Informatie

2.6: Membraanproteïnen - Biologie


Kan iets of alles de cel in of uit gaan?

Nee. Het is het semipermeabele plasmamembraan dat bepaalt wat de cel kan binnenkomen en verlaten. Dus, als niet alles het membraan kan passeren, hoe komen bepaalde dingen dan over?

Membraan Eiwitten

Het plasmamembraan bevat andere moleculen dan fosfolipiden, voornamelijk andere lipiden en eiwitten. De groene moleculen in Figuur hieronder staan ​​bijvoorbeeld de lipide cholesterol. Moleculen van cholesterol helpen het plasmamembraan zijn vorm te behouden. Veel van de eiwitten in het plasmamembraan helpen andere stoffen bij het passeren van het membraan.

De plasmamembranen bevatten ook bepaalde soorten eiwitten. EEN membraan eiwit is een eiwitmolecuul dat is bevestigd aan, of is geassocieerd met, het membraan van een cel of een organel. Membraaneiwitten kunnen in twee groepen worden ingedeeld op basis van hoe het eiwit is geassocieerd met het membraan.

Integrale membraaneiwitten zijn permanent ingebed in het plasmamembraan. Ze hebben een aantal belangrijke functies. Dergelijke functies omvatten het kanaliseren of transporteren van moleculen door het membraan. Andere integrale eiwitten werken als celreceptoren. Integrale membraaneiwitten kunnen worden ingedeeld op basis van hun relatie met de dubbellaag:

  • Transmembraaneiwitten overspannen het gehele plasmamembraan. Transmembraaneiwitten komen voor in alle soorten biologische membranen.
  • Integrale monotope eiwitten zijn vanaf slechts één kant permanent aan het membraan gehecht.

Sommige integrale membraaneiwitten zijn verantwoordelijk voor celadhesie (kleven van een cel aan een andere cel of oppervlak). Aan de buitenkant van celmembranen en bevestigd aan sommige eiwitten bevinden zich koolhydraatketens die fungeren als labels die het celtype identificeren. Getoond in Figuur hieronder zijn twee verschillende soorten membraaneiwitten en bijbehorende moleculen.

Perifere membraaneiwitten zijn eiwitten die slechts tijdelijk met het membraan zijn geassocieerd. Ze kunnen gemakkelijk worden verwijderd, waardoor ze betrokken kunnen zijn bij celsignalering. Perifere eiwitten kunnen ook worden gehecht aan integrale membraaneiwitten, of ze kunnen zelf in een klein deel van de lipidedubbellaag blijven plakken. Perifere membraaneiwitten worden vaak geassocieerd met ionkanalen en transmembraanreceptoren. De meeste perifere membraaneiwitten zijn hydrofiel.

Sommige membraaneiwitten vormen een belangrijk transportsysteem dat moleculen en ionen door de polaire fosfolipidedubbellaag beweegt.

Het vloeibare mozaïekmodel

In 1972 S. J. Singer en G.L. Nicolson stelden het nu algemeen aanvaarde voor Vloeibaar Mozaïek Modelvan de structuur van celmembranen. Het model stelt voor dat integrale membraaneiwitten zijn ingebed in de fosfolipide dubbellaag, zoals te zien is in Figuur bovenstaand. Sommige van deze eiwitten strekken zich helemaal uit door de dubbellaag, en sommige slechts gedeeltelijk erover. Deze membraaneiwitten werken als transporteiwitten en receptoreiwitten.

Hun model stelde ook voor dat het membraan zich als een vloeistof gedraagt, in plaats van als een vaste stof. De eiwitten en lipiden van het membraan bewegen rond het membraan, net als boeien in water. Een dergelijke beweging veroorzaakt een constante verandering in het "mozaïekpatroon" van het plasmamembraan.

Een verdere beschrijving van het Fluid Mosaic Model kan worden bekeken op http://www.youtube.com/watch?v=Qqsf_UJcfBc (1:27).

Verlengingen van het plasmamembraan

Het plasmamembraan kan extensies hebben, zoals zweepachtige flagella of borstelachtig trilhaartjes. In eencellige organismen, zoals die getoond in Figuur hieronder kunnen de membraanverlengingen de organismen helpen bewegen. In meercellige organismen hebben de extensies andere functies. De trilhaartjes op menselijke longcellen vegen bijvoorbeeld vreemde deeltjes en slijm naar de mond en neus.

Flagella en Cilia. Cilia en flagella zijn verlengstukken van het plasmamembraan van veel cellen.

Samenvatting

  • Het plasmamembraan heeft veel eiwitten die andere stoffen helpen bij het passeren van het membraan.
  • Het Fluid Mosaic Model geeft de biologische aard van het plasmamembraan weer.
  • Cilia en flagella zijn verlengstukken van het plasmamembraan.

Meer ontdekken

Gebruik deze bronnen om de volgende vragen te beantwoorden.

Ontdek meer I

  • Celmembranen op http://johnkyrk.com/cellmembrane.html.
  1. Wat is de belangrijkste rol van veel membraaneiwitten?
  2. Hoeveel van het genetisch materiaal van een cel kan coderen voor membraaneiwitten?
  3. Wat zijn transmembraaneiwitten en wat is hun belangrijkste functie?
  4. Hoe kan een eiwit "tunnel" vormen door het membraan?
  5. Hoe kan een eiwit "kanaal" door het membraan worden gevormd?

Beoordeling

  1. Wat is het belangrijkste verschil tussen de twee belangrijkste soorten eiwitten die met het plasmamembraan zijn geassocieerd?
  2. Wat zijn twee functies van integrale membraaneiwitten?
  3. Bespreek het vloeistofmozaïekmodel.
  4. Wat zijn flagellen en trilhaartjes?

Functionele karakterisering van de YIPF-eiwitfamilie in zoogdiercellen

In deze studie voeren we een systematische karakterisering uit van de YIPF-familie van eiwitten met betrekking tot hun subcellulaire lokalisatieprofiel, membraantopologie en functionele effecten op het endomembraansysteem. YIPF-eiwitten lokaliseren voornamelijk in het Golgi-complex en kunnen worden gegroepeerd in trans-Golgi-lokaliserende YIPF's (YIPF1 en YIPF2) en cis-Golgi-lokaliserende YIPF's (YIPF3, YIPF4 en YIPF5), waarbij YIPF6 en YIPF7 een breder profiel vertonen dat overal wordt verspreid. de Golgi-stapel. YIPF-eiwitten hebben een lang oplosbaar N-terminusgebied, dat is gericht op het cytosol, gevolgd door 5 dicht op elkaar gestapelde transmembraandomeinen, en een C-uiteinde, dat is gericht op het lumen van de Golgi. De betekenis van YIPF-eiwitten voor het behoud van de morfologie van de Golgi werd getest door RNA-interferentie, waarbij een aantal specifieke morfologische veranderingen in dit organel bij hun uitputting werden onthuld. We stellen een rol voor deze familie van eiwitten voor bij het reguleren van de membraandynamiek in het endomembraansysteem.

trefwoorden: Golgi-apparaat Membraanverkeer Subcellulaire lokalisatie Transmembraaneiwitten YIPF.


Inleiding tot massaspectrometrie

Een diagram van een conventionele massaspectrometer is afgebeeld in figuur (PageIndex<1>).

Afbeelding (PageIndex<1>). Conventionele massaspectrometer 2

Zoals getoond, bestaat de massaspectrometer uit een monsterinvoer, een ionisatiekamer, versneller, defector, detector en een versterker. In het kort wordt het betreffende monster geïnjecteerd in de massaspecificatie en geïoniseerd om geladen deeltjes te vormen. De geladen deeltjes worden vervolgens versneld door de kinetische energie van de deeltjes te verhogen. Zoals te zien is in de figuur, zijn er drie platen met spleten in het versnellingsgebied. Deze platen variëren allemaal in potentiaal, waardoor de deeltjes in kinetische energie kunnen toenemen en een fijn afgestemde bundel kunnen vormen als ze door elke spleet gaan. Deze straal bestaat uit een mengsel van verschillende ionen voordat deze de deflector raakt. De deflector neemt dit mengsel en scheidt de ionen op basis van massa tot ladingsverhouding (m/z) dit wordt gedaan door een magnetisch veld aan te leggen. Figuur (PageIndex<2>) geeft een diagram weer van wat er in de deflector gebeurt.

Afbeelding (PageIndex<2>). Deflector van een massaspectrometer

Verschillende ionen werken verschillend samen met het magnetische veld. In figuur (PageIndex<2>) bijvoorbeeld zijn de ionen van stoom B ionen met een lage m/z-verhouding. Dit betekent dat de ionen waaruit deze bundel bestaat ofwel een lage massa of een hoge lading hebben, of beide. Aan de andere kant hebben ionen uit stroom C nauwelijks interactie met het aangelegde magnetische veld, wat betekent dat ze een hoge m/z-verhouding hebben. De ionen in stoom B hebben echter een zodanige interactie met het magnetische veld dat de ionen door de detector gaan. Het magnetische veld kan worden gewijzigd om een ​​gewenst m/z-bereik te selecteren. Als men bijvoorbeeld de hogere massabereiken (stoom C) zou willen detecteren, zou het magnetische veld groter moeten zijn om de ionen meer af te buigen. De vergelijkingen 1 (Lorentzkracht) en 2 (de tweede bewegingswet van Newton) zijn cruciaal om te begrijpen hoe partiëlen bewegen in een elektrisch of magnetisch veld.

Waar (Q) de ionlading is, is (F) de kracht die op het ion wordt uitgeoefend, (v imes B) is het uitwendig product van de snelheid en het magnetische veld, (m) is de massa en a is de versnelling.

Het gelijkstellen van de twee vergelijkingen geeft dan het volgende differentiaal (Vergelijking ef<3>)

Zodra de geselecteerde ionen de deflector passeren, reizen de ionen naar een detector waar m/z wordt geregistreerd. Kortom, wanneer de ionen de metaaldetector raken, wordt een stroom van de beweging van elektronen geproduceerd die vervolgens als een signaal kan worden geregistreerd. Omdat de elektronen die door deze botsing worden beïnvloed meestal zeer klein zijn, is versterking van het signaal bijna altijd nodig. Ionen in de gasfase zijn doorgaans zeer reactief en hebben een korte levensduur. Het is daarom belangrijk dat het instrument in hoog vacuüm werkt (meestal van 10 &min3&thinsp torr tot 10 &minus6 &thinsptorr-druk).

Er zijn verschillende massaspectrometers in de handel verkrijgbaar die zijn afgestemd op verschillende behoeften, zoals kwantificering van gegevens, kwalificerende gegevens, analyse van eiwitmonsters, analyse van kleine monsters, enz. Ionisatietechnieken zijn van cruciaal belang geweest om te bepalen welke soorten monsters kunnen worden geanalyseerd met massaspectrometrie. 3

Voordat we ingaan op de verschillende ionisatiemethoden, is het belangrijk om twee hoofdcategorieën te begrijpen waaronder ionisatie valt, harde en zachte ionisatie. 4

  1. Harde ionisatie- harde ionisatie roept grotere hoeveelheden energie op voor het monster van belang om het monster te ioniseren. Door de grotere hoeveelheid energie hebben de bindingen in het molecuul de neiging om meer te breken, wat resulteert in een toename van fragmentatie. Harde ionisatietechnieken leveren typisch een groter aantal fragmenten met een lagere massa op in tegenstelling tot hogere massa.
  2. Zachte ionisatie- Zachte ionisatiemethoden gebruiken kleinere hoeveelheden energie om het monster te ioniseren, waardoor de fragmentatie afneemt. Deze techniek levert een grotere hoeveelheid fragmenten met een hoge massa op.

Inhoud

Asymmetrie Bewerken

De lipide dubbellaag bestaat uit twee lagen: een buitenste blaadje en een binnenste blaadje. [1] De componenten van dubbellagen zijn ongelijk verdeeld tussen de twee oppervlakken om asymmetrie tussen de buiten- en binnenoppervlakken te creëren. [2] Deze asymmetrische organisatie is belangrijk voor celfuncties zoals celsignalering. [3] De asymmetrie van het biologische membraan weerspiegelt de verschillende functies van de twee blaadjes van het membraan. [4] Zoals te zien is in het vloeistofmembraanmodel van de fosfolipidedubbellaag, zijn het buitenste en binnenste blad van het membraan asymmetrisch van samenstelling. Bepaalde eiwitten en lipiden rusten alleen op het ene oppervlak van het membraan en niet op het andere.

• Zowel het plasmamembraan als de interne membranen hebben cytosolische en exoplasmatische vlakken. • Deze oriëntatie blijft behouden tijdens membraantransport – eiwitten, lipiden, glycoconjugaten die naar het lumen van het ER en Golgi gericht zijn, komen tot expressie aan de extracellulaire kant van het plasmamembraan. In eukaryote cellen worden nieuwe fosfolipiden geproduceerd door enzymen die zijn gebonden aan het deel van het endoplasmatisch reticulummembraan dat tegenover het cytosol ligt. [5] Deze enzymen, die vrije vetzuren als substraat gebruiken, zetten alle nieuw gemaakte fosfolipiden af ​​in de cytosolische helft van de dubbellaag. Om het membraan als geheel gelijkmatig te laten groeien, moet dan de helft van de nieuwe fosfolipidemoleculen worden overgebracht naar de tegenoverliggende monolaag. Deze overdracht wordt gekatalyseerd door enzymen die flippasen worden genoemd. In het plasmamembraan brengen flippasen selectief specifieke fosfolipiden over, zodat verschillende typen in elke monolaag worden geconcentreerd. [5]

Het gebruik van selectieve flippasen is echter niet de enige manier om asymmetrie in lipidedubbellagen te produceren. In het bijzonder werkt een ander mechanisme voor glycolipiden - de lipiden die de meest opvallende en consistente asymmetrische verdeling in dierlijke cellen vertonen. [5]

Lipiden Bewerken

Het biologische membraan bestaat uit lipiden met hydrofobe staarten en hydrofiele koppen. [6] De hydrofobe staarten zijn koolwaterstofstaarten waarvan de lengte en verzadiging belangrijk zijn bij het karakteriseren van de cel. [7] Lipide-vlotten komen voor wanneer lipidensoorten en eiwitten aggregeren in domeinen in het membraan. Deze helpen bij het organiseren van membraancomponenten in gelokaliseerde gebieden die betrokken zijn bij specifieke processen, zoals signaaltransductie.

Rode bloedcellen, of erytrocyten, hebben een unieke lipidensamenstelling. De dubbellaag van rode bloedcellen bestaat uit cholesterol en fosfolipiden in gelijke gewichtsverhoudingen. [7] Erytrocytmembraan speelt een cruciale rol bij de bloedstolling. In de dubbellaag van rode bloedcellen zit fosfatidylserine. [8] Dit is meestal aan de cytoplasmatische kant van het membraan. Het wordt echter omgedraaid naar het buitenmembraan om te worden gebruikt tijdens de bloedstolling. [8]

Eiwitten Bewerken

Fosfolipide dubbellagen bevatten verschillende eiwitten. Deze membraaneiwitten hebben verschillende functies en kenmerken en katalyseren verschillende chemische reacties. Integrale eiwitten omspannen de membranen met aan weerszijden verschillende domeinen. [6] Integrale eiwitten hebben een sterke associatie met de lipidedubbellaag en kunnen niet gemakkelijk losraken. [9] Ze zullen alleen dissociëren met een chemische behandeling die het membraan breekt. Perifere eiwitten zijn anders dan integrale eiwitten omdat ze zwakke interacties hebben met het oppervlak van de dubbellaag en gemakkelijk kunnen worden losgekoppeld van het membraan. [6] Perifere eiwitten bevinden zich op slechts één zijde van een membraan en creëren membraanasymmetrie.

