Informatie

Unit 26: Bacterieel onderzoek van water- meervoudige buistest, standaard plaattelling en membraanfiltertechniek - biologie


Unit 26: Bacterieel onderzoek van water- meervoudige buistest, standaard plaattelling en membraanfiltertechniek

Nalevingsgids voor kleine entiteiten: gebotteld water en totaal coliform en E. coli maart 2010

Deze leidraad vertegenwoordigt de huidige denkwijze van de Food and Drug Administration (FDA) over dit onderwerp. Het creëert of verleent geen rechten voor of aan een persoon en werkt niet om de FDA of het publiek te binden. U kunt een alternatieve aanpak gebruiken als de aanpak voldoet aan de eisen van de geldende wet- en regelgeving.

I. inleiding

Op 29 mei 2009 publiceerde de FDA een definitieve regel (74 FR 25651) die de kwaliteitsvoorschriften voor flessenwater (21 CFR deel 165) wijzigde door de bepaling voor microbiologische kwaliteit te herzien om te vereisen dat als Escherichia coli (E coli) aanwezig is in flessenwater, wordt het flessenwater als vervalst beschouwd. De FDA heeft ook haar huidige CGMP-voorschriften (good manufacturing practice) voor de verwerking en het bottelen van gebotteld drinkwater (21 CFR part 129) (de CGMP-verordening voor gebotteld water) gewijzigd om (1) te bepalen dat bronwater dat E. coli bevat niet wordt overwogen om van een veilige, sanitaire kwaliteit te zijn en het gebruik bij de productie van flessenwater wordt verboden (2) de microbiologische testvereisten voor afgewerkte waterproducten in flessen en voor bronwater van een ander dan een openbaar watersysteem (PWS) te herzien en (3 ) nieuwe eisen invoeren voor corrigerende maatregelen en het bijhouden van gegevens. Volgens deze nieuwe vereisten moeten fabrikanten van flessenwater (bottelaars) die hun bronwater van een ander dan een PWS verkrijgen, hun bronwater minstens wekelijks testen op totaal coliform. Als er coliforme organismen worden aangetroffen in bronwater, moeten bottelaars vervolgtesten uitvoeren om te bepalen of een van de coliforme organismen E coli. Voordat bottelaars bronwater kunnen gebruiken van een bron die positief is getest op: E coli, moeten zij passende maatregelen nemen om de oorzaak van E coli verontreiniging van die bron en houdt een register bij van dergelijke acties. Als er coliforme organismen worden gedetecteerd bij wekelijkse totale coliformtests van afgewerkte waterproducten in flessen, moeten bottelaars ook vervolgtesten uitvoeren om te bepalen of een van de coliforme organismen E coli. De ingangsdatum van de definitieve regel is 1 december 2009.

FDA heeft deze Small Entity Compliance Guide opgesteld in overeenstemming met sectie 212 van de Small Business Regulatory Enforcement Fairness Act (Public Law 104-121). Dit richtsnoer herhaalt in duidelijke taal de wettelijke vereisten van de definitieve regel van 29 mei 2009 uiteengezet in 21 CFR 129 en 165 met betrekking tot de totale hoeveelheid coliforme en E coli. Dit reglement is bindend en heeft de volle kracht en werking van de wet.

De richtlijnen van de FDA, inclusief deze richtlijnen, leggen geen wettelijk afdwingbare verantwoordelijkheden vast. In plaats daarvan beschrijven richtlijnen de huidige denkwijze van het Agentschap over een onderwerp en dienen ze alleen als aanbevelingen te worden beschouwd, tenzij specifieke regelgevende of wettelijke vereisten worden genoemd. Het gebruik van het woord moet in de richtlijnen van het Agentschap betekent dat iets wordt gesuggereerd of aanbevolen, maar niet vereist.

II. Achtergrond

Krachtens sectie 410(b)(1) van de Federal Food, Drug, and Cosmetic Act (de FD&C Act), niet later dan 180 dagen voor de ingangsdatum van een National Primary Drinking Water Regulation uitgegeven door de Environmental Protection Agency (EPA) voor een verontreinigende stof op grond van sectie 1412 van de Safe Drinking Water Act, is de FDA verplicht om een ​​kwaliteitsnorm uit te vaardigen voor die verontreinigende stof in flessenwater of tot de conclusie te komen dat een dergelijke verordening niet nodig is om de volksgezondheid te beschermen, omdat de verontreinigende stof erin zit in water in PWS's, maar niet in water dat wordt gebruikt voor flessenwater. Bovendien vereist sectie 410(b)(3) van de FD&C Act dat de kwaliteitsnorm voor een verontreiniging in gebotteld water niet minder streng is dan het maximale verontreinigingsniveau van EPA en niet minder beschermend voor de volksgezondheid dan EPA's behandelingstechniekvereisten voor dezelfde verontreiniging.

