en klimaatmodellering [1-4].

Diazotrofie in aanwezigheid van vaste stikstof

Het vermogen om stikstof te fixeren biedt een duidelijk ecologisch voordeel in oligotrofe omgevingen waar stikstof beperkend is. Dit gaat ten koste van een lagere groei-efficiëntie dan een organisme dat vaste stikstof gebruikt [5] vanwege de directe kosten van het verminderen van N2 evenals de indirecte kosten van het beheer van intracellulaire zuurstof, die stikstofase deactiveert [6-10]. Strategieën om zuurstof te beheren omvatten verbeterde ademhaling [7,11–13], gespecialiseerde heterocystcellen en (in foto-autotrofe diazotrofen) tijdelijke scheiding van stikstof en koolstoffixatie [14-17]. De aanwezigheid van gereduceerde stikstof heeft ook gevolgen voor de stikstofbinding. Enerzijds bieden ammonium of nitraat een “goedkopere” stikstofbron voor een organisme [18] en kan de aanwezigheid van gefixeerde stikstof de stikstofbinding remmen [19,20]. On the other hand, there is significant evidence showing that diazotrophs can and do often use both fixed nitrogen and dinitrogen [21].

Uptake of ammonium reduces the cell’s electron potential, which may inhibit the flow of reducing equivalents to nitrogenase [19]. High intracellular concentrations of ammonium have been observed to cause downregulation of nif genes and decrease synthesis of the nitrogenase complex [20], presumably because preferential consumption of fixed nitrogen leads to a more efficient growth. Despite this, active nitrogen fixation is observed in pelagic, mesopelagic and benthic marine environments where fixed nitrogen is present [21–23] and in marine waters, shelf-sediments and salt marshes where it is abundant [21,24–30]. In an extensive review [21], compiled evidence from diverse marine environments showing that, while sustained high concentrations of fixed nitrogen lead to the suppression of N2 fixation, it does not always exclude it. In benthic environments, nitrogen fixation occurs at significant rates at fixed-nitrogen concentrations exceeding 100 μM [31]. Nitrogen fixing organisms do utilize fixed nitrogen sources. Bijvoorbeeld, Trichodesmium, a marine, phototrophic diazotroph has been shown to assimilate nitrate in laboratory studies [21,32,33] and heterotrohic diazotrophs are seen to switch between, or simultaneously use, both dinitrogen and ammonium [32,34,35].

Significance for ecological and biogeochemical models

Major current models of nitrogen fixation in the marine environment assumes that diazotrophs never utilize fixed nitrogen [36–39]. The ability to use fixed nitrogen extends the viable range for nitrogen fixation beyond highly nitrogen starved environments. It is observed to occur in nature, related to the availability of other substrates including phosphorus and organic carbon [21]. In order to appropriately capture the flexible nitrogen use of diazotrophs in ecological and biogeochemical models, enabling accurate evaluations of the biogeography and integrated rates of nitrogen fixation, we need a framework to predict when it is advantageous to a cell to fix nitrogen, use fixed nitrogen, or a combination of both.

As a step towards developing a quantitative, prognostic framework for modeling nitrogen fixation in diverse environments, here we bring together a quantitative model of the nitrogen fixing bacterium Azotobacter vinelandii [40] and published data from laboratory studies [34,41] in which it was grown in continuous culture with a sucrose and ammonium-based medium. We choose to develop the model around this system because Azotobacter vinelandii is a well-studied model organism (studied over a century [42]) and because the laboratory studies [34,41] are sufficient to quantitatively test and constrain a dynamic model of an organism using both N2 and ammonium under a variety of environmental conditions.

Key findings from laboratory studies

In the laboratory, the expression and rate of nitrogen fixation by the heterotrophic diazotroph Azotobacter vinelandii were examined as a function of relative rates of supply of organic carbon and fixed nitrogen [34]. They quantified this by the molar ratio of sucrose to ammonium in the incoming medium, C/N, where C/N = 1 is equivalent to the elemental ratio C:N = 12 (Table 1). Below a threshold C/N, nitrogen fixation was absent. Above the threshold, nitrogen fixation occurred at a rate which increased with C/N and eventually saturated (Fig 1). The threshold C/N increased and the nitrogen fixation rate decreased as the oxygen concentration increased [34,41]. Below the threshold, the organism’s sole nitrogen source was ammonium. At higher C/N, carbon in excess of the requirements to assimilate the NH4 + was used to deplete intra-cellular oxygen and fuel nitrogen fixation.

Dilution rate is 0.15 (h -1 ) with constant ammonium supply of 0.375 mol m -3 h -1 . Here 100% O2 equals 225 μM thus approximately O2 saturation under normal air composition at 30°C. Points are data redrawn from [34] “+” based on acetylene reduction and “×”based on the rate of total nitrogen incorporation [34].

They are listed roughly in the order of appearance.

The aim of this study is to develop and apply a framework for interpreting and quantifying the cost and rates of nitrogen fixation in the presence of fixed nitrogen. In the Methods section we describe the modeling framework further details are given in the supplementary material. In the Results section we simulate and interpret the nitrogen assimilation strategy of the heterotrophic diazotroph Azotobacter vinelandii under a variety of environmental conditions. In the Discussion, we discuss the implications for the conditions under which heterotrophic nitrogen fixation may be viable in real world environments.