ENKELE VOORBEELDEN VAN PLASMA MEMBRAAN EIWITTEN EN HUN FUNCTIES
FUNCTIONELE KLASSE VOORBEELD EIWIT SPECIFIEKE FUNCTIE
Transporters Na+ Pomp pompt actief Na+ uit cellen en K+ in
Ankers integrines koppelen intracellulaire actinefilamenten aan extracellulaire matrixeiwitten
receptoren van bloedplaatjes afgeleide groeifactorreceptor bindt extracellulair PDGF en genereert als gevolg daarvan intracellulaire signalen die de cel doen groeien en delen
Enzymen adenylylcyclase katalyseert de productie van intracellulair signaalmolecuul cyclisch AMP als reactie op extracellulaire signalen

Oligosachariden Bewerken

Oligosachariden zijn suikerhoudende polymeren. In het membraan kunnen ze covalent worden gebonden aan lipiden om glycolipiden te vormen of covalent gebonden aan eiwitten om glycoproteïnen te vormen. Membranen bevatten suikerbevattende lipidemoleculen die bekend staan ​​als glycolipiden. In de dubbellaag worden de suikergroepen van glycolipiden blootgesteld aan het celoppervlak, waar ze waterstofbruggen kunnen vormen. [9] Glycolipiden zijn het meest extreme voorbeeld van asymmetrie in de lipidedubbellaag. [10] Glycolipiden vervullen een groot aantal functies in het biologische membraan die voornamelijk communicatief zijn, waaronder celherkenning en cel-celadhesie. Glycoproteïnen zijn integrale eiwitten. [2] Ze spelen een belangrijke rol in de immuunrespons en bescherming. [11]

De fosfolipide dubbellaag wordt gevormd door de aggregatie van membraanlipiden in waterige oplossingen. [4] Aggregatie wordt veroorzaakt door het hydrofobe effect, waarbij hydrofobe uiteinden met elkaar in contact komen en worden afgezonderd van water. [6] Deze opstelling maximaliseert de waterstofbinding tussen hydrofiele koppen en water, terwijl ongunstig contact tussen hydrofobe staarten en water wordt geminimaliseerd. [10] De toename van beschikbare waterstofbruggen verhoogt de entropie van het systeem, waardoor een spontaan proces ontstaat.

Biologische moleculen zijn amfifiel of amfipathisch, d.w.z. zijn tegelijkertijd hydrofoob en hydrofiel. [6] De fosfolipide dubbellaag bevat geladen hydrofiele kopgroepen, die interageren met polair water. De lagen bevatten ook hydrofobe staarten, die samenkomen met de hydrofobe staarten van de complementaire laag. De hydrofobe staarten zijn meestal vetzuren die in lengte verschillen. [10] De interacties van lipiden, vooral de hydrofobe staarten, bepalen de fysieke eigenschappen van de lipidedubbellaag, zoals vloeibaarheid.

Membranen in cellen definiëren typisch omsloten ruimten of compartimenten waarin cellen een chemische of biochemische omgeving kunnen handhaven die verschilt van de buitenkant. Het membraan rond peroxisomen beschermt bijvoorbeeld de rest van de cel tegen peroxiden, chemicaliën die giftig kunnen zijn voor de cel, en het celmembraan scheidt een cel van het omringende medium. Peroxisomen zijn een vorm van vacuole die in de cel wordt aangetroffen en die bijproducten van chemische reacties in de cel bevat. De meeste organellen worden gedefinieerd door dergelijke membranen en worden "membraangebonden" organellen genoemd.

Selectieve permeabiliteit

Waarschijnlijk het belangrijkste kenmerk van een biomembraan is dat het een selectief permeabele structuur is. Dit betekent dat de grootte, lading en andere chemische eigenschappen van de atomen en moleculen die ze proberen over te steken, zullen bepalen of ze daarin slagen. Selectieve permeabiliteit is essentieel voor een effectieve scheiding van een cel of organel van zijn omgeving. Biologische membranen hebben ook bepaalde mechanische of elastische eigenschappen waardoor ze naar behoefte van vorm kunnen veranderen en bewegen.

In het algemeen kunnen kleine hydrofobe moleculen gemakkelijk fosfolipide dubbellagen passeren door eenvoudige diffusie. [12]

Deeltjes die nodig zijn voor de celfunctie, maar niet vrij door een membraan kunnen diffunderen, komen binnen via een membraantransporteiwit of worden opgenomen door middel van endocytose, waarbij het membraan ervoor zorgt dat een vacuole erop kan aansluiten en de inhoud in de cel duwt. Veel soorten gespecialiseerde plasmamembranen kunnen de cel scheiden van de externe omgeving: apicale, basolaterale, presynaptische en postsynaptische membranen, membranen van flagella, cilia, microvillus, filopodia en lamellipodia, het sarcolemma van spiercellen, evenals gespecialiseerde myeline- en dendritische wervelkolommembranen van neuronen. Plasmamembranen kunnen ook verschillende soorten "supramembraan"-structuren vormen, zoals caveolae, postsynaptische dichtheid, podosome, invadopodium, desmosome, hemidesmosome, focale adhesie en celverbindingen. Deze typen membranen verschillen in lipide- en eiwitsamenstelling.

Verschillende soorten membranen creëren ook intracellulaire organellen: endosoom glad en ruw endoplasmatisch reticulum sarcoplasmatisch reticulum Golgi-apparaat lysosoom mitochondrion (binnen- en buitenmembraan) kern (binnen- en buitenmembraan) peroxisoom vacuole cytoplasmatische korrels celblaasjes (fagosoom, autofagosoom, clavethrine) COPI-gecoate en COPII-gecoate blaasjes) en secretoire blaasjes (inclusief synaptosoom, acrosomen, melanosomen en chromaffinekorrels). Verschillende soorten biologische membranen hebben verschillende lipide- en eiwitsamenstellingen.De inhoud van membranen bepaalt hun fysische en biologische eigenschappen. Sommige componenten van membranen spelen een sleutelrol in de geneeskunde, zoals de effluxpompen die medicijnen uit een cel pompen.

Vloeibaarheid Bewerken

De hydrofobe kern van de fosfolipide dubbellaag is constant in beweging vanwege rotaties rond de bindingen van lipidestaarten. [13] Hydrofobe staarten van een dubbellaag buigen en sluiten aan elkaar. Vanwege waterstofbinding met water vertonen de hydrofiele kopgroepen echter minder beweging omdat hun rotatie en mobiliteit beperkt zijn. [13] Dit resulteert in een toenemende viscositeit van de lipidedubbellaag dichter bij de hydrofiele koppen. [6]

Onder een overgangstemperatuur verliest een lipidedubbellaag vloeibaarheid wanneer de zeer mobiele lipiden minder beweging vertonen en een gelachtige vaste stof worden. [14] De overgangstemperatuur hangt af van componenten van de lipidedubbellaag, zoals de lengte van de koolwaterstofketen en de verzadiging van de vetzuren. Temperatuurafhankelijke vloeibaarheid vormt een belangrijk fysiologisch kenmerk voor bacteriën en koudbloedige organismen. Deze organismen behouden een constante vloeibaarheid door de vetzuursamenstelling van de membraanlipiden te wijzigen in overeenstemming met verschillende temperaturen. [6]

In dierlijke cellen wordt de vloeibaarheid van het membraan gemoduleerd door de opname van sterolcholesterol. Dit molecuul is in bijzonder grote hoeveelheden aanwezig in het plasmamembraan, waar het ongeveer 20 gew.% van de lipiden in het membraan vormt. Omdat cholesterolmoleculen kort en stijf zijn, vullen ze de ruimten tussen naburige fosfolipidemoleculen die zijn achtergelaten door de knikken in hun onverzadigde koolwaterstofstaarten. Op deze manier heeft cholesterol de neiging om de dubbellaag te verstijven, waardoor deze stijver en minder doorlaatbaar wordt. [5]

Voor alle cellen is de vloeibaarheid van het membraan om vele redenen belangrijk. Het stelt membraaneiwitten in staat om snel in het vlak van de dubbellaag te diffunderen en met elkaar te interageren, wat bijvoorbeeld cruciaal is bij celsignalering. Het zorgt ervoor dat membraanlipiden en -eiwitten kunnen diffunderen van plaatsen waar ze na hun synthese in de dubbellaag worden ingebracht naar andere regio's van de cel. Het zorgt ervoor dat membranen met elkaar kunnen versmelten en hun moleculen kunnen mengen, en het zorgt ervoor dat membraanmoleculen gelijkmatig worden verdeeld tussen dochtercellen wanneer een cel zich deelt. Als biologische membranen niet vloeibaar waren, is het moeilijk voor te stellen hoe cellen zouden kunnen leven, groeien en zich voortplanten. [5]


2.6: Membraanproteïnen - Biologie

Deel I Overzichtsinformatie

Ministerie van Volksgezondheid en Human Services

Deelnemende organisaties
Nationale gezondheidsinstituten (NIH), (http://www.nih.gov)

Onderdelen van deelnemende organisaties
Nationaal Instituut voor Algemene Medische Wetenschappen (NIGMS), (http://www.nigms.nih.gov)
Nationaal Kankerinstituut (NCI), (http://www.cancer.gov)
Nationaal Instituut voor veroudering (NIA), (http://www.nia.nih.gov)
Nationaal instituut voor doofheid en andere communicatiestoornissen (NIDCD), (http://www.nidcd.nih.gov)
Nationaal Instituut voor Diabetes, Endocrinologie en Metabole Ziekten (NIDDK), (http://www.niddk.nih.gov)
Nationaal Instituut voor Drugsmisbruik (NIDA), (http://www.nida.nih.gov)
Nationaal Instituut voor Milieugezondheidswetenschappen (NIEHS), (http://niehs.nih.gov)
National Heart, Lung, and Blood Institute (NHLBI), (http://www.nhlbi.nih.gov)

Titel: Structurele biologie van membraaneiwitten (R01)

Aankondigingstype
Dit is een heruitgave van PA-07-253.

Update: De volgende update met betrekking tot deze aankondiging is uitgegeven:

    (NOT-OD-11-007) - NIH vereist gebruik van bijgewerkte elektronische aanvraagformulieren in 2011. Adobe B1-formulieren zijn vereist voor vervaldatums op of na 8 mei 2011.
  • 16 augustus 2010 - BELANGRIJKE OPMERKING! NIH heeft de foutcorrectieperiode voor vervaldatums van 25 januari 2011 en daarna geëlimineerd. Vanaf 25 januari moeten alle correcties op de vervaldatum zijn voltooid om een ​​aanvraag op tijd in overweging te kunnen nemen. Zie NIET-OD-10-123.
  • 10/29/2010 - Het ADOBE-FORMS-B1-applicatiepakket voor deze aankondiging is aangepast om zowel gedetailleerde als modulaire budgetten op te nemen. Eerdere versies van dit aanvraagpakket die op of vóór 28-10-2010 zijn gedownload, zijn niet langer geldig. Aanvragers moeten dus het nieuwe ADOBE-FORMS-B1-aanvraagpakket downloaden (gebruik de knop 'Elektronisch subsidie ​​aanvragen' hieronder).

Vooruit kijken: Als onderdeel van de implementatie van e-Government door het Department of Health and Human Services zal de NIH elk mechanisme voor onderzoekssubsidies geleidelijk overzetten naar elektronische indiening via Grants.gov en het gebruik van de SF 424 Research and Related (R&R)-formulieren. Zie https://grants.nih.gov/grants/guide/notice-files/NOT-OD-06-035.html voor meer informatie en een eerste tijdlijn. De NIH zal elke wijziging van het subsidiemechanisme aankondigen in de NIH-gids voor subsidies en contracten (https://grants.nih.gov/grants/guide/index.html).

Programmaaankondiging (PA) Nummer: PA-10-228

Catalogus van federale binnenlandse hulpnummer(s)
93.396, 93.866, 93.173, 93.847, 93.279, 93.113, 93.859, 93.837,

Belangrijke data
Releasedatum: 9 juli 2010
Openingsdatum: 5 september 2010 (vroegste datum waarop een aanvraag kan worden ingediend bij Grants.gov)
Intentieverklaring Ontvangstdatum(s): Niet van toepassing
Aanmeldingsdatum(s): Standaarddata zijn van toepassing, zie http://grants1.nih.gov/grants/funding/submissionschedule.htm#AIDS
Inzenddatums voor aids-aanvragen: standaarddata zijn van toepassing, zie http://grants1.nih.gov/grants/funding/submissionschedule.htm#AIDS
Peer Review Datum(s): Standaarddata zijn van toepassing, zie http://grants1.nih.gov/grants/funding/submissionschedule.htm#reviewandaward
Beoordelingsdatum(s) van de Raad: Standaarddata zijn van toepassing, zie http://grants1.nih.gov/grants/funding/submissionschedule.htm#reviewandaward
Vroegst verwachte startdatum: standaarddata zijn van toepassing, zie http://grants1.nih.gov/grants/funding/submissionschedule.htm#reviewandaward
Aanvullende informatie die beschikbaar moet zijn Datum (URL-activeringsdatum): niet van toepassing
Vervaldatum: 8 september 2013

Aanvullende overzichtsinhoud

Doel . Deze FOA, uitgegeven door NIGMS, evenals NCI, NIA, NIDCD, NIDDK, NIDA, NIEHS en NHLBI, National Institutes of Health, moedigt subsidieaanvragen aan van instellingen / organisaties die voorstellen om onderzoek en methoden te ontwikkelen om de snelheid van membraaneiwitstructuur te verbeteren bepaling en om specifieke membraaneiwitstructuren te bepalen. Innovatieve methoden voor expressie, oligomerisatie, solubilisatie, stabilisatie, zuivering, karakterisering, kristallisatie, isotopische labeling en structuurbepaling van unieke en biologisch significante membraaneiwitten door röntgendiffractie, nucleaire magnetische resonantie (NMR), elektronenmicroscopie, massaspectrometrie en andere biofysische technieken worden aangemoedigd. Ook worden projecten aangemoedigd die op korte termijn zullen leiden tot het bepalen van de structuren van biologisch belangrijke membraaneiwitten. Door te reageren op deze FOA, in plaats van op de reguliere door onderzoekers geïnitieerde Research Project Grant (R01) FOA, zal het NIH-personeel helpen de interesse en voortgang van onderzoek op dit wetenschappelijke gebied te volgen.

  • Mechanisme van ondersteuning. Deze FOA maakt gebruik van het toekenningsmechanisme van de NIH Research Project Grant (R01).
  • Fondsen Avbeschikbaar en verwacht aantal onderscheidingen. Omdat de aard en omvang van het voorgestelde onderzoek van aanvraag tot aanvraag zal verschillen, is de verwachting dat ook de omvang en duur van elke toekenning zal variëren. Het totale toegekende bedrag en het aantal toekenningen zal afhangen van de aantallen van het mechanisme, de kwaliteit, de duur en de kosten van de ontvangen aanvragen.
  • Budget en projectperiode. Budgetten voor directe kosten passend bij de aard en omvang van het voorgestelde onderzoek en een projectduur van maximaal vijf jaar kunnen worden aangevraagd.
  • Toepassing Onderzoek Strategy Lengte: De sectie R01 Research Strategy mag niet langer zijn dan 12 pagina's, inclusief tabellen, grafieken, figuren, diagrammen en grafieken. Zie Tabel met paginalimieten.
  • In aanmerking komende instellingen/organisaties. Instellingen/organisaties vermeld in sectie III, 1.A.komen in aanmerking om te solliciteren.
  • in aanmerking komende PRprojectdirecteuren/hoofdonderzoekers (PDs/PI's). Personen met de vaardigheden, kennis en middelen die nodig zijn om het voorgestelde onderzoek uit te voeren, worden uitgenodigd om samen met hun instelling/organisatie een aanvraag voor ondersteuning te ontwikkelen. Personen uit ondervertegenwoordigde raciale en etnische groepen en personen met een handicap worden altijd aangemoedigd om NIH-ondersteuning aan te vragen.
  • Aantal PD's/PI's. Op de aanvraag kunnen meer dan één PD/PI, of meerdere PD's/PI's worden aangewezen.
  • Aantal toepassingen. Aanvragers mogen meer dan één aanvraag indienen, op voorwaarde dat elke aanvraag wetenschappelijk te onderscheiden is.
  • Herinzendingen. Aanvragers kunnen een herindieningsaanvraag indienen, maar een dergelijke aanvraag moet een inleiding bevatten waarin de eerdere peer review-kritiek (samenvattende verklaring) wordt behandeld. Zie het nieuwe NIH-beleid inzake het opnieuw indienen van (gewijzigde) aanvragen (NOT-OD-09-003, NOT-OD-09-016).
  • Verlengingen. Aanvragers kunnen een verlengingsaanvraag indienen.
  • Toepassingsmaterialen. Zie paragraaf IV.1 voor toepassingsmaterialen.
  • Slechthorend. Telecommunicatie voor slechthorenden is beschikbaar op: TTY (301) 451-5936

Afdeling II. Award-informatie
1. Mechanisme van ondersteuning
2. Beschikbare fondsen

Afdeling III. Geschiktheidsinformatie
1. In aanmerking komende aanvragers
A. In aanmerking komende instellingen
B. In aanmerking komende personen
2. Kosten delen of matchen
3. Overige - Speciale geschiktheidscriteria

Afdeling IV. Aanvraag- en indieningsinformatie
1. Adres om aanvraaginformatie aan te vragen
2. Inhoud en vorm van indiening van een aanvraag
3. Inleverdatums en -tijden
A. Ontvangst en beoordeling en verwachte startdatums
1. Intentieverklaring
B. Een aanvraag indienen bij de NIH
C. Verwerking van aanvragen
4. Intergouvernementele beoordeling
5. Financieringsbeperkingen
6. Andere indieningsvereisten

Sectie V. Informatie over aanvraagbeoordeling
1. Criteria
2. Beoordelings- en selectieproces
3. Verwachte aankondigings- en toekenningsdatums

Afdeling VI. Informatie over toekenningsadministratie
1. Award-kennisgevingen
2. Administratieve en nationale beleidsvereisten
3. Rapportage

Afdeling VII. Contactpersoon(en) van het bureau
1. Wetenschappelijk/onderzoekscontact(en)
2. Peer Review-contact(en)
3. Financieel/ Subsidiebeheer Contact(en)

Deel II - Volledige tekst van de aankondiging

Sectie I. Beschrijving van de financieringsmogelijkheid

Deze Funding Opportunity Announcement (FOA) stimuleert subsidieaanvragen voor onderzoek dat leidt tot de bepaling van membraaneiwitstructuren met hoge resolutie. Naast de structuren van integrale membraaneiwitten zijn de structuren van de complexen die gevormd worden tussen deze eiwitten en hun biologische partners van belang. Ondanks de toename van het aantal opgeloste structuren, blijft de kennis van membraaneiwitstructuren nog steeds ver achter bij die van oplosbare eiwitten.