In het Federal Register van 8 november 2006 (71 FR 65574) heeft de EPA de Ground Water Rule (GWR) gepubliceerd om te voorzien in verhoogde bescherming tegen fecale microbiële pathogenen in PWS's die grondwaterbronnen gebruiken (ook wel grondwatersystemen genoemd ( GWS'en)). De EPA heeft behandelingstechnieken vastgesteld die bedoeld zijn om GWS'en die vatbaar zijn voor fecale contaminatie te identificeren en aan te pakken, en vereisen dat dergelijke GWS's worden gecontroleerd en, indien nodig, corrigerende maatregelen nemen om dergelijke contaminatie te voorkomen of te verwijderen. In de regel identificeerde EPA E coli als een indicator van fecale besmetting. EPA identificeerde ook passende corrigerende maatregelen, nalevingsbewaking en openbare kennisgevingsvereisten. EPA heeft de GWR uitgegeven om de volksgezondheid te beschermen, omdat sommige GWS's het risico lopen water te leveren dat schadelijke microbiële pathogenen bevat door fecale besmetting. Inname van verontreinigd water kan leiden tot milde en zelfbeperkende gastro-intestinale ziekten, of meer ernstige en mogelijk dodelijke ziekten.

Als reactie op deze EPA-regelgeving heeft de FDA de definitieve regel van 29 mei 2009 gepubliceerd. Deze laatste regel zorgt ervoor dat de FDA-normen voor de minimale kwaliteit van gebotteld water, zoals beïnvloed door fecale besmetting, de volksgezondheid niet minder beschermen dan die welke door EPA zijn vastgesteld voor openbaar drinkwater.

III. Vragen en antwoorden

  1. Welk microbiologisch onderzoek moet worden uitgevoerd op bronwater dat is verkregen van een ander dan een PWS?


Bepaling van de drinkbaarheid van water | Watermicrobiologie

Coliform-test-techniek (of MTFT) is een standaardmethode die over de hele wereld wordt gevolgd om te bepalen of het water drinkbaar of fecaal vervuild is. De techniek omvat drie opeenvolgende stappen, namelijk de vermoedelijke test, de bevestigde test en de voltooide test.

In de vermoedelijke test worden lactose-bouillonbuizen geënt met drie verschillende watervolumes om een ​​schatting te geven van het meest waarschijnlijke aantal (MPN) coli-vormen in water.

Buisjes die positief zijn voor gasproductie worden in de bevestigde test geïnoculeerd in briljante groene lactosegalbouillon, en positieve buisjes worden gebruikt om de meest waarschijnlijke getalswaarde (MPN) te berekenen. De aanwezigheid van coliforme bacteriën in watermonsters wordt vastgesteld in voltooide tests. Een algemeen schema van coliform-testtechniek wordt gepresenteerd in Fig. 31.2.

2. Membraan-filter-techniek:

Deze techniek die wordt gebruikt voor bacteriologisch onderzoek van water om de drinkbaarheid ervan te bepalen, werd ontwikkeld in Duitsland tijdens de Tweede Wereldoorlog en wordt momenteel als voordelig beschouwd boven de coliform-testtechniek vanwege de aanzienlijke voordelen ervan.

Bij deze techniek wordt een dunne membraanfilterschijf gebruikt. De filterschijf bestaat uit cellulosederivaten en kan alle bacteriën uit het watermonster op het oppervlak vasthouden. Het water wordt gefilterd door een filterschijf en de schijf wordt vervolgens met een steriele pincet overgebracht op een dun absorberend kussentje dat eerder is verzadigd met het juiste medium (meestal Endo-bouillon [GM-9] medium) en ondergebracht in een Petri gerecht.

De petrischaal met absorberend kussentje en filterschijfje wordt 18-24 uur bij 37°C geïncubeerd. Het medium diffundeert door de poriën van de filterschijf en levert voedingsstoffen aan de bacteriën. Nadat de incubatie voorbij is, kan men kolonies zien ontwikkelen op de filterschijf. De karakteristieke kolonies van verschillende bacteriën konden nu worden bestudeerd om de drinkbaarheid van water te bepalen.

(i) Een grote hoeveelheid water kan in korte tijd zonder veel kosten worden geanalyseerd.

(ii) De membraanfilterschijf kan van het ene medium naar het andere worden overgebracht om organismen te differentiëren.

(iii) Kwantitatieve schattingen van bepaalde bacteriële typen, bijvoorbeeld coliformen, kunnen worden gedaan met behulp van geschikte selectieve media, zelfs wanneer de betreffende bacteriële typen in kleine aantallen aanwezig zijn.

(iv) Deze techniek vereist veel minder apparatuur en kan daarom direct in het veld worden gebruikt.

(i) Wateren met een hoge troebelheid beperken het bemonsterde volume.

(ii) Een hoge populatie van achtergrondbacteriën resulteert in overgroei.

(iii) Metalen en fenolische verbindingen kunnen door filters worden geabsorbeerd en groei remmen.


Bekijk de video: Isolation of bacterial colonies (Januari- 2022).