Zie ook

  1. ^ eenBCNSe Postgate, J (1998). Nitrogen Fixation, 3rd Edition. Cambridge University Press, Cambridge UK.  
  2. ^ Slosson, Edwin (1919). Creative Chemistry. New York: The Century Co.. pp.㺓–37.  
  3. ^http://helios.bto.ed.ac.uk/bto/microbes/nitrogen.htm
  4. ^ Moir, JWB (editor) (2011). Nitrogen cycling in bacteria: Molecular analysis. Caister Academic Press. ISBN𧓒-1-904455-86-8.  
  5. ^ "The evolution of nitrogen fixation in cyanobacteria" N. Latysheva, V.L. Junker, W.J. Palmer, G.A. Codd and D. Barker Bioinformatics 2012: 28(5) pp 603-606 (Article) doi:10.1093/bioinformatics/bts008
  6. ^ Herrero A and Flores E (editor). (2008). The Cyanobacteria: Molecular Biology, Genomics and Evolution (1e ed.). Caister Academic Press. ISBN𧓒-1-904455-15-8. [1] . http://www.horizonpress.com/cyan .  
  7. ^ Smil, V (2000). Cycles of Life. Scientific American Library.  
  8. ^ Elkan, Daniel. Slash-and-burn farming has become a major threat to the world's rainforestThe Guardian 21 April 2004
  9. ^ Op den Camp, Rik et al.. "LysM-Type Mycorrhizal Receptor Recruited for Rhizobium Symbiosis in Nonlegume Parasponia". Wetenschap331 (6019): 909–912. DOI:10.1126/science.1198181.  
  10. ^ Dawson, J. O. (2008). "Ecology of actinorhizal plants". Nitrogen-fixing Actinorhizal Symbioses. 6. springer. pp.𧇇–234. DOI:10.1007/978-1-4020-3547-0_8.  
  11. ^http://www.epa.gov/watertrain/nitroabstr.html US Enivronmental Protection Agency: Human Alteration of the Global Nitrogen Cycle: Causes and Consequences by Peter M. Vitousek, Chair, John Aber, Robert W. Howarth, Gene E. Likens, Pamela A. Matson, David W. Schindler, William H. Schlesinger, and G. David Tilman
  12. ^ A. D. Allen, C. V. Senoff (1965). "Nitrogenopentammineruthenium(II) complexes". Journal of the Chemical Society, Chemical Communications (24): 621. DOI:10.1039/C19650000621.  
  13. ^Catalytic reduction of molecular nitrogen in solutions A.E. Shilov Russian Chemical Bulletin Volume 52, Number 12, 2555-2562, doi:10.1023/B:RUCB.0000019873.81002.60
  14. ^Reduction of dinitrogen Richard R. Schrock PNAS November 14, 2006 vol. 103 no. 46 17087 doi:10.1073/pnas.0603633103
  15. ^Dinitrogen Cleavage by a Three-Coordinate Molybdenum(III) Complex Catalina E. Laplaza and Christopher C. Cummins Science 12 May 1995: 861-863.10.1126/science.268.5212.861
  16. ^A Cycle for Organic Nitrile Synthesis via Dinitrogen Cleavage John J. Curley, Emma L. Sceats, and Christopher C. Cummins J. Am. Chem. Soc., 2006, 128 (43), pp 14036–14037 doi:10.1021/ja066090a
  17. ^ C. J. Pickett, "The Chatt Cycle and the Mechanism of Enzymic Reduction of Molecular Nitrogen", J. Biol. Inorg. Chem. 1996 1, 601-606.
  18. ^Synthesis and Reactions of Molybdenum Triamidoamine Complexes Containing Hexaisopropylterphenyl Substituents Dmitry V. Yandulov, Richard R. Schrock, Arnold L. Rheingold, Christopher Ceccarelli, and William M. Davis Inorg. Chem. 2003 42(3) pp 796–813 (Article) doi:10.1021/ic020505l
  19. ^Catalytic Reduction of Dinitrogen to Ammonia at a Single Molybdenum Center Dmitry V. Yandulov and Richard R. Schrock Science 4 July 2003: Vol. 301. no. 5629, pp. 76–78 doi:10.1126/science.1085326
  20. ^ The catalyst is based on molybdenum(V) chloride and tris(2-aminoethyl)amine substituted with three very bulky hexa-isopropylterphenyl (HIPT) groups. Nitrogen adds end-on to the molybdenum atom, and the bulky HIPT substituents prevent the formation of the stable and nonreactive Mo-N=N-Mo dimer, and the nitrogen is reduced in an isolated pocket. The proton donor is a pyridinium cation, which is accompanied by a tetraborate counter ion. The reducing agent is decamethylchromocene. All ammonia formed is collected as the HCl salt by trapping the distillate with a HCl solution
  21. ^ Note also that, although the dinitrogen complex is shown in brackets, this species can be isolated and characterized. Here the brackets do not indicate that the intermediate is not observed.
  22. ^ Kazuya Arashiba, Yoshihiro Miyake Yoshiaki Nishibayashi A molybdenum complex bearing PNP-type pincer ligands leads to the catalytic reduction of dinitrogen into ammonia Nature Chemistry Volume: 3, Pages: 120–125 Year published:(2011) doi:10.1038/nchem.906


Bekijk de video: Die Heterotrophe Ernaehurng - Die Biologie - - عبد الله رضا MD (November 2021).