Er wordt gezocht naar toepassingen voor zowel de ontwikkeling van nieuwe methoden om het probleem te benaderen als voor de toepassing van huidige methoden voor het oplossen van specifieke membraaneiwitstructuren. Interessegebieden en geschikte onderwerpen omvatten, maar zijn niet beperkt tot, de hieronder genoemde: innovatieve methoden voor de productie van membraaneiwitten in voldoende hoeveelheden voor karakterisering en structurele studies van membraaneiwitten. Nieuwe benaderingen voor klonering, expressie, oligomere assemblage, solubilisatie, stabilisatie en zuivering van membraaneiwitten zijn nodig om de productie van structureel en functioneel intacte membraaneiwitten te bevorderen die geschikt zijn voor structurele studies. Er zijn ook innovatieve methoden nodig voor structuurbepaling, waaronder kristallisatie, fasering, isotopenlabeling en het verzamelen van röntgenkristallografische, nucleaire magnetische resonantie (NMR) en andere relevante gegevens.

Het wordt erkend dat nieuwe oplossingen kunnen ontstaan ​​tijdens pogingen om de structuren van specifieke membraaneiwitten op te lossen, evenals door gerichte inspanningen die de ontwikkeling van methoden benadrukken. Onderzoekers met verschillende perspectieven en achtergronden en met significante belangen in de bepaling van membraaneiwitstructuren worden in het bijzonder aangemoedigd om te solliciteren. Door te reageren op deze PA, in plaats van op de reguliere door onderzoekers geïnitieerde Research Project Grant (R01) FOA, zal het NIH-personeel helpen de interesse en voortgang van onderzoek op dit wetenschappelijke gebied te volgen.

Membraaneiwitten en hun complexen spelen een cruciale rol in veel cellulaire en fysiologische processen. Ze zijn essentiële bemiddelaars van materiaal-, informatie- en energieoverdracht tussen cellen en hun omgeving, tussen compartimenten in cellen en tussen compartimenten die de orgaansystemen omvatten. Functioneel normale membraaneiwitten zijn van vitaal belang voor de gezondheid en specifieke defecten zijn geassocieerd met veel bekende ziektetoestanden. Membraaneiwitten zijn het doelwit van een groot aantal farmacologisch en toxicologisch actieve stoffen en zijn gedeeltelijk verantwoordelijk voor hun opname, metabolisme en klaring.

Er is veel onderzoek gaande op het gebied van de structuur en functie van membraaneiwitten, en er is aanzienlijke vooruitgang geboekt in de technieken van röntgenkristallografie, elektronendiffractie of NMR-spectroscopie om de structuren met hoge resolutie van membraaneiwitten op te lossen. Sinds 1985 zijn ongeveer 200 unieke membraaneiwitstructuren opgelost, en elke structuur heeft een belangrijke bijdrage geleverd in zijn wetenschapsgebied. (Zie http://blanco.biomol.uci.edu/Membrane_Proteins_xtal.html .) In dezelfde periode is de snelheid van bepaling van de oplosbare eiwitstructuur echter enorm toegenomen, en er blijft een enorme kloof bestaan ​​tussen het begrip van membraaneiwitten en hun oplosbare eiwittegenhangers (1). De veel langzamere vooruitgang toont aan dat het oplossen van membraaneiwitstructuren haalbaar is, zij het moeilijk, dus innovatieve benaderingen zijn duidelijk nog steeds nodig.

Deze FOA zet de inspanningen van de NIH voort om het werk aan membraaneiwitstructuren te stimuleren. Reacties op eerdere programma-aankondigingen op dit gebied hebben geresulteerd in 165 concurrerende prijzen in de periode FY2005-FY2010 (2). Andere inspanningen van de NIH om onderzoek op dit gebied te stimuleren zijn onder meer de NIH Roadmap en het door de NIGMS gefinancierde Protein Structure Initiative (PSI). In 2004 zijn twee Roadmap Centra voor Innovatie in Membraan Eiwitproductie bekroond (3). Een tweede inspanning van de NIH Roadmap was gericht op individuele onderzoekers en kleinere samenwerkingsgroepen. Sinds 2005 zijn in totaal 24, R01- en R21-subsidies, evenals één programmaprojectsubsidie, toegekend via de NIH Roadmap voor de ontwikkeling van innovatieve methoden voor de productie van membraaneiwitten en structuurbepaling (4). Ondanks grote vooruitgang zijn er nog steeds innovatieve benaderingen voor membraaneiwitten nodig, dus de Roadmap-inspanning is voortgezet, zij het op een lager niveau. Er werden opnieuw aanvragen voor roadmapcentra ingediend en in 2009 werden drie toekenningen gedaan (5). Er zijn opnieuw aanvragen ingediend voor R01's die gericht zijn op nieuwe benaderingen en naar verwachting zullen in 2010 13-16 Roadmap-toekenningen worden toegekend (6). In de periode 2005-2010 heeft de PSI verschillende gespecialiseerde centra opgenomen die zich richtten op membraaneiwitten (7). Het nieuwe PSI:Biology-programma-initiatief heeft aanvragen ingediend voor speciale centra voor bepaling van de membraaneiwitstructuur die in 2010 moeten worden toegekend (8).

Er is een aanzienlijk aantal verdienstelijke aanvragen ontvangen als reactie op de bovengenoemde RFA's die mogelijk niet worden gefinancierd vanwege het beperkte beschikbare geld. Andere toepassingen zijn mogelijk niet concurrerend in de context van de RFA's omdat ze zich richten op de oplossing van specifieke eiwitstructuren in plaats van op de ontwikkeling van nieuwe methoden of omdat ze onvoldoende concentratie van onderzoek hebben om als centra succesvol te kunnen concurreren. Dergelijke projecten kunnen geschikt zijn voor de huidige financieringsmogelijkheden. Onderzoekers die aanvragen voor deze RFA's hebben ingediend, willen hun ideeën wellicht verwerken in een nieuwe aanvraag als reactie op deze FOA. Alle projecten die eerder zijn ingediend als reactie op RFA's, moeten worden ingediend als NIEUWE, in plaats van als HERINDIENING, vóór de juiste indieningsdatums. Zie NIH-beleid op: https://grants.nih.gov/grants/guide/notice-files/NOT-OD-03-019.html.

Verwacht wordt dat veel van de projecten samenwerkingsinspanningen zullen zijn tussen en tussen chemici, biochemici, moleculair biologen en biofysici met expertise in de synthese van probes, nieuwe solubiliserende en stabiliserende reagentia bij het klonen en expressie in de isolatie en karakterisering van membraangebonden eiwitten en in röntgenkristallografie, NMR en andere structurele methoden. Een doel van deze FOA is het stimuleren van dergelijke multidisciplinaire en nieuwe samenwerkingen. Een ander doel is om extra onderzoekers aan te moedigen om te gaan werken aan de structuur en functie van membraaneiwitten. Onderzoekers kunnen overwegen hoe hun werk kan profiteren van of een aanvulling kan zijn op het werk dat wordt ondersteund door de Roadmap-expressiecentra, de PSI:Biology-centra, en worden aangemoedigd om deel te nemen aan vergaderingen die van tijd tot tijd door deze centra kunnen worden georganiseerd.

Een toename van het aantal bekende membraaneiwitstructuren zal bijdragen aan een beter begrip van veel fundamentele fenomenen die ten grondslag liggen aan cellulaire functies die essentieel zijn voor de menselijke gezondheid. Specifieke membraaneiwitten kunnen interessant zijn voor een of meer van de deelnemende instituten en centra (IC's) van de NIH. In plaats van hier voorgestelde interessegebieden op te sommen, worden potentiële aanvragers aangemoedigd om de ziekterelevantie of de waarde van algemeen belang van de eiwitten die ze willen bestuderen in overweging te nemen en om de juiste IC-medewerkers te raadplegen met betrekking tot IC-interesse in hun projecten. Zie Contactpersonen IC-programma hieronder in Sectie VII, "Contactpersonen Agentschap".

(1) De voortgang van de bepaling van de membraaneiwitstructuur. Stephen H. White, Protein Science (2004), 13: 1948-1949 en biofysische dissectie van membraaneiwitten. Stephen H. White, Nature (2009), mei 21459 (7245): 344-6.

(2) Structurele biologie van membraaneiwitten Programmaaankondigingen (PA-95-035, PA-99-004, PA-02-060, PA-06-119, PA-07-253) en structurele biologie van membraaneiwitten SBIR/STTR Aankondiging (PA-02-108). Zie NIH-gids: https://grants.nih.gov/grants/guide/pa-files/.

Afdeling II. Award-informatie

Deze aankondiging van de financieringsmogelijkheid (FOA) maakt gebruik van het R01-toekenningsmechanisme. De aanvrager is als enige verantwoordelijk voor het plannen, leiden en uitvoeren van het voorgestelde project.

Deze FOA maakt gebruik van “Just-in-Time” informatieconcepten. Het gebruikt ook niet-modulaire budgetformaten die worden beschreven in de PHS 398-aanvraaginstructies (zie https://grants.nih.gov/grants/funding/phs398/phs398.html).organisatie die een aanvraag indient met directe kosten in elk jaar van $ 250.000 of minder (exclusief consortiumfaciliteiten en administratieve [F&A]-kosten) moet de PHS398 Modular Budget-component gebruiken. Amerikaanse aanvragers die meer dan $ 250.000 aan jaarlijkse directe kosten aanvragen en alle buitenlandse aanvragers moeten budgetaanvragen invullen en indienen met behulp van de component Research & Related Budget.

Omdat de aard en omvang van het voorgestelde onderzoek van aanvraag tot aanvraag zal verschillen, is de verwachting dat ook de omvang en duur van elke toekenning zal variëren. Hoewel de financiële plannen van de IC('s) dit programma ondersteunen, zijn toekenningen op grond van deze financieringsmogelijkheid afhankelijk van de beschikbaarheid van fondsen.

Door consortiumdeelnemers gevraagde faciliteiten en administratieve kosten vallen niet onder de directe kostenbeperking, zie NOT-OD-05-004 .

Het NIH-subsidiebeleid zoals beschreven in de NIH-subsidiebeleidsverklaring is van toepassing op de ingediende aanvragen en toegekende toekenningen in reactie op deze FOA.

Afdeling III. Geschiktheidsinformatie

De volgende organisaties/instellingen komen in aanmerking voor een aanvraag:

  • Openbare/door de staat gecontroleerde instellingen voor hoger onderwijs
  • Particuliere instellingen voor hoger onderwijs
  • Latijns-Amerikaanse instellingen
  • Historisch zwarte hogescholen en universiteiten (HBCU's)
  • Tribaal gecontroleerde hogescholen en universiteiten (TCCU's)
  • Alaska Native en Native Hawaiiaanse dienstverlenende instellingen
  • Non-profitorganisaties met 501(c)(3) IRS-status (anders dan instellingen voor hoger onderwijs)
  • Non-profitorganisaties zonder 501(c)(3) IRS-status (anders dan instellingen voor hoger onderwijs)
  • Kleine bedrijven
  • Organisaties met winstoogmerk (anders dan kleine bedrijven)
  • deelstaatregeringen
  • Indiase / Indiaanse stamregeringen (federaal erkend)
  • Indiase/Indiaanse Tribally Designated Organizations
  • Provincieoverheden
  • Stads- of gemeenteregeringen
  • Speciale districtsregeringen
  • Onafhankelijke schooldistricten
  • Volkshuisvestingsautoriteiten/Indiase huisvestingsautoriteiten
  • Amerikaans grondgebied of bezit
  • Indiase / Indiaanse stamregeringen (anders dan federaal erkende)
  • regionale organisaties
  • Niet-binnenlandse (niet-Amerikaanse) entiteiten (buitenlandse organisaties)
  • Overige(n):
    • In aanmerking komende agentschappen van de federale overheid
    • Op geloof gebaseerde of op de gemeenschap gebaseerde organisaties.

    Elke persoon met de vaardigheden, kennis en middelen die nodig zijn om het voorgestelde onderzoek uit te voeren, wordt uitgenodigd om samen met zijn/haar instelling een aanvraag voor ondersteuning te ontwikkelen. Personen uit ondervertegenwoordigde raciale en etnische groepen en personen met een handicap worden altijd aangemoedigd om NIH-ondersteuning aan te vragen.

    Meer dan één PD/PI, of meerdere PD's/PI's, kunnen op de aanvraag worden aangewezen voor projecten die een "teamwetenschap"-benadering vereisen en daarom duidelijk niet passen in het single-PD/PI-model. Aanvullende informatie over de implementatieplannen, het beleid en de procedures om formeel meer dan één PD/PI voor individuele onderzoeksprojecten toe te staan, is beschikbaar op https://grants.nih.gov/grants/multi_pi. Alle PD's/PI's moeten worden geregistreerd in de NIH eRA Commons voordat de aanvraag wordt ingediend (zie http://era.nih.gov/ElectronicReceipt/preparing.htm voor instructies).

    De beslissing om een ​​subsidie ​​aan te vragen met een enkele PD/PI of meerdere PD's/PI's is de verantwoordelijkheid van de onderzoekers en aanvragende organisaties en moet worden bepaald door de wetenschappelijke doelstellingen van het project. Voor subsidieaanvragen met meerdere PD's/PI's is aanvullende informatie vereist, zoals beschreven in de onderstaande instructies. Houd er bij het overwegen van meerdere PD's/PI's rekening mee dat de structuur en het bestuur van het PD/PI-leiderschapsteam, evenals de kennis, vaardigheden en ervaring van de individuele PD's/PI's zullen worden meegewogen in de beoordeling van de algehele wetenschappelijke waarde van de sollicitatie. Meerdere PD's/PI's op een project delen de autoriteit en verantwoordelijkheid voor het leiden en sturen van het project, intellectueel en logistiek. Elke PD/PI is verantwoordelijk en rekenschap af aan de begunstigde organisatie, of, in voorkomend geval, aan een samenwerkende organisatie, voor de goede uitvoering van het project of programma, inclusief het indienen van de vereiste rapporten. Zie https://grants.nih.gov/grants/multi_pi voor meer informatie over meerdere PD's/PI's.

    2. Kosten delen of matchen

    Dit programma vereist geen kostendeling zoals gedefinieerd in de huidige NIH verleent beleidsverklaring .

    3. Overige speciale geschiktheidscriteria

    Aantal toepassingen. Aanvragers mogen meer dan één aanvraag indienen, op voorwaarde dat elke aanvraag wetenschappelijk te onderscheiden is.

    Herinzendingen. Aanvragers kunnen een herindieningsaanvraag indienen, maar een dergelijke aanvraag moet een inleiding bevatten waarin de eerdere peer review-kritiek (samenvattende verklaring) wordt behandeld. Te beginnen met aanvragen die bedoeld zijn voor de officiële indieningsdatum van 25 januari 2009, zijn alle originele nieuwe aanvragen (d.w.z. nooit ingediend) en concurrerende verlengingsaanvragen toegestaan ​​met slechts één enkele wijziging (A1). Zie het nieuwe NIH-beleid inzake het opnieuw indienen van (gewijzigde) aanvragen (NOT-OD-09-003, NOT-OD-09-016). Originele nieuwe en concurrerende verlengingsaanvragen die vóór 25 januari 2009 zijn ingediend, zijn toegestaan ​​​​twee wijzigingen (A1 en A2). Voor deze "grootvader"-aanvragen verwacht de NIH dat eventuele A2-aanvragen uiterlijk op 7 januari 2011 zullen worden ingediend en dat de NIH na die datum geen A2-aanvragen meer zal accepteren.

    Verlengingen. Aanvragers kunnen een verlengingsaanvraag indienen.

    Afdeling IV. Aanvraag- en indieningsinformatie

    Om een ​​SF424 (R&R) Application Package en SF424 (R&R) Application Guide voor het invullen van de SF424 (R&R)-formulieren voor deze FOA te downloaden, gebruikt u de knop "Elektronisch subsidie ​​aanvragen" in deze FOA of link naar http://www.grants .gov/Apply/ en volg de aanwijzingen op die website.

    Passende registraties bij Grants.gov en eRA Commons moeten op of voor de vervaldatum zijn voltooid om een ​​aanvraag met succes in te dienen. Verschillende stappen van het registratieproces kunnen vier weken of langer duren. Daarom moeten aanvragers onmiddellijk contact opnemen met hun bedrijfsfunctionaris om te bepalen of hun organisatie/instelling al is geregistreerd bij zowel Grants.gov als de Commons. Alle registraties moeten voltooid zijn vóór de uiterste indieningsdatum om de aanvraag als "op tijd" te beschouwen (zie 3.C.1 voor meer informatie over tijdige indiening).

    Voor instellingen/organisaties is een eenmalige aanmelding vereist bij zowel:

    PD's/PI's moeten samenwerken met hun instellingen/organisaties om ervoor te zorgen dat ze zijn geregistreerd in de NIH eRA Commons.

    Er zijn verschillende aanvullende afzonderlijke acties vereist voordat een aanvrager een elektronische aanvraag kan indienen, namelijk:

    1) Organisatorische/institutionele registratie in Grants.gov/Get Registered

    • Uw organisatie moet een DUNS-nummer (Data Universal Number System) verkrijgen en zich registreren bij de Central Contractor Registration (CCR) als onderdeel van het Grants.gov-registratieproces.
    • Als uw organisatie geen Taxpayer Identification Number (TIN) of Employer Identification Number (EIN) heeft, houd dan rekening met extra tijd. Voor CCR-registratie is een geldig TIN of EIN nodig.
    • De CCR valideert ook de EIN tegen de gegevens van de Internal Revenue Service, een stap die een tot twee werkdagen extra in beslag neemt.
    • Directe vragen over Grants.gov-registratie naar:
      Grants.gov-klantenondersteuning
      Contactcentrum Telefoon: 800-518-4726
      Kantooruren: ma-vr 7.00 - 21.00 uur Oosterse tijd
      E-mail [email protected]
    • Als u wilt weten of een organisatie al in het Commons is geregistreerd, raadpleegt u de "Lijst van begunstigde organisaties die zijn geregistreerd in NIH eRA Commons".
    • Voor vragen over de Commons-registratie kunt u terecht bij:
      eRA Commons-helpdesk
      Telefoon: 301-402-7469 of 866-504-9552 (gratis)
      TTY: 301-451-5939
      Kantooruren Ma-V 7:00 – 20:00 uur Oosterse tijd
      E-mail [email protected]

    3) Projectdirecteur/hoofdonderzoeker (PD/PI) Registratie in de NIH eRA Commons: Raadpleeg de NIH eRA Commons System (COM) Gebruikershandleiding.

    • De persoon (personen) die in de aanvraag als PD's/PI's zijn aangewezen, moeten ook worden geregistreerd in de NIH eRA Commons. Bij meerdere PD's/PI's moeten alle PD's/PI's geregistreerd zijn en de PI-rol toegewezen krijgen in de eRA Commons voorafgaand aan het indienen van de aanvraag.
    • Elke PD/PI moet een PD/PI-account hebben in de Commons. Aanvragers mogen echter geen Commons-account delen voor zowel een Authorized Organization Representative/Signing Official (AOR/SO)-rol als een PD/PI-rol, als ze zowel een PD/PI-rol als een Internet Assisted Review (IAR)-rol hebben. rollen zouden onder één Commons-account moeten bestaan.
    • Wanneer meerdere PD's/PI's worden voorgesteld, moeten alle PD's/PI's bij de aanvragende organisatie bij die organisatie zijn aangesloten. PD's/PI's die zich bij een andere instelling bevinden, hoeven niet aangesloten te zijn bij de aanvragende organisatie, maar moeten wel aangesloten zijn bij hun eigen organisatie om toegang te krijgen tot de Commons.
    • Deze registratie/affiliatie moet worden gedaan door de AOR/SO of zijn/haar vertegenwoordiger die al is geregistreerd in de Commons.

    Zowel de PD('s)/PI('s) als de AOR/SO hebben aparte accounts nodig in de NIH eRA Commons, aangezien beide geautoriseerd zijn om de applicatie-image te bekijken.

    Opmerking: Het registratieproces is niet sequentieel. Aanvragers moeten beginnen met de registratieprocessen voor zowel Grants.gov als eRA Commons zodra hun organisatie een DUNS-nummer heeft verkregen. Er is slechts één DUNS-nummer vereist en er moet naar hetzelfde DUNS-nummer worden verwezen bij het invullen van de Grants.gov-registratie, eRA Commons-registratie en de SF424 (R&R)-formulieren.

    1. Aanvraag informatie aanvragen

    Aanvragers moeten de SF424 (R&R)-aanvraagformulieren en de SF424 (R&R) Application Guide voor deze FOA downloaden via Grants.gov/Apply.

    Let op: Alleen het formulierenpakket dat direct aan een specifieke FOA is gekoppeld, kan worden gebruikt. U kunt geen andere SF424 (R&R)-formulieren gebruiken (bijv. voorbeeldformulieren, formulieren van een andere FOA), hoewel sommige van de "Bijlage"-bestanden voor meer dan één FOA kunnen worden gebruikt.

    Neem voor meer hulp contact op met GrantsInfo -- Telefoon 301-710-0267, e-mail: [email protected] .

    Telecommunicatie voor slechthorenden: TTY: (301) 451-5936

    2. Inhoud en vorm van indiening van een aanvraag

    Bereid alle aanvragen voor met behulp van de SF424 (R&R)-aanvraagformulieren voor deze FOA via Grants.gov/Apply en in overeenstemming met de SF424 (R&R) Application Guide (https://grants.nih.gov/grants/funding/424/index. htm)..

    De SF424 (R&R) Application Guide is van cruciaal belang voor het indienen van een volledige en nauwkeurige aanvraag bij de NIH. Sommige velden binnen de SF424 (R&R) applicatiecomponenten, hoewel niet gemarkeerd als verplicht, zijn vereist door de NIH (bijv. het inlogveld "Inloggegevens" van het onderdeel "Onderzoek en gerelateerd senior/sleutelpersoonprofiel" moet de aan de PD/PI toegewezen eRA Commons-gebruikers-ID bevatten). Agentschap-specifieke instructies voor dergelijke velden zijn duidelijk aangegeven in de Toepassingsgids. Zie voor meer informatie "Veelgestelde vragen - Aanvraaggids, elektronische indiening van subsidieaanvragen".

    De SF424 (R&R) applicatie heeft verschillende componenten. Sommige componenten zijn vereist, andere zijn optioneel. Het formulierenpakket dat is gekoppeld aan deze FOA in Grants.gov/APPLY bevat alle toepasselijke componenten, vereist en optioneel. Een ingevulde aanvraag naar aanleiding van deze FOA bevat de gegevens in de volgende onderdelen:

    Vereiste componenten:
    SF424 (R&R) (Dekselcomponent)
    Locaties van onderzoeks- en gerelateerde projecten/uitvoeringen
    Onderzoek en gerelateerde andere projectinformatie
    Onderzoek en gerelateerde senior/sleutelpersoon
    PHS398 Voorbladsupplement
    PHS398 Onderzoeksplan
    PHS398-checklist
    PHS398 Modulair budget of onderzoeks- en gerelateerd budget, al naar gelang van toepassing (zie sectie IV.6. met betrekking tot de juiste vereiste budgetcomponent.)

    Optionele componenten:
    PHS398 Sollicitatiebriefbestand
    Begrotingsbijlage(n) voor onderzoek en aanverwant formulier

    Buitenlandse organisaties [ Niet-binnenlandse (niet-Amerikaanse) entiteit]

    Het NIH-beleid met betrekking tot subsidies aan buitenlandse (niet-Amerikaanse) organisaties is te vinden in de NIH Grants Policy Statement op: https://grants.nih.gov/grants/policy/nihgps_2003/NIHGPS_Part12.htm#_Toc54600260.

    Aanvragen van buitenlandse organisaties moeten:

    Daarnaast voor aanvragen van buitenlandse organisaties:

    • Terugvordering van douane- en invoerkosten is niet toegestaan.
    • Alles moet in het werk worden gesteld om te voldoen aan de formaatspecificaties, die zijn gebaseerd op een standaard Amerikaans papierformaat van 8,5” x 11” in elke PDF.
    • Fondsen voor maximaal 8% Facilitaire en administratieve (F&A) kosten (exclusief apparatuur) kunnen worden aangevraagd. Zie NOT-OD-01-028, 29 maart 2001.
    • Organisaties moeten voldoen aan het federale/NIH-beleid inzake mensen, dieren en biologische gevaren.
    • Organisaties moeten voldoen aan de federale/NIH-regelgeving inzake bioveiligheid en bioveiligheid. Zie sectie VI.2. , "Administratieve en nationale beleidsvereisten."

    Voorgesteld onderzoek moet speciale kansen bieden voor het bevorderen van onderzoeksprogramma's door het gebruik van ongebruikelijk talent, hulpbronnen, bevolkingsgroepen of omgevingsomstandigheden in andere landen die niet direct beschikbaar zijn in de Verenigde Staten of die bestaande Amerikaanse hulpbronnen vergroten.

    Toepassingen met meerdere PD's/PI's

    Wanneer meerdere PD/PI's worden voorgesteld, gebruikt u de pagina Face Page-Continued om items 3a – 3h voor alle PD/PI's op te geven. NIH vereist dat één PD/PI wordt aangewezen als de "contact PD/PI" voor alle communicatie tussen de PD/PI's en het agentschap. De contactpersoon PD/PI moet op dezelfde manier voldoen aan alle toelatingseisen voor de PD/PI-status als andere PD/PI's, maar heeft geen speciale rollen of verantwoordelijkheden binnen het projectteam buiten de bovengenoemde. De contactpersoon PD/PI kan gedurende de projectperiode worden gewijzigd. De contact-PD/PI moet worden vermeld in blok 3 van Formulierpagina 1 (de Face Page), met alle aanvullende PD/PI's vermeld op Formulierpagina 1-Vervolg. Gebruik bij het invoegen van de naam van de PD/PI in de kop van elke toepassingspagina de naam van de “Contact PD/PI, et. al.” De contactpersoon PD/PI moet afkomstig zijn van de aanvragende organisatie als PD/PI's van meer dan één instelling zijn.

    Alle personen die zijn aangewezen als PD/PI moeten zijn geregistreerd in de eRA Commons en moeten de PD/PI-rol in dat systeem krijgen toegewezen (andere rollen geven de PD/PI niet de juiste toegang tot de applicatierecords). Elke PD/PI moet hun respectieve eRA Commons-ID opnemen in het veld eRA Commons-gebruikersnaam.

    Meervoudig PD/PI-leiderschapsplan : Voor aanvragen die meerdere PD's/PI's aanwijzen, moet het onderdeel van het Onderzoeksplan getiteld "Multiple PD/PI Leadership Plan" worden opgenomen. Er moet een reden voor het kiezen van een meervoudige PD/PI-benadering worden beschreven. De bestuurs- en organisatiestructuur van het leiderschapsteam en het onderzoeksproject moeten worden beschreven en communicatieplannen, een proces voor het nemen van beslissingen over wetenschappelijke richting en procedures voor het oplossen van conflicten omvatten. De rollen en administratieve, technische en wetenschappelijke verantwoordelijkheden voor het project of programma moeten worden afgebakend voor de PD's/PI's en andere medewerkers.

    Als er budgettoewijzing is gepland, moet de verdeling van middelen over specifieke onderdelen van het project of de individuele PD's/PI's worden vastgelegd in het leiderschapsplan. In het geval van een toekenning kunnen de gevraagde toewijzingen worden weergegeven in een voetnoot op de Notice of Award (NoA).

    Aanvragen waarbij een enkele instelling betrokken is

    Wanneer alle PD's/PI's zich binnen één instelling bevinden, volgt u de instructies in de SF424 (R&R) Application Guide.

    Aanvragen waarbij meerdere instellingen betrokken zijn

    Wanneer er meerdere instellingen bij betrokken zijn, moet één instelling worden aangewezen als de eerste instelling en moet financiering voor de andere instelling(en) worden aangevraagd via een onderaanneming die door de eerste instelling wordt beheerd. Bij het indienen van een gedetailleerde begroting dient de eerste instelling haar begroting in te dienen via de component Onderzoek & Aanverwant budget. Alle andere instellingen dienen hun individuele budgetten afzonderlijk bij het Formulier Begrotingsbijlage(n) voor Onderzoek & Aanverwante Subaward(s) te voegen. Zie paragraaf 4.8 van de SF424 (R&R) Application Guide voor verdere instructies met betrekking tot het gebruik van het subgunningsbegrotingsformulier.

    Bij het indienen van een modulair budget vult de primaire instelling alleen de PHS398 Modular Budget-component in. Informatie over het consortium/uitbestedingsbudget wordt gegeven in de budgetmotivering. Afzonderlijke budgetten voor elk consortium/subcontractant zijn niet vereist bij het gebruik van het modulaire budgetformaat. Zie Sectie 5.4 van de Toepassingsgids voor verdere instructies met betrekking tot het gebruik van de PHS398 Modular Budget-component.

    3. Inleverdatums en -tijden

    3.A. Indiening, beoordeling en verwachte startdatums
    Openingsdatum: 5 september 2010 (vroegste datum waarop een aanvraag kan worden ingediend bij Grants.gov)
    Ontvangstdatum aanvraag(en): Standaarddata zijn van toepassing, zie https://grants.nih.gov/grants/funding/submissionschedule.htm
    AIDS-aanvraag indieningsdatum(s): Standaarddata zijn van toepassing, zie https://grants.nih.gov/grants/funding/submissionschedule.htm
    Peer Review Datum(s): Standaarddata zijn van toepassing, zie https://grants.nih.gov/grants/funding/submissionschedule.htm
    Beoordelingsdatum(s) van de Raad: Standaarddata zijn van toepassing, zie https://grants.nih.gov/grants/funding/submissionschedule.htm
    Vroegst verwachte startdatum(s): standaarddata zijn van toepassing, zie https://grants.nih.gov/grants/funding/submissionschedule.htm

    Voor de financieringsmogelijkheid is geen intentieverklaring vereist.

    3.B. Elektronisch indienen van een aanvraag bij de NIH

    Om een ​​aanvraag in te dienen als reactie op deze FOA, moeten aanvragers toegang krijgen tot deze FOA via http://www.grants.gov/web/grants/applicants/apply-for-grants.html en stap 1-4 volgen. Let op: Aanvragen mogen alleen elektronisch worden ingediend. PAPIEREN AANVRAGEN WORDEN NIET AANVAARD. Alle bijlagen moeten in PDF-formaat aan NIH worden verstrekt, bestandsnamen moeten worden opgenomen zonder spaties of speciale tekens en er moet een .pdf-extensie worden gebruikt.

    3.C. Aanvraagverwerking

    Toepassingen kunnen worden ingediend op of na de openingsdatum en moeten niet later dan met succes door Grants.gov worden ontvangen 17.00 uur lokale tijd (van de aanvragende instelling/organisatie) op de vervaldatum(s) van de aanvraag. (Zie Sectie IV.3.A. voor alle data.) Als een aanvraag niet binnen de gestelde termijn(en) is ingediend, kan de aanvraag vertraging oplopen in het beoordelingsproces of niet worden beoordeeld. Alle aanvragen moeten aan de volgende criteria voldoen om als "op tijd" te worden beschouwd:

    • Alle registraties moeten voltooid zijn vóór de uiterste indieningsdatum
    • De aanvraag moet vóór 17.00 uur een Grants.gov-trackingnummer en tijdstempel ontvangen (of een eRA-helpdeskticket dat een systeemprobleem bevestigt dat de indiening verhindert). lokale tijd op de uiterste indieningsdatum.
    • Alle door het systeem geïdentificeerde fouten/waarschuwingen moeten worden gecorrigeerd en het indieningsproces moet worden voltooid binnen het "foutcorrectievenster".

    Bezoek alstublieft http://era.nih.gov/electronicReceipt/app_help.htm voor gedetailleerde informatie over wat u moet doen als Grants.gov- of eRA-systeemproblemen uw mogelijkheid om op tijd in te dienen bedreigen.

    Indiening bij Grants.gov is niet de laatste stap - aanvragers moeten hun aanvraag volgen tot aan de eRA Commons om te controleren op fouten en waarschuwingen en hun samengestelde aanvraag te bekijken!

    3.C.2 Tweedaagse periode om door eRA geïdentificeerde fouten/waarschuwingen te corrigeren

    BELANGRIJKE NOTITIE! NIH heeft de foutcorrectieperiode voor vervaldatums van 25 januari 2011 en daarna geëlimineerd. Vanaf 25 januari moeten alle correcties op de vervaldatum zijn voltooid om een ​​aanvraag op tijd in overweging te kunnen nemen. Zie NIET-OD-10-123.

    Zodra een aanvraagpakket met succes is ingediend via Grants.gov, biedt NIH aanvragers een tweedaagse venster voor foutcorrectie om door eRA geïdentificeerde fouten of waarschuwingen te corrigeren voordat een definitief geassembleerde toepassing wordt gemaakt in de eRA Commons. De standaardperiode voor foutcorrectie is twee (2) werkdagen, te beginnen op de dag na de uiterste indieningsdatum en met uitzondering van weekends en standaard federale feestdagen. Alle fouten moeten worden gecorrigeerd om het indieningsproces met succes te voltooien. Waarschuwingen verhinderen niet dat de aanvraag het indieningsproces voltooit.

    Houd er rekening mee dat de volgende waarschuwingen van toepassing zijn:

    • De eerste indiening van de aanvraag moet 'op tijd' zijn.
    • Van de AOR/instellingen wordt verwacht dat zij afdwingen dat toepassingswijzigingen die binnen het foutencorrectievenster worden aangebracht, beperkt blijven tot die welke nodig zijn om door het systeem geïdentificeerde fouten/waarschuwingen aan te pakken. NIH kan elke aanvraag afwijzen die aanvullende wijzigingen bevat.
    • Bewijs van "op tijd" indiening (bijv. Grants.gov tijdstempel en trackingnummer) en een beschrijving van alle wijzigingen die binnen het venster zijn aangebracht, moeten worden gedocumenteerd in de PHS 398 begeleidende brief van de aanvraag.

    3.C.3 Een applicatie bekijken in de eRA Commons

    Zodra eventuele door eRA geïdentificeerde fouten zijn verholpen en de geassembleerde applicatie is aangemaakt in de eRA Commons, hebben de PD/PI en de Authorized Organization Representative/Signing Official (AOR/SO) twee weekdagen (maandag – vrijdag, met uitzondering van federale feestdagen) om bekijk de geassembleerde aanvraag voordat deze automatisch naar de NIH gaat voor verdere verwerking.

    • Als alles acceptabel is, is er geen verdere actie nodig. De aanvraag wordt automatisch doorgestuurd naar de afdeling ontvangst en verwijzing in het Centrum voor wetenschappelijke beoordeling voor verwerking na twee weekdagen, met uitzondering van federale feestdagen.
    • Voorafgaand aan de indieningsdeadline kan de AOR/SO de samengestelde aanvraag “afwijzen” en een gewijzigde/gecorrigeerde aanvraag indienen binnen de tweedaagse kijkvenster. Deze optie moet worden gebruikt als wordt vastgesteld dat een deel van de aanvraag verloren is gegaan of niet correct is overgedragen tijdens het indieningsproces. De AOR/SO heeft de mogelijkheid om de aanvraag te "afwijzen" en een gewijzigde/gecorrigeerde aanvraag in te dienen. Neem in deze gevallen contact op met de eRA-helpdesk om ervoor te zorgen dat de problemen worden aangepakt en gecorrigeerd. Eenmaal afgewezen, moeten aanvragers de instructies volgen voor het corrigeren van fouten in sectie 2.12 van de SF 424 (R&R) aanvraaggids, inclusief de vereiste voor begeleidende brieven bij late aanvragen. De functie "Weigeren" moet ook worden gebruikt als u vaststelt dat waarschuwingen van toepassing zijn op uw toepassing en nu moeten worden aangepakt. Onthoud dat waarschuwingen de verdere verwerking van de aanvraag niet stoppen. Als het indienen van een aanvraag leidt tot waarschuwingen (maar geen fouten), wordt deze na twee werkdagen automatisch verdergezet als er geen actie wordt ondernomen. Sommige waarschuwingen moeten mogelijk later in het proces worden aangepakt.
    • Als de termijn van twee dagen na de indieningsdeadline valt, heeft de AOR/SO de mogelijkheid om de aanvraag te "afwijzen" als, vanwege een eRA Commons- of Grants.gov-systeemprobleem, de aanvraag het ingediende aanvraagpakket niet correct weergeeft (bijv. een deel van de aanvraag is verloren gegaan of is niet correct overgedragen tijdens het indieningsproces). De AOR/SO moet eerst contact opnemen met de eRA Commons Helpdesk om de systeemfout te bevestigen, het probleem te documenteren en te bepalen wat de beste manier van handelen is. NIH zal de aanvrager niet straffen voor een probleem met het eRA Commons- of Grants.gov-systeem.
    • Als de AOR/SO ervoor kiest om de afbeelding te "afwijzen" na de indieningsdeadline om een ​​andere reden dan een eRA Commons- of Grants.gov-systeemfout, kan een gewijzigde/gecorrigeerde aanvraag nog steeds worden ingediend, maar deze zal te laat aan de NIH worden onderworpen beleidsrichtlijnen en worden mogelijk niet geaccepteerd. De reden voor deze vertraging moet worden toegelicht in de bijlage bij de begeleidende brief.
    • Zowel de AOR/SO als de PD/PI ontvangen e-mailmeldingen wanneer de aanvraag wordt afgewezen of de aanvraag na twee werkdagen automatisch verder gaat in het proces.

    Na ontvangst worden de aanvragen op volledigheid beoordeeld door het Center for Scientific Review, NIH. Onvolledige aanvragen worden niet beoordeeld.

    Er zal een ontvangstbevestiging zijn van aanvragen van Grants.gov en de Commons. De indienende AOR/SO ontvangt de Grants.gov-bevestigingen. De AOR/SO en de PI ontvangen Commons-erkenningen. Informatie met betrekking tot de toewijzing van een aanvraag aan een wetenschappelijke beoordelingsgroep staat ook in de Commons.

    Opmerking: aangezien e-mail onbetrouwbaar kan zijn, is het de verantwoordelijkheid van de aanvrager om periodiek de status van zijn aanvraag in de Commons te controleren.

    De NIH accepteert geen enkele aanvraag in reactie op deze FOA die in wezen hetzelfde is als een aanvraag die momenteel in behandeling is voor de eerste beoordeling van de verdienste, tenzij de aanvrager de in behandeling zijnde aanvraag intrekt. De NIH accepteert geen aanvraag die in wezen hetzelfde is als een aanvraag die al is beoordeeld. De NIH accepteert echter een herindieningsaanvraag, maar een dergelijke aanvraag moet een inleiding bevatten waarin de kritiek uit de vorige beoordeling wordt behandeld.

    4. Intergouvernementele beoordeling

    Dit initiatief is niet onderworpen aan intergouvernementele toetsing.

    Alle NIH-awards zijn onderworpen aan de algemene voorwaarden, kostenprincipes en andere overwegingen die worden beschreven in de NIH verleent beleidsverklaring .

    Pre-gunningskosten zijn toegestaan. Een begunstigde kan, op eigen risico en zonder voorafgaande goedkeuring van de NIH, verplichtingen en uitgaven doen om kosten te dekken tot 90 dagen vóór de begindatum van de initiële budgetperiode van een nieuwe of hernieuwde toekenning als dergelijke kosten: 1) noodzakelijk zijn om het project, en 2) in aanmerking komen voor de subsidie, indien toegekend, zonder voorafgaande goedkeuring van de NIH. Als specifieke uitgaven anders voorafgaande goedkeuring vereisen, moet de begunstigde de NIH-goedkeuring verkrijgen voordat de kosten worden gemaakt. Voorafgaande goedkeuring van de NIH is vereist voor kosten die meer dan 90 dagen vóór de begindatum van de initiële budgetperiode van een nieuwe of verlengingsprijs moeten worden gemaakt.

    Het maken van pre-gunningskosten in afwachting van een concurrerende of niet-concurrerende prijs legt de NIH geen verplichting op om de toekenning te doen of om het bedrag van het goedgekeurde budget te verhogen als een toekenning wordt gedaan voor minder dan het verwachte bedrag en ontoereikend is om de gemaakte pre-gunningskosten te dekken. De NIH verwacht dat de begunstigde zich er volledig van bewust is dat de kosten voorafgaand aan de gunning resulteren in een lening tegen toekomstige steun en dat een dergelijke lening het vermogen van de begunstigde om de projectdoelstellingen binnen het goedgekeurde tijdsbestek te bereiken niet in het gedrang mag brengen of op enigerlei wijze de uitvoering van het project nadelig mag beïnvloeden (zie Beleidsverklaring NIH Grants https://grants.nih.gov/grants/policy/nihgps_2003/NIHGPS_Part6.htm.)

    6. Andere indieningsvereisten

    PD/PI-referentie (bijv. Inloggen bureau)

    De NIH vereist dat de PD('s)/PI('s) zijn/haar Commons-gebruikers-ID invullen in het gedeelte "PROFIEL - Projectdirecteur/hoofdonderzoeker", inlogveld "Credential" van het "Research & Related Senior/ Sleutelpersoonprofiel” onderdeel.

    De aanvragende organisatie moet haar DUNS-nummer opnemen in haar Organisatieprofiel in de eRA Commons. Dit DUNS-nummer moet overeenkomen met het DUNS-nummer dat is opgegeven bij de CCR-registratie bij Grants.gov. Zie voor meer informatie "Veelgestelde vragen - Aanvraaggids, elektronische indiening van subsidieaanvragen".

    PHS398 Onderzoeksplan Component Secties

    Alle applicatie-instructies beschreven in de PHS 398 Application Guide moeten worden gevolgd, met de volgende aanvullende vereisten:

    • Inleiding (vereist voor een herindienings- of herzieningsaanvraag) is beperkt tot 1 pagina.
    • Specifieke doelstellingen is beperkt tot 1 pagina.
    • Onderzoeksstrategie, inclusief tabellen, grafieken, figuren, diagrammen en grafieken, is beperkt tot 12 pagina's. Zie Tabel met paginalimieten.

    Amerikaanse organisaties die een aanvraag indienen met directe kosten in elk jaar van $ 250.000 of minder (exclusief kosten van consortiumfaciliteiten en administratieve [F&A]) moeten de PHS398 Modular Budget-component gebruiken. Amerikaanse aanvragers die meer dan $ 250.000 aan jaarlijkse directe kosten aanvragen en alle buitenlandse aanvragers moeten budgetaanvragen invullen en indienen met behulp van de component Research & Related Budget.

    Specifieke instructies voor aanvragen die $ 500.000 (directe kosten) of meer per jaar aanvragen

    Aanvragers die voor elk jaar $ 500.000 of meer aan directe kosten vragen (exclusief F&A-kosten van het consortium) moeten de volgende stappen uitvoeren:

    1) Neem ten minste 6 weken voor het indienen van de aanvraag contact op met de IC-programmamedewerkers, d.w.z. omdat er plannen worden ontwikkeld voor het onderzoek

    2) Verkrijg instemming van het IC-personeel dat de IC de aanvraag voor overweging voor toekenning zal accepteren en,

    3) Voeg een begeleidende brief toe aan de aanvraag die het personeelslid en de IC identificeert die ermee hebben ingestemd de toewijzing van de aanvraag te accepteren.

    Dit beleid is van toepassing op alle nieuwe, verlengings-, herzienings- of herindieningsaanvragen. Zie NOT-OD-02-004.

    Aanvragers moeten volg de specifieke instructies op bijlagemateriaal zoals beschreven in de SF424 (R&R) Application Guide (zie https://grants.nih.gov/grants/funding/424/index.htm).

    Gebruik de bijlage niet om de paginabeperkingen te omzeilen. Een aanvraag die niet voldoet aan de vereiste paginabeperkingen kan vertraging oplopen in het beoordelingsproces.

    NIH beschouwt het delen van unieke onderzoeksbronnen die zijn ontwikkeld via door NIH gesponsord onderzoek als een belangrijk middel om de waarde van onderzoek te vergroten en vooruit te helpen. Wanneer middelen zijn ontwikkeld met NIH-fondsen en de bijbehorende onderzoeksresultaten zijn gepubliceerd of aan de NIH verstrekt, is het belangrijk dat deze direct beschikbaar worden gesteld voor onderzoeksdoeleinden aan gekwalificeerde personen binnen de wetenschappelijke gemeenschap. Als de definitieve gegevens/bronnen niet kunnen worden gedeeld, moet dit worden uitgelegd in het gedeelte Bronnen delen van de toepassing. Zie https://grants.nih.gov/grants/policy/data_sharing/data_sharing_faqs.htm.

    (een) Plan voor het delen van gegevens: Ongeacht het gevraagde bedrag wordt van onderzoekers verwacht dat ze een korte beschrijving van 1 alinea opnemen over hoe de uiteindelijke onderzoeksgegevens worden gedeeld, of uitleggen waarom het delen van gegevens niet mogelijk is. Aanvragers worden aangemoedigd om plannen voor het delen van gegevens te bespreken met hun contactpersoon bij het NIH-programma. Zie Beleid voor het delen van gegevens of https://grants.nih.gov/grants/guide/notice-files/NOT-OD-03-032.html.

    (B) Modelorganismen delen: Ongeacht het gevraagde bedrag wordt verwacht dat alle aanvragen waarbij de ontwikkeling van modelorganismen wordt verwacht een beschrijving bevatten van een specifiek plan voor het delen en verspreiden van unieke modelorganismen en verwante hulpbronnen, of passende redenen vermelden waarom het delen ervan beperkt of niet mogelijk is . Zie Beleid voor het delen van modelorganismen en NIH-gids NOT-OD-04-042.

    (c) Genoombrede associatiestudies (GWAS): Ongeacht het gevraagde bedrag, aanvragers die financiering zoeken voor een genoom-met wieVan een associatieonderzoek wordt verwacht dat het een plan levert voor het indienen van GWAS-gegevens bij de door de NIH aangewezen GWAS-gegevensopslag, of een passende verklaring geeft waarom indiening bij de opslagplaats niet mogelijk is. Een genoombrede associatiestudie wordt gedefinieerd als elke studie van genetische variatie over het gehele genoom die is ontworpen om genetische associaties te identificeren met waarneembare eigenschappen (zoals bloeddruk of gewicht) of de aan- of afwezigheid van een ziekte of aandoening. Zie voor meer informatie Beleid voor het delen van gegevens verkregen in door NIH ondersteunde of uitgevoerde genoombrede associatiestudies, NIH-gids NOT-OD-07-088 en https://grants.nih.gov/grants/gwas/.

    Buitenlandse aanvragen (niet-binnenlandse [niet-Amerikaanse] entiteiten)

    Geef aan hoe het voorgestelde project specifiek relevant is voor de missie en doelstellingen van de NIH/IC en het potentieel heeft om de gezondheidswetenschappen in de Verenigde Staten aanzienlijk vooruit te helpen

    Sectie V. Informatie over aanvraagbeoordeling

    Alleen de hieronder beschreven beoordelingscriteria worden in het beoordelingsproces in aanmerking genomen.

    2. Beoordelings- en selectieproces

    Aanvragen die voor deze financieringsmogelijkheid worden ingediend, worden op basis van vastgestelde PHS-verwijzingsrichtlijnen toegewezen aan de IC's voor financieringsoverweging.

    Aanvragen die compleet zijn, worden beoordeeld op wetenschappelijke en technische waarde door (een) geschikte wetenschappelijke beoordelingsgroep(en) in overeenstemming met de NIH-peer review-procedures (http://grants1.nih.gov/grants/peer/) met behulp van de beoordelingscriteria hieronder vermeld.

    Als onderdeel van de wetenschappelijke peer review zullen alle aanvragen:

    • Een selectieproces doorlopen waarin alleen de aanvragen die geacht worden de hoogste wetenschappelijke en technische waarde te hebben, over het algemeen de bovenste helft van de beoordeelde aanvragen, worden besproken en een impact-/prioriteitsscore krijgen.
    • Ontvang een schriftelijke kritiek.
    • Ontvang een tweede beoordeling door de juiste nationale adviesraad of raad.

    De missie van de NIH is om de wetenschap te ondersteunen bij het zoeken naar kennis over de biologie en het gedrag van levende systemen en om die kennis toe te passen om een ​​gezond leven te verlengen en de lasten van ziekte en handicaps te verminderen. Als onderdeel van deze missie worden aanvragen die bij de NIH worden ingediend voor subsidies of samenwerkingsovereenkomsten ter ondersteuning van biomedisch en gedragsonderzoek, beoordeeld op wetenschappelijke en technische waarde via het peer review-systeem van de NIH.

    Reviewers geven een algemene impact/prioriteitscore om hun beoordeling van de waarschijnlijkheid dat het project een blijvende, krachtige invloed uitoefent op het (de) betrokken onderzoeksgebied(en) weer te geven, rekening houdend met de volgende vijf beoordeelde beoordelingscriteria en aanvullende beoordelingscriteria ( zoals van toepassing op het voorgestelde project).

    Gescoorde beoordelingscriteria

    Reviewers zullen elk van de vijf onderstaande beoordelingscriteria in overweging nemen bij het bepalen van wetenschappelijke en technische verdienste, en voor elk een aparte score geven. Een aanvraag hoeft niet in alle categorieën sterk te zijn om te worden beoordeeld met een grote wetenschappelijke impact. Een project dat van nature niet innovatief is, kan bijvoorbeeld essentieel zijn om een ​​vakgebied vooruit te helpen.

    Betekenis. Pakt het project een belangrijk probleem aan of een kritieke barrière voor vooruitgang in het veld? Als de doelstellingen van het project worden bereikt, hoe zullen wetenschappelijke kennis, technische bekwaamheid en/of klinische praktijk dan worden verbeterd? Hoe zal succesvolle voltooiing van de doelstellingen de concepten, methoden, technologieën, behandelingen, diensten of preventieve interventies veranderen die dit veld aandrijven?

    Onderzoeker(s). Zijn de PD/PI's, medewerkers en andere onderzoekers goed geschikt voor het project? Als onderzoekers in een vroeg stadium of nieuwe onderzoekers, of in de vroege stadia van een onafhankelijke loopbaan, hebben ze dan de juiste ervaring en opleiding? Indien gevestigd, hebben ze een voortdurende staat van dienst getoond van prestaties die hun vakgebied(en) hebben verbeterd? Als het project collaboratief of multi-PD/PI is, hebben de onderzoekers complementaire en geïntegreerde expertise en zijn hun leiderschapsaanpak, governance en organisatiestructuur geschikt voor het project?

    Innovatie. Daagt de toepassing de huidige onderzoeks- of klinische praktijkparadigma's uit en probeert deze te veranderen door gebruik te maken van nieuwe theoretische concepten, benaderingen of methodologieën, instrumentatie of interventies? Zijn de concepten, benaderingen of methodologieën, instrumentatie of interventies nieuw voor één onderzoeksgebied of nieuw in brede zin? Wordt een verfijning, verbetering of nieuwe toepassing van theoretische concepten, benaderingen of methodologieën, instrumentatie of interventies voorgesteld?

    Benadering. Zijn de algemene strategie, methodologie en analyses goed onderbouwd en geschikt om de specifieke doelstellingen van het project te bereiken? Worden potentiële problemen, alternatieve strategieën en maatstaven voor succes gepresenteerd? Als het project zich in een vroeg ontwikkelingsstadium bevindt, zal de strategie dan haalbaarheid vaststellen en zullen bijzonder risicovolle aspecten worden beheerd?
    Als het project klinisch onderzoek behelst, zijn de plannen voor 1) bescherming van proefpersonen tegen onderzoeksrisico's, en 2) inclusie van minderheden en leden van beide geslachten/geslachten, evenals de inclusie van kinderen, gerechtvaardigd in termen van de wetenschappelijke doelen en onderzoeksstrategie voorgesteld?

    Omgeving.Zal de wetenschappelijke omgeving waarin het werk wordt gedaan bijdragen aan de kans op succes? Zijn de institutionele ondersteuning, uitrusting en andere fysieke middelen die de onderzoekers ter beschikking staan, toereikend voor het voorgestelde project? Zal het project profiteren van unieke kenmerken van de wetenschappelijke omgeving, onderwerppopulaties of samenwerkingsregelingen?

    Aanvullende beoordelingscriteria

    Zoals van toepassing op het voorgestelde project, zullen reviewers overwegen: de volgende aanvullende items bij het bepalen van wetenschappelijke en technische verdienste, maar geven geen aparte scores voor deze items.

    Beschermingen voor menselijke proefpersonen. Voor onderzoek waarbij menselijke proefpersonen betrokken zijn, maar niet een van de zes categorieën van onderzoek die zijn vrijgesteld onder 45 CFR Part 46, zal de commissie de rechtvaardiging voor de betrokkenheid van proefpersonen en de voorgestelde bescherming tegen onderzoeksrisico's met betrekking tot hun deelname evalueren volgens de de volgende vijf beoordelingscriteria: 1) risico voor proefpersonen, 2) toereikendheid van bescherming tegen risico's, 3) mogelijke voordelen voor proefpersonen en anderen, 4) belang van de op te doen kennis, en 5) gegevens- en veiligheidsmonitoring voor klinische proeven .

    Voor onderzoek waarbij mensen zijn betrokken en voldoet aan de criteria voor een of meer van de zes categorieën van onderzoek die zijn vrijgesteld onder 45 CFR Part 46, beoordeelt de commissie: 1) de rechtvaardiging voor de vrijstelling, 2) de betrokkenheid en kenmerken van mensen, en 3) bronnen van materialen.

    Inclusie van vrouwen, minderheden en kinderen. Wanneer het voorgestelde project klinisch onderzoek omvat, zal de commissie de voorgestelde plannen voor inclusie van minderheden en leden van beide geslachten, evenals de inclusie van kinderen evalueren.

    Gewervelde Dieren. De commissie zal de betrokkenheid van levende gewervelde dieren als onderdeel van de wetenschappelijke beoordeling evalueren op de volgende vijf punten: 1) voorgesteld gebruik van de dieren, en soorten, stammen, leeftijden, geslacht en aantallen 2) rechtvaardigingen voor de gebruik van dieren en voor de geschiktheid van de voorgestelde soorten en aantallen 3) adequaatheid van veterinaire zorg 4) procedures om ongemak, angst, pijn en letsel te beperken tot wat onvermijdelijk is bij het uitvoeren van wetenschappelijk verantwoord onderzoek, inclusief het gebruik van pijnstillende, verdovingsmiddelen , en kalmerende middelen en/of comfortabele fixatiemiddelen en 5) euthanasiemethoden en reden voor selectie indien niet in overeenstemming met de AVMA-richtlijnen voor euthanasie. Zie https://grants.nih.gov/grants/olaw/VASchecklist.pdf voor meer informatie.

    Biologische gevaren. Reviewers zullen beoordelen of voorgestelde materialen of procedures potentieel gevaarlijk zijn voor onderzoekspersoneel en/of het milieu, en zo nodig bepalen of adequate bescherming wordt voorgesteld.

    Aanvragen opnieuw indienen. Bij het beoordelen van een Herindieningsaanvraag (voorheen een gewijzigde aanvraag genoemd), beoordeelt de commissie de aanvraag zoals nu gepresenteerd, rekening houdend met de reacties op opmerkingen van de vorige wetenschappelijke beoordelingsgroep en wijzigingen die in het project zijn aangebracht.

    Verlenging aanvragen. Bij de beoordeling van een Verlengingsaanvraag (voorheen concurrerende voortzettingsaanvraag genoemd) kijkt de commissie naar de voortgang van de afgelopen subsidieperiode.

    Revisie toepassingen. Bij de beoordeling van een herzieningsaanvraag (voorheen concurrerende aanvullingsaanvraag genoemd) zal de commissie de wenselijkheid van de voorgestelde uitbreiding van de omvang van het project meewegen. Indien de herzieningsaanvraag betrekking heeft op een specifieke onderzoekslijn gepresenteerd in de oorspronkelijke aanvraag die niet voor goedkeuring door de commissie is aanbevolen, dan zal de commissie beoordelen of de reacties op opmerkingen van de vorige wetenschappelijke beoordelingsgroep adequaat zijn en of substantiële wijzigingen duidelijk zijn evident.

    Aanvullende overwegingen bij beoordelingen

    Zoals van toepassing op het voorgestelde project, zullen beoordelaars elk van de volgende items behandelen, maar geen scores geven voor deze items en ze niet in overweging nemen bij het geven van een algemene impact/prioriteitscore.

    Aanvragen van buitenlandse organisaties. Beoordelaars zullen beoordelen of het project speciale kansen biedt voor het bevorderen van onderzoeksprogramma's door het gebruik van ongebruikelijk talent, middelen, populaties of omgevingsomstandigheden die in andere landen bestaan ​​en die ofwel niet direct beschikbaar zijn in de Verenigde Staten of bestaande Amerikaanse middelen vergroten.

    Selecteer Agentenonderzoek. Reviewers beoordelen de informatie die in dit gedeelte van de aanvraag wordt verstrekt, waaronder 1) de Select Agent(s) die in het voorgestelde onderzoek zullen worden gebruikt, 2) de registratiestatus van alle entiteiten waar Select Agent(s) zullen worden gebruikt, 3) de procedures die zullen worden gebruikt om het bezit van en de overdracht van Select Agent(s) te controleren, en 4) plannen voor passende bioveiligheid, biocontainment en beveiliging van de Select Agent(s).

    Plannen voor het delen van bronnen. Reviewers zullen aangeven of de volgende plannen voor het delen van bronnen, of de reden voor het niet delen van de volgende soorten bronnen, redelijk zijn: 1) Plan voor het delen van gegevens (http://grants.nih/gov/grants/policy/data_sharing/data_sharing_guidance. htm) 2) Modelorganismen delen (https://grants.nih.gov/grants/guide/notice-files/NOT-OD-04-042.html) en 3) Genome Wide Association Studies (GWAS) (https:/ /grants.nih.gov/grants/guide/notice-files/NOT-OD-07-088.html).

    Budget- en periodeondersteuning. Reviewers gaan na of het budget en de gevraagde ondersteuningsperiode volledig verantwoord en redelijk zijn in relatie tot het voorgestelde onderzoek.

    Aanvragen die naar aanleiding van deze financieringsmogelijkheid worden ingediend, strijden om beschikbare fondsen met alle andere aanbevolen aanvragen. Bij het nemen van financieringsbeslissingen wordt rekening gehouden met:

    • Wetenschappelijke waarde van het voorgestelde project zoals bepaald door wetenschappelijke peer review.
    • Beschikbaarheid van fondsen.
    • Relevantie van het voorgestelde project voor de programmaprioriteiten.

    3. Verwachte aankondigings- en toekenningsdatums

    Afdeling VI. Informatie over toekenningsadministratie

    Nadat de peer review van de aanvraag is afgerond, heeft de PD/PI toegang tot zijn of haar Samenvatting (schriftelijke kritiek) via de eRA Commons.

    Als de aanvraag in behandeling is voor financiering, zal de NIH "just-in-time" informatie opvragen bij de aanvrager. Voor meer informatie kunnen aanvragers verwijzen naar de Beleidsverklaring NIH Grants Deel II: Algemene voorwaarden van NIH Grant Awards, Subdeel A: Algemeen.

    Selectie van een prijsaanvraag is geen machtiging om met de uitvoering te beginnen. Eventuele kosten die vóór ontvangst van de NOA zijn gemaakt, zijn voor risico van de ontvanger. Deze kosten kunnen alleen worden vergoed in de mate die als toelaatbare pre-gunningskosten worden beschouwd. Zie ook Sectie IV.5. Financieringsbeperkingen.

    Een formele kennisgeving in de vorm van een Notice of Award (NoA) zal worden verstrekt aan de aanvragende organisatie. De door de subsidiebeheerder ondertekende NoA is het machtigingsdocument. Zodra alle administratieve en programmatische problemen zijn opgelost, wordt de NoA gegenereerd via e-mailmelding van de toekenningscomponent aan de bedrijfsfunctionaris van de begunstigde.

    2. Administratieve en nationale beleidsvereisten

    Alle NIH-subsidies en samenwerkingsovereenkomsten omvatten de NIH Grants Policy Statement als onderdeel van de NoA. Zie voor deze toekenningsvoorwaarden de NIH Grants Policy Statement Part II: Terms and Conditions of NIH Grant Awards, Subpart A: General ( https://grants.nih.gov/grants/policy/nihgps_2003/NIHGPS_Part4.htm ) en Part II Algemene voorwaarden van NIH Grant Awards, subdeel B: Algemene voorwaarden voor specifieke soorten subsidies, begunstigden en activiteiten (https://grants.nih.gov/grants/policy/nihgps_2003/NIHGPS_part9.htm).

    Als er meerdere jaren bij betrokken zijn, moeten de winnaars jaarlijks het voortgangsrapport voor niet-concurrerende voortzettingssubsidies (PHS 2590) en financiële overzichten indienen zoals vereist in de NIH verleent beleidsverklaring.

    Een definitief voortgangsrapport, een uitvindingsverklaring en een financieel statusrapport zijn vereist wanneer afstand wordt gedaan van een award wanneer een ontvanger van instelling verandert of wanneer een award wordt beëindigd.

    Afdeling VII. Contactpersonen bureau

    We moedigen uw vragen over deze financieringsmogelijkheid aan en verwelkomen de mogelijkheid om vragen van potentiële aanvragers te beantwoorden. Vragen kunnen op drie gebieden vallen: wetenschappelijk/onderzoek, collegiale toetsing en kwesties op het gebied van financieel of subsidiebeheer:

    1. Wetenschappelijke/onderzoekscontacten:

    Jean Chin, Ph.D.
    Afdeling Celbiologie en Biofysica
    Nationaal Instituut voor Algemene Medische Wetenschappen
    Gebouw 45, Kamer 2AS.19A
    45 Middenaandrijving, MSC 6200
    Bethesda, MD 20892-6200
    Telefoon: (301) 594-0828
    E-mail: [email protected]

    Peter C. Preusch, Ph.D.
    Afdeling Celbiologie en Biofysica
    Nationaal Instituut voor Algemene Medische Wetenschappen
    Gebouw 45, 2AS.13C
    45 Middenaandrijving, MSC 6200
    Bethesda, MD 20892-6200
    Telefoon: (301) 594-0828
    E-mail: [email protected]

    John R. Knowlton, Ph.D.
    Branche voor structurele biologie en moleculaire toepassingen
    Nationaal Kanker Instituut
    Executive Plaza Noord, kamer 5006
    6130 Executive Blvd, MSC 7385
    Bethesda, MD 20892-7385
    Telefoon: (301) 435-5226
    E-mail: [email protected]

    Bradley C. Wise, Ph.D.
    Neurowetenschap en neuropsychologie van verouderingsprogramma
    Nationaal Instituut voor Veroudering
    Gateway Bldg, Kamer 350
    7201 Wisconsin Ave, MSC 9205
    Bethesda, MD 20892-9205
    Telefoon: (301) 496-9350
    E-mail: [email protected]

    Nancy L. Freeman, PH.D.
    Gehoor en evenwicht/Vastibulaire tak
    Nationaal instituut voor doofheid en andere communicatiestoornissen
    Executive Plaza Zuid, Kamer 400
    6120 Executive Blvd, MSC 7180
    Bethesda, MD 20892-7180
    Telefoon: (301) 402-3458
    E-mail: [email protected]

    Salvatore Sechi, Ph.D.
    Afdeling diabetes, endocrinologie en metabole ziekten
    Nationaal Instituut voor Diabetes en Spijsverterings- en Nierziekten
    Two Democracy Plaza, kamer 611
    6707 Democratie Blvd, MSC 5460
    Bethesda, MD 20892-5460
    Telefoon: (301) 594-8814
    E-mail: [email protected]

    Rao S. Rapaka, Ph.D.
    Afdeling fundamentele neurowetenschap en gedragsonderzoek
    Nationaal Instituut voor Drugsmisbruik
    NCS-gebouw, kamer 4275
    6001 Executive Blvd., MSC 9555
    Bethesda, MD 20892-9555
    Telefoon: (301) 435-1304
    E-mail: [email protected]

    David Balshaw, Ph.D.
    Centrum voor Risico en Geïntegreerde Wetenschappen
    Nationaal Instituut voor Milieugezondheidswetenschappen
    4401 Bldg (Oost-Campus), kamer 3447
    79 TW Alexander Drive
    Research Triangle Park, NC 27709
    Telefoon: (919) 541-2448
    E-mail: [email protected]

    Bishow B. Adhikari, Ph.D.
    Afdeling Cardiovasculaire Wetenschappen
    Nationaal hart-, long- en bloedinstituut
    6701 Rockledge Drive, kamer 8186, MSC 7956
    Bethesda, MD 20892-7956
    Telefoon: (301)-435-0504
    FAX: (301)-480-1335
    E-mail: [email protected]

    3. Contactpersonen voor financieel of subsidiebeheer:

    Earl C. Melvin
    Subsidies Administratiekantoor
    Nationaal Instituut voor Algemene Medische Wetenschappen
    Gebouw 45, Kamer 2AN.32E
    45 Middenaandrijving, MSC 6200
    Bethesda, MD 20892-6200
    Telefoon: (301) 594-3912
    FAX: (301) 480-2554
    E-mail: [email protected]

    Leo Buscher
    Office of Grants Administration
    Nationaal Kanker Instituut
    Executive Plaza Zuid, kamer 234
    6120 Executive Blvd, MSC 7148
    Bethesda, MD 20892-7148
    Telefoon: (301) 496-7753
    E-mail: [email protected]

    Linda Whipp
    Subsidiebeheertak
    Nationaal Instituut voor Veroudering
    Gateway Bldg, Kamer 2N212
    7201 Wisconsin Ave, MSC 9205
    Bethesda, MD 20892-9205
    Telefoon: (301) 496-1472
    E-mail: [email protected]

    Christopher P. Myers
    Subsidiebeheertak
    Nationaal instituut voor doofheid en andere communicatiestoornissen
    Executive Plaza Zuid, Kamer 400B
    6120 Executive Blvd, MSC 7180
    Bethesda, MD 20892-7180
    Telefoon: (301) 402-0908
    E-mail: [email protected]

    Craig E. Bagdon
    Subsidiebeheertak
    Nationaal Instituut voor Diabetes en Spijsverterings- en Nierziekten
    Two Democracy Plaza, kamer 721
    6707 Democratie Blvd, MSC 5460
    Bethesda, MD 20892-5460
    Telefoon: (301) 594-2115
    E-mail: [email protected]

    Dorothy G. Duke
    Subsidiebeheertak
    Nationaal Instituut voor Milieugezondheidswetenschappen
    4401 Bldg (Oost-Campus), kamer 3403
    79 TW Alexander Dr
    Research Triangle Park, NC 27709
    Telefoon: (919) 541-2749
    E-mail: [email protected]

    Ryan C. Lombardi
    Bureau van Subsidiebeheer
    Nationaal hart-, long- en bloedinstituut
    6701 Rockledge Drive, kamer 7172, MSC 7940
    Bethesda, MD 20892-7940
    Telefoon: (301)-435-0177
    FAX: (301)-541-5462
    E-mail: [email protected]

    Afdeling VIII. Andere informatie

    Vereiste federale citaten

    Gebruik van dieren in onderzoek:
    Ontvangers van PHS-steun voor activiteiten waarbij levende, gewervelde dieren betrokken zijn, moeten voldoen aan het PHS-beleid inzake humane zorg en het gebruik van proefdieren (https://grants.nih.gov/grants/olaw/references/PHSPolicyLabAnimals.pdf), zoals voorgeschreven door de Health Research Extension Act van 1985 (https://grants.nih.gov/grants/olaw/references/hrea1985.htm), en de USDA Animal Welfare Regulations (http://www.nal.usda.gov/awic/legislat/ usdaleg1.htm ) zoals van toepassing.

    Bescherming van menselijke proefpersonen:
    Federale regelgeving (45CFR46) vereist dat aanvragen en voorstellen waarbij menselijke proefpersonen betrokken zijn, moeten worden beoordeeld op de risico's voor de proefpersonen, de toereikendheid van de bescherming tegen deze risico's, de mogelijke voordelen van het onderzoek voor de proefpersonen en anderen, en het belang van de opgedane of te verwerven kennis ( http://www.hhs.gov/ohrp/humansubjects/guidance/45cfr46.htm ).

    Data- en veiligheidsbewakingsplan:
    Gegevens- en veiligheidsmonitoring is vereist voor alle soorten klinische onderzoeken, inclusief fysiologische toxiciteits- en dosisbepalingsonderzoeken (fase I), werkzaamheidsonderzoeken (fase II), werkzaamheids-, effectiviteits- en vergelijkende onderzoeken (fase III). Monitoring moet in verhouding staan ​​tot het risico. De oprichting van data and safety monitoring boards (DSMB's) is vereist voor klinische proeven op meerdere locaties met interventies die potentiële risico's voor de deelnemers met zich meebrengen (NIH Policy for Data and Safety Monitoring, NIH Guide for Grants and Contracts, https://grants. nih.gov/grants/guide/notice-files/not98-084.html ).

    Onderzoeksgegevens delen:
    Onderzoekers die een NIH-aanvraag indienen die in een enkel jaar $ 500.000 of meer aan directe kosten vragen, zullen naar verwachting een plan voor het delen van gegevens opnemen of aangeven waarom dit niet mogelijk is (https://grants.nih.gov/grants/policy/data_sharing).

    Onderzoekers moeten advies inwinnen bij hun instellingen over kwesties die verband houden met institutioneel beleid en lokale IRB-regels, evenals lokale, staats- en federale wet- en regelgeving, inclusief de privacyregel.

    Beleid voor genoombrede associatiestudies (GWAS):
    NIH is geïnteresseerd in het bevorderen van genoombrede associatiestudies (GWAS) om gemeenschappelijke genetische factoren te identificeren die gezondheid en ziekte beïnvloeden via een gecentraliseerde GWAS-gegevensopslag. In het kader van dit beleid wordt een genoombrede associatiestudie gedefinieerd als elke studie van genetische variatie in het gehele menselijke genoom die is ontworpen om genetische associaties te identificeren met waarneembare eigenschappen (zoals bloeddruk of gewicht), of de aan- of afwezigheid van een ziekte of aandoening. Van alle aanvragen, ongeacht het gevraagde bedrag, die een genoomwijd associatieonderzoek voorstellen, wordt verwacht dat ze een plan bevatten voor het indienen van GWAS-gegevens bij de door de NIH aangewezen GWAS-gegevensopslagplaats, of een passende verklaring geven waarom indiening bij de opslagplaats niet mogelijk is. Het beheer van gegevensopslag (indiening en toegang) wordt geregeld door het beleid voor het delen van gegevens die zijn verkregen in NIH-ondersteunde of uitgevoerde genoombrede associatiestudies, NIH-gids NOT-OD-07-088. Zie https://grants.nih.gov/grants/gwas/ voor meer informatie.

    Delen van modelorganismen:
    De NIH zet zich in om inspanningen te ondersteunen die het delen van belangrijke onderzoeksbronnen aanmoedigen, waaronder het delen van modelorganismen voor biomedisch onderzoek (zie https://grants.nih.gov/grants/policy/model_organism/index.htm). Tegelijkertijd erkent de NIH de rechten van begunstigden en contractanten om uitvindingen te kiezen en te behouden die zijn ontwikkeld met federale financiering in overeenstemming met de Bayh Dole Act (zie de NIH Grants Policy Statement https://grants.nih.gov/grants/ policy/nihgps_2003/index.htm ). Van alle onderzoekers die een NIH-aanvraag of contractvoorstel indienen, te beginnen met de ontvangstdatum van 1 oktober 2004, wordt verwacht dat ze in de aanvraag/het voorstel een beschrijving opnemen van een specifiek plan voor het delen en verspreiden van unieke onderzoeksbronnen voor modelorganismen die zijn gegenereerd met behulp van NIH-financiering of staatssteun. waarom dergelijk delen beperkt of niet mogelijk is. Hierdoor kunnen andere onderzoekers profiteren van de middelen die met publieke middelen zijn ontwikkeld. Het opnemen van een plan voor het delen van modelorganismen is in geen enkel jaar onderworpen aan een kostendrempel en zal naar verwachting worden opgenomen in alle aanvragen waarbij de ontwikkeling van modelorganismen wordt verwacht.

    Toegang tot onderzoeksgegevens via de Wet op de vrijheid van informatie:
    De Office of Management and Budget (OMB) circulaire A-110 is herzien om onder bepaalde omstandigheden toegang te bieden tot onderzoeksgegevens via de Freedom of Information Act (FOIA). Gegevens die (1) voor het eerst worden geproduceerd in een project dat geheel of gedeeltelijk wordt ondersteund met federale fondsen en (2) publiekelijk en officieel worden geciteerd door een federaal agentschap ter ondersteuning van een actie die kracht en effect heeft van de wet (dwz, een verordening) zijn toegankelijk via FOIA. Het is belangrijk dat aanvragers de fundamentele reikwijdte van dit amendement begrijpen. NIH heeft richtlijnen verstrekt op https://grants.nih.gov/grants/policy/a110/a110_guidance_dec1999.htm. Aanvragers kunnen gegevens die in het kader van deze financieringsmogelijkheid zijn verzameld, in een openbaar archief plaatsen, dat de gegevens kan beschermen en de distributie voor onbepaalde tijd kan beheren. Indien dit het geval is, dient de aanvraag een beschrijving van het archiveringsplan te bevatten in de onderzoeksopzet en informatie hierover op te nemen in het onderdeel budgetverantwoording van de aanvraag. Bovendien moeten aanvragers nadenken over hoe ze geïnformeerde toestemmingsverklaringen en andere procedures voor mensen kunnen structureren, gezien het potentieel voor een breder gebruik van gegevens die in het kader van deze prijs zijn verzameld.

    Opname van vrouwen en minderheden in klinisch onderzoek:
    Het is het beleid van de NIH dat vrouwen en leden van minderheidsgroepen en hun subpopulaties moeten worden opgenomen in alle door de NIH ondersteunde klinische onderzoeksprojecten, tenzij een duidelijke en overtuigende rechtvaardiging wordt gegeven die aangeeft dat inclusie ongepast is met betrekking tot de gezondheid van de onderwerpen of het doel van het onderzoek. Dit beleid vloeit voort uit de NIH Revitalization Act van 1993 (Sectie 492B van Publiekrecht 103-43). Alle onderzoekers die klinisch onderzoek voorstellen, dienen de "NIH-richtlijnen voor de inclusie van vrouwen en minderheden als proefpersonen in klinisch onderzoek" te lezen (https://grants.nih.gov/grants/guide/notice-files/NOT-OD-02-001.html ) een volledige kopie van de bijgewerkte richtlijnen is beschikbaar op https://grants.nih.gov/grants/funding/women_min/guidelines_amended_10_2001.htm Het gewijzigde beleid omvat: het gebruik van een NIH-definitie van klinisch onderzoek bijgewerkte raciale en etnische categorieën in overeenstemming met de nieuwe OMB-normen verduidelijking van de taal die van toepassing is op door de NIH gedefinieerde Fase III klinische onderzoeken in overeenstemming met het nieuwe PHS-formulier 398 en bijgewerkte rollen en verantwoordelijkheden van het NIH-personeel en de extramurale gemeenschap. Het beleid blijft vereist voor alle door de NIH gedefinieerde Fase III klinische proeven die: a) alle aanvragen of voorstellen en/of protocollen een beschrijving moeten bevatten van plannen om analyses uit te voeren, waar van toepassing, om verschillen naar geslacht/geslacht en/of raciale/etnische groepen aan te pakken, met inbegrip van groepen indien van toepassing en b) onderzoekers moeten jaarlijkse opbouw en voortgang rapporteren bij het uitvoeren van analyses, indien van toepassing, naar geslacht/geslacht en/of raciale/etnische groepsverschillen.

    Opname van kinderen als deelnemers aan klinisch onderzoek:
    De NIH handhaaft een beleid dat kinderen (d.w.z. personen onder de 21 jaar) moeten worden opgenomen in alle klinische onderzoeken, uitgevoerd of ondersteund door de NIH, tenzij er wetenschappelijke en ethische redenen zijn om ze niet op te nemen.Alle onderzoekers die onderzoek met menselijke proefpersonen voorstellen, moeten het "NIH-beleid en -richtlijnen" over de inclusie van kinderen als deelnemers aan onderzoek met menselijke proefpersonen lezen (https://grants.nih.gov/grants/funding/children/children.htm).

    Vereiste opleiding over de bescherming van deelnemers aan menselijke proefpersonen:
    Het NIH-beleid vereist voorlichting over de bescherming van proefpersonen voor alle onderzoekers die NIH-aanvragen indienen voor onderzoek waarbij proefpersonen betrokken zijn en personen die zijn aangewezen als sleutelpersoneel. Het beleid is beschikbaar op https://grants.nih.gov/grants/guide/notice-files/NOT-OD-00-039.html.

    Menselijke embryonale stamcellen (hESC):
    Criteria voor federale financiering van onderzoek naar hESC's zijn te vinden op http://stemcells.nih.gov/index.asp en op https://grants.nih.gov/grants/guide/notice-files/NOT-OD-09 -116.html . Alleen onderzoek met hESC-lijnen die zijn geregistreerd in het NIH Human Embryonic Stem Cell Registry komt in aanmerking voor federale financiering (http://escr.nih.gov/). Het is de verantwoordelijkheid van de aanvrager om in de projectbeschrijving en elders in de aanvraag indien van toepassing, de officiële NIH-identificator(en) op te geven voor de hESC-lijn(en) die in het voorgestelde onderzoek moeten worden gebruikt.

    Vereiste van het NIH-beleid voor openbare toegang:
    In overeenstemming met het NIH Public Access Policy ( https://grants.nih.gov/grants/guide/notice-files/NOT-OD-08-033.html ), moeten onderzoekers hun definitieve, peer - beoordeelde manuscripten die voortkomen uit NIH-fondsen en die vanaf 7 april 2008 voor publicatie zijn geaccepteerd bij PubMed Central (http://www.pubmedcentral.nih.gov/), die uiterlijk 12 maanden na publicatie openbaar beschikbaar moeten worden gemaakt. Vanaf 27 mei 2008 moeten onderzoekers het PubMed Central-referentienummer vermelden bij het citeren van een artikel in NIH-aanvragen, -voorstellen en -voortgangsrapporten die onder het beleid vallen en dat (mede)auteur is van de onderzoeker of voortvloeit uit de NIH van de onderzoeker prijs. Zie de webpagina voor openbare toegang op http://publicaccess.nih.gov/ voor meer informatie.

    Normen voor privacy van individueel identificeerbare gezondheidsinformatie:
    Het Department of Health and Human Services (DHHS) heeft op 14 augustus 2002 de definitieve wijziging van de "Standards for Privacy of Individually Identifiable Health Information", de "Privacy Rule", uitgegeven. De Privacy Rule is een federale regelgeving onder de Health Insurance Portability en Accountability Act (HIPAA) van 1996 die de bescherming van individueel identificeerbare gezondheidsinformatie regelt, en wordt beheerd en gehandhaafd door het DHHS Office for Civil Rights (OCR).

    Beslissingen over toepasselijkheid en implementatie van de Privacy Regel liggen bij de onderzoeker en zijn/haar instelling. De OCR-website ( http://www.hhs.gov/ocr/ ) biedt informatie over de privacyregel, inclusief een volledige verordeningstekst en een reeks beslissingshulpmiddelen over "Ben ik een gedekte entiteit?" Informatie over de impact van de HIPAA-privacyregel op NIH-processen met betrekking tot de beoordeling, financiering en voortgangsbewaking van subsidies, samenwerkingsovereenkomsten en onderzoekscontracten is te vinden op https://grants.nih.gov/grants/guide/notice- bestanden/NOT-OD-03-025.html .

    URL's in NIH-subsidieaanvragen of bijlagen:
    Alle aanvragen en voorstellen voor NIH-financiering moeten op zichzelf staan ​​binnen de gespecificeerde paginabeperkingen. Voor publicaties vermeld in de bijlage en/of voortgangsrapportage, internetadressen (URL's) moeten wordt gebruikt voor publiekelijk toegankelijke online tijdschriftartikelen. Tenzij anders vermeld in dit verzoek, internetadressen (URL's) moeten niet worden gebruikt om enige ander informatie die nodig is voor de beoordeling, omdat reviewers niet verplicht zijn de internetsites te bekijken. Bovendien waarschuwen we reviewers dat hun anonimiteit in het gedrang kan komen wanneer ze rechtstreeks toegang krijgen tot een internetsite.

    Gezonde mensen 2010:
    De Public Health Service (PHS) zet zich in voor het bereiken van de doelstellingen voor gezondheidsbevordering en ziektepreventie van "Healthy People 2010", een door de PHS geleide nationale activiteit om prioriteitsgebieden vast te stellen. Deze FOA is gerelateerd aan een of meer van de prioriteitsgebieden. Potentiële aanvragers kunnen een exemplaar van "Healthy People 2010" verkrijgen op http://www.health.gov/healthypeople.

    Autoriteit en regelgeving:
    Dit programma wordt beschreven in de Catalogus van Federale Binnenlandse Hulp op http://www.cfda.gov/ en is niet onderworpen aan de intergouvernementele herzieningsvereisten van Executive Order 12372. Toekenningen worden gedaan onder de autorisatie van secties 301 en 405 van het publiek Health Service Act zoals gewijzigd (42 USC 241 en 284) en onder Federal Regulations 42 CFR 52 en 45 CFR Parts 74 en 92. Alle toekenningen zijn onderworpen aan de algemene voorwaarden, kostenprincipes en andere overwegingen beschreven in de NIH Grants Policy Statement . De NIH Grants Policy Statement is te vinden op https://grants.nih.gov/grants/policy/policy.htm.

    De PHS moedigt alle subsidieontvangers sterk aan om een ​​rookvrije werkplek te bieden en het gebruik van alle tabaksproducten te ontmoedigen. Bovendien verbiedt Publiekwet 103-227, de Pro-Children Act van 1994, roken in bepaalde faciliteiten (of in sommige gevallen, enig deel van een faciliteit) waar regulier of routineonderwijs, bibliotheek, dagopvang, gezondheidszorg of diensten voor de ontwikkeling van jonge kinderen worden verleend aan kinderen. Dit komt overeen met de PHS-missie om de fysieke en mentale gezondheid van het Amerikaanse volk te beschermen en te bevorderen.

    Terugbetalingsprogramma's voor leningen:
    NIH moedigt aanvragen voor terugbetaling van educatieve leningen aan van gekwalificeerde gezondheidswerkers die zich ertoe hebben verbonden een onderzoekscarrière na te streven met betrekking tot klinische, pediatrische, anticonceptie-, onvruchtbaarheids- en gezondheidsongelijkheden. Het LRP is een belangrijk onderdeel van de inspanningen van de NIH om de volgende generatie onderzoekers te werven en te behouden door de middelen te verschaffen voor het ontwikkelen van een onderzoekscarrière die niet wordt gehinderd door de last van studieleningen. Merk op dat een NIH-beurs niet vereist is om in aanmerking te komen en gelijktijdige loopbaantoekenning en LRP-aanvragen worden aangemoedigd. De perioden van de loopbaanonderscheiding en de LRP-toekenning kunnen elkaar overlappen, wat de LRP-ontvanger de vereiste tijd en moeite geeft, aangezien de LRP-bekroonden ten minste 50% van hun tijd (ten minste 20 uur per week op basis van een 40-urige werkweek) moeten besteden aan twee jaar tot het onderzoek. Zie voor meer informatie: http://www.lrp.nih.gov/.

    Opmerking: Zie Help bij het downloaden van bestanden voor hulp bij het openen van PDF-, RTF-, MS Word-, Excel-, PowerPoint-, audio- of videobestanden.


    Inhoud

    Classificatie per structuur Bewerken

    Er zijn twee basistypen transmembraaneiwitten: [3] alfa-helix- en bèta-vaten. Alfa-helix-eiwitten zijn aanwezig in de binnenmembranen van bacteriële cellen of het plasmamembraan van eukaryoten, en soms in de buitenmembranen. [4] Dit is de belangrijkste categorie van transmembraaneiwitten. Bij mensen is geschat dat 27% van alle eiwitten alfa-helix membraaneiwitten zijn. [5] Beta-barrel-eiwitten worden tot nu toe alleen aangetroffen in buitenmembranen van gramnegatieve bacteriën, celwanden van grampositieve bacteriën, buitenmembranen van mitochondriën en chloroplasten, of kunnen worden uitgescheiden als porievormende toxines. Alle beta-barrel transmembraan-eiwitten hebben de eenvoudigste op-en-neer-topologie, die hun gemeenschappelijke evolutionaire oorsprong en vergelijkbaar vouwmechanisme kan weerspiegelen.

    Naast de eiwitdomeinen zijn er ongebruikelijke transmembraanelementen gevormd door peptiden. Een typisch voorbeeld is Gramicidine A, een peptide dat een dimeer transmembraan a-helix vormt. [6] Dit peptide wordt door Gram-positieve bacteriën als antibioticum uitgescheiden. Een transmembraan polyproline-II-helix is ​​niet gemeld in natuurlijke eiwitten. Niettemin werd deze structuur experimenteel waargenomen in speciaal ontworpen kunstmatige peptiden. [7]

    Classificatie op topologie Bewerken

    Deze classificatie verwijst naar de positie van het eiwit N- en C-termini aan de verschillende zijden van de lipidedubbellaag. Typen I, II, III en IV zijn single-pass moleculen. Type I transmembraaneiwitten zijn verankerd aan het lipidemembraan met een stop-transferankersequentie en hebben hun N-terminale domeinen gericht op het endoplasmatisch reticulum (ER) lumen tijdens synthese (en de extracellulaire ruimte, als rijpe vormen zich op celmembranen bevinden) . Type II en III zijn verankerd met een signaal-ankersequentie, waarbij type II gericht is op het ER-lumen met zijn C-terminale domein, terwijl type III hun N-terminale domeinen hebben gericht op het ER-lumen. Type IV is onderverdeeld in IV-A, met hun N-terminale domeinen gericht op het cytosol en IV-B, met een N-terminale domein gericht op het lumen. [8] De implicaties voor de verdeling in de vier typen zijn vooral duidelijk op het moment van translocatie en ER-gebonden translatie, wanneer het eiwit door het ER-membraan moet worden gepasseerd in een richting die afhankelijk is van het type.

    Membraaneiwitstructuren kunnen worden bepaald door röntgenkristallografie, elektronenmicroscopie of NMR-spectroscopie. [10] De meest voorkomende tertiaire structuren van deze eiwitten zijn de transmembraanhelixbundel en de bètabarrel. Het deel van de membraaneiwitten dat aan de lipidedubbellaag is bevestigd (zie ringvormige lipideschil) bestaat voornamelijk uit hydrofobe aminozuren. [11]

    Membraaneiwitten die hydrofobe oppervlakken hebben, zijn relatief flexibel en worden op relatief lage niveaus tot expressie gebracht. Dit zorgt voor problemen bij het verkrijgen van voldoende eiwitten en het groeien van kristallen. Vandaar dat, ondanks het significante functionele belang van membraaneiwitten, het bepalen van atomaire resolutiestructuren voor deze eiwitten moeilijker is dan bolvormige eiwitten. [12] Vanaf januari 2013 waren minder dan 0,1% van de bepaalde eiwitstructuren membraaneiwitten, ondanks dat dit 20-30% van het totale proteoom was. [13] Vanwege deze moeilijkheid en het belang van deze klasse van eiwitten zijn methoden voor het voorspellen van de eiwitstructuur op basis van hydropathieplots, de positieve inside-regel en andere methoden ontwikkeld. [14] [15] [16]

    Stabiliteit van α-helix transmembraaneiwitten

    Transmembraan -helix-eiwitten zijn ongewoon stabiel, te oordelen naar thermische denaturatiestudies, omdat ze zich niet volledig ontvouwen binnen de membranen (voor het volledig ontvouwen zou te veel α-helix H-bindingen in de niet-polaire media moeten worden afgebroken). Aan de andere kant kunnen deze eiwitten gemakkelijk verkeerd vouwenals gevolg van niet-eigen aggregatie in membranen, overgang naar de toestand van gesmolten bolletjes, vorming van niet-eigen disulfidebindingen of ontvouwen van perifere gebieden en niet-reguliere lussen die lokaal minder stabiel zijn. [ citaat nodig ]

    Het is ook belangrijk om de uitgevouwen staat. De uitgevouwen staat van membraaneiwitten in wasmiddelmicellen verschilt van die in de thermische denaturatie-experimenten. [ citaat nodig ] Deze toestand vertegenwoordigt een combinatie van gevouwen hydrofobe α-helices en gedeeltelijk ongevouwen segmenten bedekt door het detergens. Het "ongevouwen" bacteriorodopsine in SDS-micellen heeft bijvoorbeeld vier transmembraan-α-helices gevouwen, terwijl de rest van het eiwit zich op het micel-watergrensvlak bevindt en verschillende soorten niet-inheemse amfifiele structuren kan aannemen. Verschillen in vrije energie tussen dergelijke gedenatureerde en natuurlijke toestanden zijn vergelijkbaar met de stabiliteit van in water oplosbare eiwitten (< 10 kcal/mol). [ citaat nodig ]

    Vouwen van α-helix transmembraaneiwitten

    Hervouwen van α-helix transmembraaneiwitten in vitro is technisch moeilijk. Er zijn relatief weinig voorbeelden van succesvolle hervouwingsexperimenten, zoals voor bacteriorodopsine. In vivo, worden al dergelijke eiwitten normaal co-translationeel gevouwen binnen het grote transmembraan translocon. Het translocon-kanaal biedt een zeer heterogene omgeving voor de ontluikende transmembraan--helices. Een relatief polaire amfifiele α-helix kan een transmembraanoriëntatie aannemen in de translocon (hoewel deze zich aan het membraanoppervlak zou bevinden of zich zou ontvouwen in vitro), omdat de polaire resten naar het centrale met water gevulde kanaal van de translocon kunnen kijken. Een dergelijk mechanisme is nodig voor het opnemen van polaire a-helices in structuren van transmembraaneiwitten. De amfifiele helices blijven aan het translocon gehecht totdat het eiwit volledig is gesynthetiseerd en gevouwen. Als het eiwit te lang ontvouwd en aan de translocon gehecht blijft, wordt het afgebroken door specifieke "kwaliteitscontrole" cellulaire systemen. [ citaat nodig ]

    Stabiliteit en vouwing van β-barrel transmembraaneiwitten

    De stabiliteit van β-barrel transmembraaneiwitten is vergelijkbaar met de stabiliteit van in water oplosbare eiwitten, gebaseerd op chemische denaturatiestudies. Sommigen van hen zijn zeer stabiel, zelfs in chaotrope middelen en hoge temperaturen. Hun vouwen in vivo wordt vergemakkelijkt door in water oplosbare chaperonnes, zoals eiwit Skp. Er wordt gedacht dat β-barrel-membraaneiwitten afkomstig zijn van één voorouder, zelfs met een verschillend aantal vellen die tijdens de evolutie kunnen worden toegevoegd of verdubbeld. Sommige onderzoeken tonen een enorm behoud van sequenties tussen verschillende organismen en ook geconserveerde aminozuren die de structuur vasthouden en helpen bij het vouwen. [17]

    Lichtabsorptie-gedreven transporters Bewerken

    Oxidoreductie-gedreven transporters

    • Transmembraan cytochroom b-achtige eiwitten: co-enzym Q - cytochroom c-reductase (cytochroom bc1) cytochroom b6f-complex formiaatdehydrogenase, respiratoir nitraatreductasesuccinaat - co-enzym Q-reductase (fumaraatreductase) en succinaatdehydrogenase. Zie elektronentransportketen. van bacteriën en mitochondriën

    Elektrochemische potentiaalgedreven transporters

    PP-binding hydrolyse-gedreven transporters

    • P-type calcium ATPase (vijf verschillende conformaties)
    • Calcium-ATPase-regulatoren fosfolamban en sarcolipine
    • Algemene secretoire route (Sec) translocon (preproteïne translocase SecY)

    Porters (uniporters, symporters, antiporters)

      drager eiwitten
  • Major Facilitator Superfamily (Glycerol-3-fosfaattransporter, Lactosepermease en Multidrug-transporter EmrD) (multidrug effluxtransporter AcrB, zie multidrug-resistentie)
  • Dicarboxylaat/aminozuur: kation-symporter (protonglutamaat-symporter)
  • Monovalent kation/proton-antiporter (natrium/proton-antiporter 1 NhaA) natriumsymporter
  • Ammoniaktransporters
  • Drug / Metabolite Transporter (kleine multidrug-resistentie transporter EmrE - de structuren zijn ingetrokken als onjuist)
  • Alfa-helixkanalen inclusief ionenkanalen Bewerken

      zoals, inclusief kaliumkanalen KcsA en KvAP, en naar binnen gerichte kaliumionenkanaal Kirbac van neurotransmitterreceptoren (acetylcholinereceptor)
    • Buitenmembraan hulpeiwitten (polysaccharide transporter) - α-helix transmembraan eiwitten van het buitenste bacteriële membraan

    Enzymen Bewerken

    Eiwitten met alfa-helix transmembraan ankers

      transmembraan dimerisatie domein ]
    • Cytochroom-c-nitrietreductasecomplex
    • Sterylsulfaatsulfohydrolase
    • Stannin Een dimeer
    • Inovirus (filamenteuze faag) belangrijkste manteleiwit-geassocieerd eiwit A en B [18].
    • Membraanprotease specifiek voor een stomatine-homoloog

    Β-vaten samengesteld uit een enkele polypeptideketen

      Beta-vaten van acht bèta-strengen en met "afschuifnummer" van tien (n=8, S=10). Ze bevatten:
        (OmpA) (OmpX) (OmpW) (PagP) (NspA)

      Opmerking: N en S zijn respectievelijk het aantal bèta-strengen en het "afschuifgetal" [19] van de bèta-barrel


      <p>Deze sectie bevat alle nuttige informatie over het eiwit, voornamelijk biologische kennis.<p><a href='/help/function_section' target='_top'>Meer. </a></p> Functie i

      Kan betrokken zijn bij het inbrengen van integrale membraaneiwitten in het membraan.

      <p>Handmatig gevalideerde informatie die is gegenereerd door het UniProtKB automatische annotatiesysteem.</p> <p><a href="/manual/evidences#ECO:0000255">Meer. </a></p> Handmatige bewering volgens regels i

      <p>Handmatig samengestelde informatie waarvoor experimenteel bewijs is gepubliceerd.</p> <p><a href="/manual/evidences#ECO:000269">Meer. </a></p> Handmatige bewering op basis van experiment in i


      Gedeelde Flashcard-set

      Alle cellen delen bepaalde basiskenmerken: ze worden allemaal begrensd door een selectieve barrière die de _________ wordt genoemd. In alle cellen bevindt zich een halfvloeibare, geleiachtige substantie genaamd ______.

      Een belangrijk verschil tussen prokaryote en eukaryote cellen is de locatie van hun ____. In een eukaryote cel bevindt het meeste DNA zich in een organel genaamd de ____, die wordt begrensd door een dubbel membraan. In een prokaryotische cel is het DNA geconcentreerd in een gebied dat niet door een membraan is omsloten, de _____.

      versterkt celvormfuncties in celbeweging componenten zijn gemaakt van eiwit. omvat:

      __________, Tussenfilamenten, __________.

      Netwerk van vliezige zakjes en buizen die actief zijn in membraansynthese en andere synthetische en metabloïsche processen heeft ruwe (riboosome-bezaaide) en gladde gebieden (ruwe en gladde ER)

      De kernzijde van de envelop is omzoomd door de _____ _____, een netachtige reeks eiwitfilamenten die de vorm van de kern behoudt door de nucleaire envelop mechanisch te ondersteunen.


      Een geautomatiseerd platform voor structurele analyse van membraaneiwitten door seriële kristallografie

      Membraaneiwitten staan ​​centraal in veel pathofysiologische processen, maar blijven op structureel niveau erg moeilijk te analyseren. Bovendien is de high-throughput structuurgebaseerde medicijnontdekking nog niet benut voor membraaneiwitten vanwege een gebrek aan automatisering. Hier presenteren we een eenvoudig en veelzijdig platform voor: in meso membraaneiwitkristallisatie, waardoor snelle bepaling van de atomaire structuur mogelijk is bij zowel cryogene als kamertemperatuur en in een enkele drager. We passen deze benadering toe op twee menselijke integrale membraaneiwitten, waardoor we verschillende conformationele toestanden van intramembraan enzym-productcomplexen konden vastleggen en de structurele dynamiek van het ADIPOR2 integrale membraaneiwit konden analyseren. Ten slotte demonstreren we een geautomatiseerde pijplijn die microkristallen met hoge doorvoer combineert, geautomatiseerd op laser gebaseerde oogsten en seriële kristallografie waardoor screening van kleine molecuulbibliotheken met gekweekte membraaneiwitkristallen mogelijk wordt. in meso. Deze benadering zorgt voor de broodnodige automatisering voor deze belangrijke klasse van medicijndoelen en maakt het mogelijk om op structuur gebaseerde ligand-ontdekking met hoge doorvoer met membraaneiwitten.

      Een volledig geautomatiseerde, online workflow maakt een snelle bepaling van membraaneiwitstructuren door seriële röntgenkristallografie (SSX) mogelijk.

      Hoge resolutie kamertemperatuur en cryogene structuren van ADIPOR2 geven inzicht in de dynamische aard van receptor:ligand interacties.

      Een webgebaseerde applicatie maakt een door de gebruiker begeleid experimenteel ontwerp en uitvoering op afstand mogelijk.

      Een geautomatiseerde SSX-gebaseerde ligand-ontdekkingspijplijn voor integrale membraaneiwitten wordt geïntroduceerd.